实验一、蛋白质的两性电离及等电点测定.ppt_第1页
实验一、蛋白质的两性电离及等电点测定.ppt_第2页
实验一、蛋白质的两性电离及等电点测定.ppt_第3页
实验一、蛋白质的两性电离及等电点测定.ppt_第4页
实验一、蛋白质的两性电离及等电点测定.ppt_第5页
已阅读5页，还剩6页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

实 验 一 蛋 白 质 两 性 电 离 与 等 电 点,【教学目标】 1、独立操作，一丝不苟地作实验。 2、仔细观察不同阶段试剂颜色变化及沉淀的出现和消失，通过现象观察能分析蛋白质两性电离的性质，正确填写实验报告。 3、通过往五支不同pH值溶液的试管内加入酪蛋白，观察沉淀出现的情况，确定其等电点。 4、共同讨论测定等电点的原理。,一、蛋白质的两性电离,多肽链中氨基酸残基中有可解离基团，如：末端-COO-、-NH3+，酸性氨基酸侧链- COO- ，Lys的-NH3+，Arg的胍基，His的咪唑基。,*蛋白质的等电点(pI) 当蛋白质溶液处于兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。,各种蛋白质的氨基酸组成不同，解离情况不同，等电点不同。多数接近5.0。,蛋白质的性质之一：两性电离与等电点,【实验原理】 蛋白质分子是两性电解质。蛋白质在溶液的pH值为等电点时游离为两性离子，溶解度最低，容易沉淀析出。若在大于或小于等电点的溶液中，因蛋白质分子带有同种电荷而相互排斥，不易产生沉淀。,【试剂】 1、0.5酪蛋白醋酸钠 2、0.01溴甲酚绿指示剂 变色范围是pH3.85.4。指示剂的酸色型为黄色，碱色型为蓝色。 3、0.02molL盐酸溶液 4、0.02molL氢氧化钠溶液 5、1.00molL乙酸溶液 6、0.10molL乙酸溶液 7、0.01molL乙酸溶液,【操作】,1、蛋白质的两性电离 （1）取一支试管，加入0.5酪蛋白醋酸钠溶液20滴和0.01溴甲酚绿指示剂2滴，摇匀。观察溶液颜色，记录，并分析原因。 （2）用细滴管缓慢加入0.02mol/L盐酸溶液，、边滴边摇，直至有明显的大量沉淀发生，此时溶液的pH值接近酪蛋白的等电点。观察溶液颜色的变化，记录，分析原因。 （3）继续滴入0.02molL盐酸溶液，观察沉淀和溶液颜色的变化，记录，分析原因。 （4）再滴入0.02molL氢氧化钠溶液进行中和，观察是否出现沉淀，记录，解释原因。当继续滴入0.02molL氢氧化钠溶液时，观察沉淀和溶液颜色的变化。解释其原因。作好记录。,2、酪蛋白等电点的测定 （1）取5支试管，编号后按下表的顺序准确地加入各种试剂，然后混合均匀(每管加入酪蛋白醋酸钠溶液后，须立即摇匀该管)。,(2)静置约20 min，观察每支试管中溶液的混浊度，以-，+，+，+，+符号表示沉淀的多少，将结果记录于上表中。,（3）该实验要求各种试剂的浓度和加入量必须相当准确。除了需要精心配制试剂以外，实验中应严格按照定量分析的操作进行。 思考题 根据实验观察结果，指出哪一
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论