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文档简介
硅胶薄层色谱板的制备和 硅胶色谱柱的填装,天然药物学,一、实验目的,掌握硅胶薄层色谱板的制备方法。 掌握硅胶色谱柱的填装方法。,二、原理及应用,吸附色谱。 硅胶薄层板可用于化合物定性与定量。 硅胶色谱柱可用于化合物分离和纯化。,装置图(一),薄层色谱,层析缸,薄层板,装置图(二),溶剂,石英砂或固定相,硅胶,砂芯或棉花,柱色谱装置,关于薄层色谱和柱色谱,相同点:薄层色谱和柱色谱都属于液固吸附色谱,都是经过在吸附剂和展开剂(洗脱剂)之间的多次吸附溶解作用,将混合物中各组分分离成孤立的样点,实现混合物的分离。,不同点:,薄层色谱:是将吸附剂涂布在玻璃板上,形成薄薄的平面涂层。干燥后在涂层的一端点样,竖直放入一个盛有少量展开剂的有盖容器中。展开剂接触到吸附剂涂层,借毛细作用向上移动。,柱色谱:是将吸附剂装于柱中,当待分离的混合物溶液流过吸附柱时,各种成分同时被吸附在柱的上端。当洗脱剂流下时,由于不同化合物吸附能力不同,往下洗脱的速度也不同,从而达到分离的目的。,三、实验步骤,、硅胶薄层色谱板的制备 1、把一份硅胶H和三份0.75%CMC-Na水溶液(M:V)溶液置研钵中充分研匀。 2、将玻璃板置一水平的平面上,取适量硅胶和CMC-Na混合物倒入玻璃板上,轻轻震动使混合物在玻璃板上铺匀,阴干。 3、把阴干好的硅胶板在105的烘箱中烘30min。 4、待板凉至室温后,至干燥器中保存。,、硅胶色谱柱的填装 1、将一小团脱脂棉放于色谱柱底部。 2、将硅胶慢慢倒入色谱柱中,轻轻敲击柱子外侧。 3、打开活塞,将洗脱剂慢慢加入柱子中流过柱体,直至整个柱床全部润湿。关闭活塞备用。,三、实验步骤,四、注意事项,硅胶和CMC-Na要充分研匀,没有硅胶团和气泡。 混合物的量要适中,不能铺的太厚。 装柱时硅胶一次性全部加入。 在洗脱剂没全部
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