动物细胞工程（知识梳理）

第三节 动物细胞工程,选修3 第二章 细胞工程,主要内容,动物细胞与组织培养,动物细胞核移植技术,动物细胞融合,单克隆抗体制备,4,1,2,3,动物细胞工程常用技术手段包括,一、动物细胞与组织培养,学习目标： 1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用 2、对比说出动物细胞培养与植物组织培养原理、条件、结果、培养目的,请自主完成导学案课前预习部分,一、动物细胞与组织培养,1概念： （1）材料：取自动物 或 动物的器官或组织。 （2）场所：在 模拟动物 。 （3）目的：使动物细胞或组织继续 、 并维持原有的 和 。,一、动物细胞与组织培养,2过程： （1）动物细胞培养： 取动物组织块剪碎，用 处理，形成分散的 ，此称细胞悬液，然后接种到 中培养，待细胞分裂形成一层细胞，转移到新培养液中继续培养。 （2）动物组织培养： 剪取动物组织块，用 冲洗，将组织块移入 ，使组织块 在培养瓶的瓶壁上，称贴壁培养。,一、动物细胞与组织培养,3培养的条件： （1）环境条件：包括 、 、 和 等。 温度：哺乳动物多以 为宜； PH值：多数细胞生存的最适pH为 ； 气体：细胞培养所需气体主要有 和 ， 是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的 ； 营养成分：有 等。,一、动物细胞与组织培养,5技术的应用：用于 、 和 等领域。 补充概念： 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到4050代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官（取材）,细胞悬液,10代细胞,传代培养,无限传代,单个细胞,加培养液,（分解细胞间的蛋白）,过程：,动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质,一、动物细胞与组织培养,补充概念： 细胞贴壁：在培养瓶中，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象叫做接触抑制。,细胞贴壁过程,那么什么是接触抑制？,接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。,接触抑制,部分细胞突变，获得不死性，向癌细胞方向发展，糖蛋白减少。,一、动物细胞与组织培养,探究 1、在动物细胞培养过程中，为什么选择胚胎期或幼龄动物的器官和组织？ 2、为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理？胃蛋白酶不行吗？ 3、动物细胞培养与植物细胞培养相同吗？动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？,植物组织培养和动物细胞培养的比较,二、细胞核移植与动物体细胞克隆,1克隆： 指遗传上完全相同的 、 或来自同一祖先的生物个体的 。 2动物体细胞克隆： 将供体体细胞的 与受体去核卵细胞的 进行人工组合，借助于卵细胞的发育能力，经过培养发育成 进而形成新个体的技术，其关键是 技术，利用的是动物细胞核的 性。 3细胞核移植： 利用 技术等将某种动物细胞的 移入同种或者异种动物的 的技术。,二、细胞核移植与动物体细胞克隆,4大致过程如下：（动物克隆）,二、细胞核移植与动物体细胞克隆,细胞质,细胞核,细胞核移植,二、细胞核移植与动物体细胞克隆,5克隆技术应用： 在克服动物 杂交繁殖障碍、创造 等方面具有重要意义和潜在经济价值；在医药卫生领域，人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化形成相应的组织、器官，可用于组织器官的 （治疗性克隆）；此外，还能利用克隆技术保护和挽救 。 但是目前克隆技术并不成熟，仍存在某些问题，有待进一步完善。,二、细胞核移植与动物体细胞克隆,讨论 1、动物核移植技术选择的受体细胞为什么是卵细胞？ 2、你认为用体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 3、阅读课本56页积极思维，从社会伦理道德方面思考生殖性克隆会引发哪些社会问题？ 4、分析图2-12的技术路线，找出生殖性克隆与治疗性克隆的区别，以及应该阻断哪一步来阻止生殖性克隆？ 5、讨论克隆技术的应用和前景。,三、动物细胞融合与单克隆抗体,（一）动物细胞融合 1概念：是指 或 结合形成一个细胞的过程。 2诱导动物细胞融合的方法： 物理法： 、 常见的诱导因素有 化学法： 、 生物法： 等。 3应用：制造 。,三、动物细胞融合与单克隆抗体,（二）单克隆抗体 1制备过程： （1）能产生抗体的细胞是： ； 能够无线增殖的细胞： ； （2）利用 融合，检验和筛选杂交细胞。 （3） 该杂交细胞，并筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是： 。 （4）在 或者 中培养杂交细胞，获取单克隆抗体。单克隆抗体的优点： _、_、_。,三、动物细胞融合与单克隆抗体,2单克隆抗体的应用： 单克隆抗体具有_、_、_、_和 优点，主要用于治疗疾病和运载药物，如治疗_、_等。,准确、高效、简易、快速,单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。,诊断试剂最广泛应用,“生物导弹” 单克隆抗体药物 单抗导向，药物为弹头,治疗疾病和运载药物,主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。,三、动物细胞融合与单克隆抗体,探究 1、比较植物体细胞杂交和动物细胞融合（完成表格）,三、动物细胞融合与单克隆抗体,2、制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞？在融合的过程中你可以找出几种类型的细胞？ 3、制备单克隆抗体的过程有两次筛选，两次筛选的目的是什么？,BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤）,（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活,获得产生相应抗体的B细胞,（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内培养,杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。,三、动物细胞融合与单克隆抗体,小结以下内容（制备单克隆抗体原理） 利用_产生特异性抗体的功能。 利用_无限增殖的特性。 利用_