《显色培养基》PPT课件.ppt

显色培养基 Chromogenic media,四川大学华西公共卫生学院 王国庆 ,显色培养基的原理,2,细菌在其生长繁殖过程中可合成和释放某些特异性的酶， 按酶的特性，选用相应的底物和指示剂，将其配制在相关的培养基中。 根据细菌反应后出现的明显的颜色变化，确定待分离的可疑菌株，反应的测定结果有助于细菌的快速诊断,显色培养基是利用微生物具有种属特异性酶的特点，在培养基中加入相应的显色酶底物，经微生物生长代谢产生酶水解底物释放色原物质使培养物着色，从而进行目标微生物筛选鉴别。,显色酶底物的类型,荧光的显色底物(fluorogenic substrates)，酶水解相应荧光底物后释放的荧光色原在一定波长的紫外光照射下，使目标微生物的培养物呈现荧光； 可见光显色底物(chromogenic substrates)，酶水解相应的可见光显色底物后释放的色原在可见光下可使目标微生物的培养物显现特有的颜色。,与传统的检测方法相比，显色培养基的灵敏性、特异性和选择性都明显优于传统培养基， 节省时间、人力和资金投入，为微生物的分离和检测提供了新途径。,4,显色培养基优点,非目标菌的竞争作用，常会造成目标菌漏检和检测结果假阴性 降低了显色培养基的灵敏性；,某种细菌不同血清型可能存在特异性酶反应的差异，结果在显色培养基上出现不同颜色的菌落，还需要辅助观察或传统生化试验才能对菌株作鉴定；,显色培养基中的抑菌剂在抑制杂菌生长的同时可能对目标菌产生一定的影响；,一些显色培养基在检测过程中只能对目标菌进行定性分析，还不能定量分析。,5,显色培养基缺点,非目标菌也存在特异性酶反应造成检测结果的假阳性降低了显色培养基的特异性；,6,主要生产商,国外：,国内：,北京陆桥技术有限责任公司 ESM系列,青岛海博生物技术有限公司,法国科马嘉 CHROMagarTM,法国生物梅里埃 chromID,英国OXOID公司,广东环凯微生物 科技有限公司,7,8,9,10,11,12,大肠杆菌显色培养基 (ECA),用于大肠杆菌的快速鉴别和计数，18-24h可初步判定结果,大肠杆菌:蓝绿色 其他: 无色或被抑制,大肠杆菌和大肠菌群液体显色培养基(LECC) Liquid E.coli&Coliform Chromagenic medium,可同时检测大肠杆菌和大肠菌群MPN法计数，24h可判定结果,大肠杆菌 蓝绿色、有荧光 大肠菌群 蓝绿色、无荧光,13,大肠杆菌和大肠菌群显色培养基(ECC) E. coli & Coliform Chromagenic medium,用于大肠杆菌和大肠菌群的同时快速鉴别和计数，,大肠杆菌 蓝绿色 大肠菌群 紫红色,14,大肠杆菌和大肠菌群显色培养基(ECC) E. coli & Coliform Chromagenic medium,用于大肠杆菌和大肠菌群的同时快速鉴别和计数，18-24h可初步判定结果,大肠杆菌 蓝绿色 大肠菌群 紫红色,15,大肠菌群显色培养基(CA) Coliform Chromagenic Agar,用于大肠菌群的快速鉴别和计数，18-24h可初步判定结果,大肠菌群 蓝绿色 其他 无色或被抑制,16,沙门氏菌显色培养基 Salmonellae Chromagenic medium,用于沙门氏菌的选择性分离鉴别，18-24h可初步判定结果,沙门菌 （浅）紫红色 其他 蓝绿色、无色， 或不生长,17,李斯特氏菌显色培养基 Listeria Chromagenic medium,用于李斯特氏菌的选择性分离鉴别，24h可初步判定结,单增李斯特菌 ：绿色菌落，周围有晕圈 绵阳李斯特菌 ：绿色菌落，周围有晕圈 英诺克李特菌：绿色菌落,18,大肠杆菌O157:H7显色培养基 E.coli O157:H7 Chromagenic medium,用于大肠杆菌O157:H7的选择性分离鉴别，24h可初步判定结果,大肠杆菌O157:H7 紫红色 其他大肠杆菌 蓝色 其他 无色或被抑制,19,阪崎肠杆菌显色培养基 E. Sakazakii Chromagenic medium,用于坂崎肠杆菌的选择性分离鉴别，24h可初步判定结果,阪崎肠杆菌 蓝绿色 大肠菌群 无色菌落 金黄色葡萄球菌 被抑制,20,弧菌显色培养基 Vibrio Chromagenic medium,用于副溶血性弧菌的分离鉴别，24h可初步判定结果,副溶血性弧菌 紫红色 霍乱弧菌 蓝绿色 拟态弧菌 蓝绿色,21,CHROMagar Candida,Candida albicans - green Candida tropicalis - metalic blue Candida krusei - rose,22,CHROMagar O157,E.coli O157 purple other bacterial colonies - inhibited, blue or colourless,23,CHROMagar Salmonella,Salmonella - purple other bacterial colonies - inhibited, blue or colourless,24,CHROMagar Staph.aureus,金黄色葡萄球菌- 紫色菌落 其它- 被抑制，蓝色或无色菌落,25,CHROMagar Listeria,单增李斯特菌- 蓝色菌落周围有白色环 其它菌- 被抑制，或蓝色菌落周围无白色环，或无色菌落,26,CHROMagar Vibrio,Vibrio parahaemolyticus Mauve(淡紫色) Vibrio cholerae - Turquoise-Blue （蓝绿色） Vibrio alginolyticus - Colourless Other bacterial colonies inhibited or colourless,27,CHROMagar E.coli,E.coli - blue,28,CHROMagar ECC,Rambach Agar,for the detection of Salmonella,Using Rambach Agar, a species specific positive chromogenic medium based on the metabolisation of propylene glycol by Salmonella and with procedures identical to those used in classical agar culture methods,Salmonella - red other bacterial colonies - blue, violet or colourless,Rapid and reliable (no false positive) detection of non-typhi Salmonella,29, E. coli positive Beta-glucuronidase is a specific enzyme observed in E. coli in the enterobacteria excluding Salmonella and Shigella, as maintained in 95% of E. coli. This beta-glucuronidase hydrolyzes the chromogenic enzyme substrate X-GLUC to generate blue coloring. Coliform group positive The chromogenic enzyme substrate Magenta-GAL is hydrolyzed by beta-galactosidase generated by coliform group, coloring the colony in red.,Pr