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文档简介

实验一 显微镜的使用保养 与中药临时制片技术,一、显微镜的使用和保养,显微镜的结构 镜座 镜臂 镜筒 载物台 光路系统:目镜、物镜、集光器、光源,物镜 低倍镜:4、10 用于观察整体结构、寻找特定特征。 高倍镜:40 、100 (油镜) 用于观察特定细微结构与组织特征, 油镜较为少用。,使用注意与技巧 先低倍后高倍,即先整体后局部 之字形扫描式寻找需要观察的特征 由低倍镜转成高倍镜后,只能使用微调 高倍镜观察时,应通过控制光源强度、 集光器高低、虹彩光阑的张合,并结合 微调,使被观察物清晰。,使用过程及使用后的保养 显微制片必须将多余的装置液清理干净, 以免沾染镜头。 如目镜与物镜被沾染,则以镜头纸从中 央向四周以划圆圈的方式擦拭。必要时 还要使用去污剂擦拭。,使用完毕后,移去玻片,按上述方法擦 拭,将最低倍物镜转入光路,载物台复位。 关闭电源,拔下插座,盖上防尘罩。 在相应使用登记本上签名。,二、粉末临时制片,粉末临时制片操作要领 粉末用量:米粒大小。 每次滴加装置液23滴。 每次滴加装置液后需要搅拌均匀。 控制搅拌范围约为盖玻片大小。 如加热透化,则重复进行34次, 沸即离火,勿烧干、焦。,加盖玻片时应先一侧接触装置液,缓缓 放下,最后抽出镊子,以排除气泡。 以吸水纸吸去溢出的装置液。 稍放置待凉后,镜检。,水装片或斯氏液装片 适用于观察淀粉粒。 装置液:蒸馏水或斯氏液(甘油醋酸)。 不可加热,否则淀粉粒糊化。,天花粉粉末淀粉粒,水合氯醛加热透化装片 适用于除淀粉粒、菊糖以外的大多数组织、细胞、细胞后含物的观察。 装置液:水合氯醛(水合三氯乙醛)、 稀甘油。 需要加热。,天花粉粉末石细胞,天花粉粉末石细胞,天花粉粉末具缘纹孔导管,水合氯醛或乙醇装片 适用于观察菊糖。 装置液:水合氯醛或乙醇。 不可加热,否则菊糖溶解。,党参菊糖(水合氯醛装置),水合氯醛装置液的作用 使细胞膨胀,便于观组织、细胞及其 内含物特征。 去除细胞表面或内部杂质。 增强透明度。,稀甘油装置液的作用 增加透明度。 防止气泡生成。 防止水合氯醛结晶析出。,三、整体透化装片,整体透化装片的目的与操作 目的:避免出现有些组织在粉末中破碎 或不完整而影响观察。 材料:多为叶或花。,操作:切或剪取叶或花约4mm2 ,外表朝 上,透化后观察。 装置液:水合氯醛、稀甘油。 需要加热。,金银花两种非腺毛,金银花腺毛,金银花花粉粒,四、叶表皮撕片,叶表皮撕片适用对象及操作 适用对象:观察表皮细胞、气孔、毛茸。 材料:通常为叶下表皮。,操作:以镊子自下表面夹住少许叶片,往 一侧撕取表皮。将撕下的表皮外表面朝上 置于滴有12滴水的载玻片上,使其自然展 开,盖片观察。,何首乌叶下表皮组织,五、徒手制片,徒手制片的目的及材料 目的:观察组织构造、细胞特征; 材料:新鲜、干燥或经固定的材料,常用固定液FAA固定液: 70乙醇 90ml 福尔马林(3740甲醛) 5ml 冰醋酸 5ml,取材 材料分割成适当大小,直径必须小于 盖玻片。 材料软化或冲洗 坚硬的干燥材料于稀甘油10醋酸液中 煮至表面无气泡。 固定材料需在流水中冲洗12小时以上。,操作:取新鲜或已软化的中药材,用拇指及食指和中指夹住材料,下端用无名指托住,另外一只手持刀片,自左向右移动手腕,牵曳切片。 操作时材料的断面与刀口须经常用水湿润。 以毛笔将切好的薄片移入在盛水培养皿 中浸泡。,装片 将切片以镊子夹出,置于滴加了甘油的载玻片上,加上盖玻片;或滴加水合氯醛加热透化,滴加稀甘油后加上盖玻片。,徒手切片桑枝横切面,作业与思考 1、实验完成后应做哪些善后工作? 2、由低倍镜转换成

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