课件：肝炎项目检测.ppt

,肝炎病毒检测 童效云 2011.1.13,肝炎病毒及分子生物学简介,肝炎病毒家族是一大类引起病毒性肝炎的病原体，根据其病毒特征并结合流行病学资料与临床表现，可将肝炎病毒分为甲肝病毒、乙肝病毒、丙肝病毒、丁肝病毒、戊肝病毒及庚肝病毒。 病毒性肝炎的感染率和发病率都非常高，已称为全球严重的公共卫生问题，在我国归为法定的乙类传染病。 随着医学和分子生物学的发展，肝炎病毒的分子生物学诊断也飞速发展，新的肝炎分子生物学诊断可以根据患者自身感染病毒的不同，历史用药情况的不同，因人而异的开展肝炎病毒的诊断和治疗方案的制定。 目前肝炎病毒的的分子生物学检测对于肝炎的早期诊断，病毒的分型，治疗方案的制定，药物疗效的监控，以及抗病毒药物的敏感性判断，临床用药指导方面都有着无可比拟的优势。,乙肝点击,我国乙肝病毒携带者约1.2亿人，大约10个人中就有1人携带乙肝病毒，其中慢性乙肝患者约有3000万例，每年有35万人死于慢性乙肝的相关疾病； HBV DNA持续阳性超过6个月的会转为慢性肝炎。50以上抗HBe阳性慢性肝病病人，经平均4.5年发展为肝硬化，常与HBV DNA持续阳性有关； 拉米夫定等核苷类抗病毒药，虽具有强烈的抑制HBV DNA复制的作用，但长期服用可出现耐药现象，经过研究证实其与乙肝病毒P区基因突变有关。,公司情况,艾迪康公司特检中心利用自身的技术优势，开展了全面完整的肝炎诊断项目，为临床诊断和治疗提供可靠、具体、客观的全方位服务。 环境PCR实验室经国家卫生部临检中心验收并获验收合格证书； 仪器美国ABI公式生产的ABI 7300荧光定量基因扩增仪及ABI 3100全自动DNA测序仪； 质控参加卫生部和当地省市临检中心组织的室间质评，并取得优异的成绩； 人员由经过卫生部临检中心培训并获PCR上岗证的专业人员进行操作。,艾迪康开展的项目,乙型肝炎 乙型肝炎病毒核酸检测 乙型肝炎病毒基因分型检测 乙型肝炎病毒钱C区/C区变异测序 乙型肝炎病毒P区耐药基因测序 乙型肝炎病毒前S区/S区耐药基因测序 乙型肝炎病毒细胞内cccDNA检测 乙型肝炎病毒YMDD突变检测 乙型肝炎病毒基因分型检测 乙型肝炎病毒C区/C区1896、1762、1764位点变异 丙型肝炎 丙型肝炎病毒核酸检测 丙型肝炎病毒基因分型检测 其他型肝炎 甲型肝炎病毒核酸检测 丁型肝炎病毒核酸检测 戊型肝炎病毒核酸检测,标本类型及送检要求,血清、血浆可0-20保存，全血要4 保存，不可冷冻，；组织保存要求请联系本公司。 0冰上运输血液标本，2-4 保存不超过24小时，-20 保存不超过一周； 24小时内到达公司最好，最迟不能超过72小时； 标本禁忌反复冻融。,采集及送检和单据填写注意事项,用于采集标本的试管或容器需无菌，严禁使用肝素抗凝管； 送检标本含量应1000IU/ml; 血清样本：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分），收集上清，如有沉沉行成，应再次离心； 血浆样本：EDTA抗凝，无菌采集，混合均匀后离心1020分钟后收集上清，如有沉淀，应再次离心； 如果是组织或是其他特殊样本，请提前与中心联系，以便确认正确的保存以及运送条件； 血液标本采集是注意无菌操作，避免污染； 溶血中、脂血标本影响定量、突变类检测成功率，但是不影响检出率，病毒含量越高，影响越小。 单据使用专用申请单（正在印刷中，乙肝/丙肝分子诊断学综合检查申请单）单据上注明临床用药情况，服用时间，病程、病史、病毒含量。 任何标本和原始申请单必须同时到达杭州特检部。 首次送检的标本打印报告单时一定要将格式、内容跟杭州出具的报告单核对，备注内容是否齐全，（参考范围、项目顺序、箭头指示等).,报告时间计算,起止时间自标本到达杭州特检实验室起算； 非浙江区域要加上物流的路途时间 例如： 某项目报告时间是三个工作日 杭州1月3日接收标本 ，三个工作日 ，1月6日出报告； 安庆1月3日接收标本，3日晚到达合肥，4日托运至杭州，5日早上到达杭州特检实验室，三个工作日，8号出报告； 工作日： 每周一到周六上班，周日和固定假日为非工作日； 标本延迟原因 标本扩增失败，复查； 交接延迟，项目不清； 病毒含量低； 交接临床情况询问：病程病史，用药换药情况； 报告单打印格式 有A4和A5两种版式，医院首次送检的标本须保证查询单据正确。,HBsAg、HBeAg全定量检测,意义 ：研究发现联合定量检测血清HBsAg、HBeAg的水平可识别活动性HBV携带者； HBsAg与HBeAg的变化是乙肝治疗的重要指标与停药节点； HBsAg与HBeAg的全定量指标的动态变化与变化趋势是乙肝个性化治疗的重要依据，可确定疗程及治疗终点； 适用人群 初诊病人预后判断及病情确定 干扰素以及其他药物疗效预测 E S抗原全定量检测需要进行动态分析，方能获得最大意义。,乙肝病毒P区耐药检测,临床意义： 耐药变异株不仅抗药性增加，而且可能加重肝损害，引起病情反复，甚至加重； 耐药病毒的出现使后续治疗的药物疗效降低 耐药病毒的出现抵消了之前获得的临床益处 使用核苷类似物治疗的慢性乙肝患者，必须定期检测耐压情况； 根据耐药情况及时换药加药或更改治疗方案，使病人获得更好的治疗效果； 适用人群 治疗发生原发性不应答的患者建议进行P区耐药检测 治疗过程中发生部分病毒学应答的患者建议进行P区耐药检测 建议使用核苷类似物治疗的患者均应每三个月检测一次P区耐药，从而及时调整对病人的用药方案 对于更改治疗方案的病人（如加药、换药等），均应每三个月检测P区耐药情况，确认病毒是否发生新的变异。,高灵敏度乙肝病毒核酸检测,临床意义 普通的HBV DNA 灵敏度较低，无法监控低载量病毒复制情况，高灵敏度HBV DNA检测灵敏度很高，检测下限可以达到50-70copy/ml，对于乙肝治疗终点以及停药时间的确定有着非常重要的意义，并且可很好的对低载量病毒患者进行病毒监控。 使用人群 对慢性乙肝患者体内的病毒数量进行检测； 服用抗病毒药物的慢性乙肝患者检测药物疗效情况； 长期服用抗病毒药物疗效较好的患者进行停药时机的判断； 对已经停药的患者进行体内病毒含量的检测，确认再次开始治疗的时机。,乙肝病毒基因分型检测,临床意义 根据HBV全基因核苷酸序列异源性85或S基因区核苷酸序列异源性4 ，将不同的病毒株分为不同的基因型，迄今为止，HBV可以分为8个基因型，即A 、B 、C、 D 、E 、F、 G 、H 型，HBV基因型的分布有一定的地域性，我国是以B、 C 型为主。不同的基因型的病毒可能具有不同的毒力，HBV基因分型对乙肝临床和分子流行病学至关重要，不同的基因分型，临床症状，病情转归，药物治疗效果等均不相同。 适用人群 判断患者病情进展情况，建议检测基因分型； 对于治疗方案适应干扰素的患者，必须检测基因分型； 预测病情，判断病毒致病性，判断病程及转归，建议检测基因分型。,乙肝病毒前C区/C区变异 及1762、1764、1896位点变异检测,并非所有的HBeAg阳转阴的感染者病情都趋于好转，相当部分的慢性肝炎患者都检测到HBeAg阴性，但是感染者的 HBV DNA却呈现高载量，这是由于这部分患者前C区或者C区发生变异，使得HBeAg分泌减少或停止分泌。C区变异的病人使得病毒更容易逃逸机体的细胞免疫、体液免疫作用，造成肝细胞持续损伤，炎症反应加重。 适用人群 HBeAg含量降低但HBV DNA高载量的病人，建议检测C区变异，判明病因； 临床观察发生血清学转换的病人，检验检测C区变异，避免误诊、漏诊； 长期使用核苷类药物，但是病毒载量始终维持在103-106之间不能继续下降的病人，建议检测C区变异； 重症肝炎，炎症反应剧烈，肝脏病情进展迅速的病人，检验检测C区变异。,乙肝病毒前S区和S区变异检测,临床意义 前S1基因突变可导致前S2蛋白缺失，前S区/S区变异可使疫苗或免疫球蛋白保护无效，使HBV逃避干扰素治疗和宿主免疫清除，S区变异会导致HBSAg表达受到影响，临床表现为HBSAg阴性而HBSAb阳性、HBV DNA阳性的隐匿性肝炎，前S区/S区变异可使肝炎的症状进展更加迅速，与肝硬化、肝癌的发生有一定关系。 适用人群 乙肝两对半定性结果全阴HBV DNA 的患者 HBSAg阴性而HBSAb阳性、 HBV DNA阳性确定是否隐匿性肝炎，防止误诊漏诊； 经免疫球蛋白治疗后的孕妇，建议检测S区变异观察免疫球电白对病毒的阻断作用。,白介素28B基因多态性检测,临床意义 染色体19上的白介素28B（IL-28B）基因多态性与患者对聚乙二醇化干扰素a（长效干扰素）与利巴韦林治疗具有持续病毒学反应有关。 适用人群 适用于所有治疗方案为干扰素+利巴韦林的病人判断药物应答和预后情况，以便在效果不佳时更改治疗方案。,丙型肝炎病毒基因分型检测,临床意义 不同基因型感染者的临床表现有差异，血清抗体反应有差异，肝脏受损程度有差异； 不同基因型感染者对干扰素的诊疗效果有差异； 不同的基因型和基因亚型的HCV对肝脏的损害程度不同； HCV基因型与肝病严重程度有着密切关系，并且对抗病毒治疗产生很大影响； 适用人群 所有需要进行治疗的丙型肝炎病人均需检测基因分型。,肝纤维化指标检测,临床意义 肝纤维化是包括慢性乙肝在内各种慢性肝病发展的共同途径，抗病毒治疗与抗纤维化治疗两者之间不能相互替代，而是相辅相成互相促进； 血清学指标检测无创伤、无危险、临床符合率高，因此，血清学检测成为了肝纤维化早期诊断和治疗的最佳途径。 中华医学会病毒性肝炎防止方案中,谢谢！,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用,主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每