已阅读5页,还剩6页未读, 继续免费阅读
版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
实验三 细胞内液泡系和线粒体的活体染色,实验目的 定义及原理 操作程序 作业,返回大纲,一 实验目的,了解活体染色的定义及原理 熟悉液泡系和线粒体活体染色 的方法和步骤 掌握动植物细胞活体染色的原理和相关的技术,返回,二 定义及原理,所谓活体染色,是指利用某些无毒或毒性较小的染色剂显示出细胞内某些天然构造存在的真实性,而不影响细胞的生命活动,不产生任何物理化学变化以致引起细胞的死亡的染色方法。即在染色和观察过程中,细胞或组织始终 保持其生命状态。 活染法弥补了活观察法不能显示细胞精细结构的不足,也避免了固定染色法对细胞结构的破环和造成人为假象的弊病。遗憾的是,适宜活体染色的染料较少,能显示出的结构和种类也不多。,二 定义及原理,活体染色分为体内活染和体外活染两种。前者是将染料注射于生物体内,染色后再取材观察。后者是取材后,对年离体的活细胞进行染色。为保持离体细胞的正常存活,染色时需供给细胞以正常的温度,渗透压,PH等。 关于活染的机制,一般认为,线粒体能被健那绿-B染成兰色,是由线粒体内的细胞色素氧化酶使染料保持在氧化状态,即有色状态,而在周围的细胞质中,这些染料被还原成无色的色基,液泡系被中性红染色,则主要是染料的堆积作用。中性红为碱性染料,其胶粒表面带阳离子,被染部分具阴离子,它们彼此之间就发生了电吸附作用(静电吸附)。,返回,二 定义及原理,液泡是细胞内浓缩产物的主要场所,有十分重要的功能。中性红(neutral red)是液泡的特殊染色剂,只将液泡染成红色。在细胞处于生活状态时,细胞质和细胞核不被中性红染色。,线粒体是细胞内的一个重要细胞器,是细胞进行呼吸作用的场所。健那绿B(Janus green B)对线粒体具有专一性的染色,是毒性最小的碱性染料。健那绿B染色是由于线粒体中的细胞色素氧化酶系的作用,使染料始终保持氧化状态,呈蓝绿色,而周围的细胞质被还原成无色的色基。,三 操作程序,用镊子撕取莴笋叶片下表皮细胞,置于中性红中染色10分钟。可见许多大小不同的液泡,有些液泡处于不断晃动之中。,三 操作程序,用解剖针破坏蛙的脊髓,然后把腹部皮肤剪开,使露出胸骨的剑突部分,剪取剑突软骨边缘最薄的部分一小块,放入载片中央的中性红染液中,染色1030分钟,盖上盖玻片。用高倍镜观察,可见软骨细胞为椭圆形、细胞核及核仁清楚易见,在细胞核的上方有许多被染成玫瑰红大小液泡,此区即液泡区。,三 操作程序,取蛙肝脏边缘一小块组织,放入生理盐水中洗涤去除血液,将肝组织置于滴有健那绿-B的载玻片上,用镊子镊或撕拉肝组织,然后将整快的肝组织移出,加盖玻片观察破碎的肝细胞。染色10min左右可见玻片上有形状规则的椭圆形血细胞,形状不规则的近于方圆形的肝细胞及远远小于细胞的作不规则运动的线粒体。,三 操作程序,用镊子撕取玉树叶叶片下表皮,健那绿-B染色10分钟,可在细胞质中看到随细胞质环流而运动的被染成兰色的线粒体。,三 操作程序,用镊子撕取莴笋叶片下表皮细胞,置于中性红中染色10分钟。可见许多大小不同的液泡,有些液泡处于不断晃动之中。 用解剖针破坏蛙的脊髓,然后把腹部皮肤剪开,使露出胸骨的剑突部分,剪取剑突软骨边缘最薄的部分一小块,放入载片中央的中性红染液中,染色1030分钟,盖上盖玻片。用高倍镜观察,可见软骨细胞为椭圆形、细胞核及核仁清楚易见,在细胞核的上方有许多被染成玫瑰红大小液泡,此区即液泡区。 取蛙肝脏边缘一小块组织,放入生理盐水中洗涤去除血液,将肝组织置于滴有健那绿-B的载玻片上,用镊子镊或撕拉肝组织,然后将整快的肝组织移出,加盖玻片观察破碎的肝细胞。染色10min左右可见玻片上有形状规则的椭圆形血细胞,形状不规则的近于方圆形的肝细胞及远远小于细胞的作不规则运动的线粒体。 用镊子撕取玉树叶叶片下表皮,健那
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 购房合同范本范本5篇
- 木材出口虫害防治措施
- 金融风险管控方案
- 沿湖绿化病虫害防治方案
- 水产养殖疫病防控传染病检验报告单
- 川芎在抗衰老方面的临床应用与配伍
- 园艺植物病害防治手册
- 夏季幼儿园传染病防控措施
- 体育中标通知书
- ICU机械通气患者康复治疗探讨
- 受限空间作业票填写模板
- 防洪防汛监理实施标准细则
- 心脏急危重症诊治课件
- 叉车技能比武方案(12篇)
- 初中物理概念知识结构图
- (本科)社会学概论5版全套教学课件完整版PPT
- 子宫肌瘤的教学查房
- 2022义务教育英语课程标准【2022年版】测试题4套(含答案)
- 数据库运维 形考5-数据库性能监视与优化实验
- 华为5G性能优化指导手册
- 《建筑设计资料集》(第二版)课件第1篇 概论
评论
0/150
提交评论