初复治肺结核病人免疫功能指标变化的研究.pdf初复治肺结核病人免疫功能指标变化的研究.pdf

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【论著】初复治肺结核病人免疫功能指标变化的研究张志强1,2,游力311山东省医学科学院,山东济南250062;21山东省胸科医院,山东济南250013;31山东大学生殖医学研究中心,山东济南250021中图分类号R52文献标识码A文章编号16729153201006049903第一作者简介张志强1979~,男,本科,主管技师,研究方向卫生检验。摘要目的探讨肺结核病人的的免疫功能变化,以及相关指标在初复治、菌阴阳组之间是否存在差异。方法采用流式细胞术检测外周血B细胞、T细胞亚群、NK细胞以及采用免疫透射比浊法测定IGG、IGA、IGM。结果肺结核患者与正常人相比,CD4T细胞、CD8T细胞,CD4/CD8、IGG差异有统计学意义;初治菌阳组与正常对照组相比较,CD4T细胞、CD4/CD8的差异有统计学意义;初复治对CD4T细胞计数的影响有统计学意义。菌阴阳对各指标之间差异无统计学意义。结论CD4T细胞对肺结核病人的预后有重要的影响。CD8T细胞及体液免疫在肺结核的细胞免疫功能中发挥重要作用。关键词肺结核;免疫;流式细胞术;免疫球蛋白INVESTIGATIONOFIMMUNITYFUNCTIONININITIALLY2TREATEDANDRETREATEDTUBERCULOSISPATIENTS/ZHANGZHI2QIANG,YOULI1SHANDONGACADEMYOFMEDICALSCIENCES,JI’NAN,250062,SHANDONG,CHINAABSTRACTOBJECTIVETOANALYZEDIFFERENCEBETWEENTUBERCULOSISPATIENTSANDNORMALPEOPLEINIMMUNITY,ANDINVESTI2GATETHETWOFACTORSINITIALLY2TREATMENT,RETREATMENT;SPUTUMSMEARPOSITIVE,SPUTUMSMEARNEGATIVEWHETHERAFFECTLUNGTUBERCULOSISPATIENTS’IMMUNITYORNOT1METHODSFCMWASPERFORMEDFORANALYSISOFBCELLS,TCELLS,ANDNKCELLSINPE2RIPHERALWHOLEBLOODOFOURCASES1IMMUNITYTRANSMISSIONTURBIDITYWASEMPLOYEDTODETECTIGA,IGGANDIGM1RESULTSITHADSIGNIFICANTDIFFERENCEBETWEENTUBERCULOSISPATIENTSANDNORMALGROUPINLEVELOFCD4TCELL,CD8TCELL,CD4/CD8RATIOP01051MEANWHILE,CD4TCELLANDCD4/CD8RATIOLEVELHADSIGNIFICANTDIFFERENCEBETWEENTHEPATIENTSININI2TIALLY2TREATEDANDSMEARPOSITIVEGROUPANDINNORMALGROUP,NODIFFERENCEWASAVAILABLEAMONGOTHERGROUPS1THEFACTORINITIALLY2TREATMENT,RETREATMENTMAYHAVEANEFFECTONCD4TCELLCOUNTP01051BUTTHERESULTSBETWEENSMEARPOSITIVEGROUPANDSMEARNEGATIVEGROUPHADNODIFFERENCEP0105INEACHTEST1CONCLUSIONCD4TCELLMAYPLAYANIMPORTANTROLEINOUTCOMESOFTUBERCULOSISPATIENTS1CD8TCELLANDHUMORALIMMUNITYPLAYANIMPORTANTROLEINIMMUNEFUNCTIONOFTHETUBERCULOSISPATIENTS1KEYWORDSTUBERCULOSIS;IMMUNITY;FLOWCYTOMETRY;IMMUNOGLOBULIN结核病是由结核分枝杆菌MYCOBACTERIUMTU2BERCULOSIS,MTB引发的传染性疾病。结核病的传播在发展中国家依然普遍,且发达国家的疫情又见回升。WHO统计表明,全世界每年发生结核病800万~1000万例,每年约有200万人死于结核病1,是死亡人数最多的传染病,已成为重要的公共卫生问题。结核菌是典型的胞内菌,其所激发的T细胞反应包括保护性免疫和免疫病理损伤是结核病最重要的免疫反应。但有研究证明体液免疫的存在。因此本文采用流式细胞术检测外周血B细胞、T细胞亚群、NK细胞以及采用免疫透射比浊法测定IGG、IGA、IGM。1对象与方法111对象所有研究对象均为山东省胸科医院2008年2月至2009年9月的住院病人,HIV阴性且未接受激素或者免疫抑制剂治疗的肺结核患者,共计132例。年龄为14~86岁,其中男性93例,最大为86岁,最小为16岁,平均51岁;女性39例,最大为77岁,最小为14岁,平均50岁。依据病人的临床症状、胸部X光片、痰浓缩涂片检查、药物敏感性测定情况,对病人进行分组,分为初治肺结核菌阳组初,复治肺结核菌阳组复,初治肺结核菌阴组初2,复治肺结核菌阴组复2,并设正常对照组。正常对照组19例,年龄为17~84岁,其中男性11例,女性8例,既往无肺结核病史及无免疫药物治疗史。112方法11211标本清晨空腹012EDTA2K2抗凝血2ML994预防医学论坛2010年6月第16卷第6期PREVMEDTRIB,VOL16,NO6,JUN2010以及自凝血3ML。11212B细胞、T细胞及NK细胞检测流式细胞仪型号为EPICSXL型,美国BECKMANCOULTER公司生产,用SYSTEMⅡ,VERSION310软件分析。11213结核抗体检测结核分枝杆菌抗体检测试剂盒酶联免疫法成都永安制药有限公司生产,批号20090702,有效期至2010年1月6日。11214免疫球蛋白检测试剂四川迈克科技公司提供的免疫球蛋白GAM测定试剂盒批号0509021,有效期至2010年5月9日,免疫透射比浊法,仪器为奥林巴斯AU2400生化分析仪。所有操作严格按照说明书进行操作。113统计方法采用SPSS1610FORWINDOWS统计软件包进行统计分析。2结果211检测结果采用独立样本T检验分析,肺结核患者与正常人相比,CD4T细胞、CD8T细胞、CD4/CD8、IGG在两组之间差异有统计学意义T2141、2137、2187、2108,P0105。其余指标CD3T细胞、NK细胞、B细胞、IGA、IGM差异无统计学意义T0165、1133、0156、0130、0169,P0105。见表1。表1结核组与正常对照组功能指标比较组别CD3CD4CD8CD4/CD8NKB细胞IGGG/LIGAG/LIGMG/L结核组72171017401891130198161147017151112161118612121721921170161126016对照组751041248126102410511211018915316131041410161162111016114016212不同组间检测结果采用单向方差分析,CD4T细胞、CD4/CD8两项目在组间差异有统计学意义F2167、2185,P0105。即初治菌阳组与正常对照组相比较,CD4T细胞、CD4/CD8的差异具有统计学意义。其他各组差异无统计学意义F0133、1185、2104、0109、1172、0177、1130,P0105。见表2。表2各组与正常对照组免疫功能指标比较组别CD3CD4CD8CD4/CD8NKB细胞IGGG/LIGAG/LIGMG/L初72181116401291331148161141016514119131117613131021821190151132016初2691981637159143110121611470188181913101117716121331721070190199017复721451343177182817619116901801510817121161312102122126016111016复27511811441981428198121170017012105151115318111931611880171106013对照组75104134812610241051121200180914316131041410161162111016114016213不同组各指标检测结果采用析因设计资料的方差分析,初复治对CD4T细胞的影响具有统计学意义F4123,P0105,但对其他指标差异无统计学意义。菌阴、阳对各指标之间差异无统计学意义F0101、0108、0、0102、1184、0102、0124、2141、1117,P0105。见表3、表4。表3初治组和复治组各指标比较组别CD3CD4CD8CD4/CD8NKB细胞IGGG/LIGAG/LIGMG/L初治组72161115401091231138191142017141491611176141219219212015113016复治组731361344117192818712117018151381611195151119217211016111015表4菌阴组和菌阳组各指标比较组别CD3CD4CD8CD4/CD8NKB细胞IGGG/LIGAG/LIGMG/L菌阳组7217111040179113110814115017141291211186131218218212015111016菌阴组721781541149142919101111601815111216111651712113152100181100153讨论结核病是由结核分枝杆菌引发的传染性疾病。当结核菌侵入机体后,最初由巨噬细胞对其进行吞噬并完成加工、递呈作用,T细胞对其作为“非己”物质进行识别。尽管结核菌是典型的胞内菌,其所激发的T细胞反应是结核病最重要的免疫反应,其中以CD4T细胞的作用最为关键,其次是CD8T细胞免疫2。005预防医学论坛2010年6月第16卷第6期PREVMEDTRIB,VOL16,NO6,JUN2010但有资料证明体液免疫的存在3。CD3的功能主要是转导TCR识别抗原所产生的活化信号,激活T淋巴细胞,诱导机体产生细胞免疫,起信号转导作用。我们的研究结果显示,初治组的CD3T细胞低于对照组,说明在结核菌感染的初期,CD3T细胞的水平是降低的。CD4T细胞的作用主要是分泌多种细胞因子而放大免疫反应,属于辅助性T淋巴细胞亚群。CD4T细胞通过分泌细胞因子IFN2Γ等,激活巨噬细胞,从而抑制胞内结核菌的生长。我们的研究表明,CD4T细胞在初治菌阳组、菌阴组中明显低于正常对照组,复治菌阳和菌阴组其水平低于正常对照组,但无显著性差异。说明在肺结核感染的初期,病人的细胞免疫功能明显降低;随着肺结核的进展,部分CD4T细胞已经开始恢复功能。研究还发现初治组和复治组之间的CD4T细胞的差异具有显著性。复治病人的CD4T细胞水平与正常对照组无明显差异,因此CD4T细胞反映患者的治疗效果和预后好坏。CD4T细胞的变化,提示机体免疫反应能力差异,预示患者治疗预后的不同。这与其他研究结果一致4。CD4T细胞的升高也将预示着此类患者的预后将会较好。近年来人们逐渐重视CD8T细胞亚群在控制结核菌感染时的功能5。CD8T细胞与CD4T细胞共同维持机体的免疫稳定。我们的研究表明,CD8T细胞各组与正常对照组之间无明显差异,但是水平高于正常对照组。并随着病情进展开始逐步降低。由于CD4T细胞的降低及CD8T细胞的升高,造成CD4/CD8的降低。CD4/CD8在初治菌阳组明显低于正常对照组,并且初治组CD4/CD8水平低于复治组,初治组和复治组CD4/CD8均低于正常对照组,表明结核病人的CD4T细胞降低,CD8T细胞升高,其细胞免疫功能发生了改变。因此,在结核病的细胞免疫过程中,起主要作用的是CD4T细胞,同时CD4T细胞的恢复与否,对于结核病人的预后有重要的影响。而CD8T细胞在肺结核的细胞免疫功能中也发挥重要作用。我们的研究中NK细胞在各组之间无显著性差异,但肺结核病人的NK细胞水平高于正常对照组,到目前为止,关于NK细胞在结核病人中的表现情况报道并不一致。与于春宝等6研究结果有所差异,但是与文献7,8报道的一致,因此今后有必要继续探讨NK细胞在肺结核病人中的变化。B细胞在各组之间无显著性差异,肺结核病人水平略低于正常对照组,其变化的确切机理尚待进一步深入研究。IGG是血清和细胞外液中含量最高IG,肺结核病人IGG水平明显高于正常对照组,但在各组之间无显著性差异,此次研究中也未发现肺结核病人IGA、IGM水平在各组之间无显著性差异。IGG水平的增高提示了结核病患者的体液免疫水平是升高的,在肺结核的免疫过程中发挥着作用。因此,结核病人的免疫功能指标在结核病的诊断、治疗和预后判断中有重要的临床意义。在治疗过程中,监测结核病人的免疫功能指标,可以为结核病的疗效提供帮助,为预后判断提供依据。参考文献1WHO1GLOBALTUBERCULOSISCONTROLSURVEILLANCE,PLANNING,FINAN2CING1WHOREPORT2004R1GENERA,SWITZERLAND,200412程小星1结核病免疫治疗研究进展J1结核病健康教育,2009,1811922013谢惠安等,现代结核病学M,北京人民卫生出版社,2000115214刘晓灵1儿童隐性结核感染和结核纯蛋白衍生物的判断J1中华医学杂志,2004,842017402174115GROTZKEJE,LEWINSOHNDM1ROLEOFCD8TLYMPHOCYTESINCON2TROLOFMYCOBACTERIUMTUBERCULOSISINFECTIONJ1MICROBESINFECT,2005,74776278816于春宝,左云,王俊玲,等1肺结核病人细胞免疫功能的研究J1临床肺科杂志,20082138213917秦菁,姚一中,杨德燕1肺结核患者自然杀伤细胞活性和T细胞亚群的测定J1中华结核和呼吸杂志,1990,134209221018郭月芳,陈蕾,闻平1结核病患者免疫学指标检测的临床意义J1中国误诊学杂志,2005,51152161收稿日期2010204215本文编辑褚遵华欢迎订阅欢迎投稿105预防医学论坛2010年6月第16卷第6期PREVMEDTRIB,VOL16,NO6,JUN2010
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