谷氨酸受体阻滞剂对缺氧缺血性脑病神经细胞凋亡的影响

分类号：R72212密级：单位代码：10422学 号：201013253菇办孚硕士学位论文论文题目： 谷氨酸受体阻滞剂对缺氧缺血性脑病神经细胞凋亡的影响The Influence of Glutamate Receptor Blocker on theApoptosis Of Hypoxic Ischemic Encephalopathy Nerve Cells合作 导 师2013年4月15日原创性声明IUl IIII III IIII Ir Illllll l UIY2328449本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：斗日期：蝉关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：l 导师签名：基尘正日 期：垃啦埤目 录中文摘要1英文摘要3符号说明5材料与方法10结果14讨论18结论24参考文献25综述28综述参考文献38致 43在读期间专业论文发表情况： 44在读期间参与的科研情况： 44CATALOGUEChinese Abstract1English Abstract3Symbolic Description5Instruction7Materials and Methods10Results14Discussion1 8Conclusion24References25Review28References ofReview38Acknowledgment43These Catalog44山东大学硕士学位论文谷氨酸受体阻滞剂对缺氧缺血性脑病神经细胞凋亡的影响作者： 阎娜专业： 儿科导师：安丽教授中文摘要背景：新生儿缺氧缺血性脑病(Hypoxicischaemic encephalopathy，HIE)是围产期常见的疾病，也是导致新生儿死亡或致残的主要原因。缺氧和缺血状态导致神经组织氧糖剥夺，形成严重的神经细胞损伤。最新研究发现，谷氨酸及其Q 一 氨 基 一3一 羟 基 一5一 甲 基 异 恶 唑 4一 丙 酸(alphaamino一3一hydrox5一methyl一4一isoxaz01epropionic acid，AMPA)受体在HIE发生发展过程中起着非常重要的作用。AMPA受体的表达高峰在2332周胎儿脑白质发育中的少突胶质细胞(OL)，当缺血性脑损伤发生在早产儿时，谷氨酸过度释放，使其脑内浓度急剧升高，进而AMPA受体过度激活导致神经元兴奋过度而死亡，产生兴奋毒性，造成广泛的脑组织病理性损害。本研究采用在体动物实验和体外细胞培养两种实验方法，研究谷氨酸受体阻滞剂GYKl25466对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时神经细胞的干预作用，旨在探讨GYKl25466对HIE所致的中枢神经系统损伤的保护作用，为进一步探讨缺氧缺血性脑病的发病机制与有效的防治措施提供实验依据。目的：探讨谷氨酸受体阻滞剂GYKl52466对缺氧缺血性脑病(hypoxicischemic encephalopathy，HIE)新生大鼠脑细胞凋亡的抑制作用。方法：体内实验：将新生大鼠随机分为空白对照组(N)、缺氧缺血性脑损伤组(H、)与GYKl52466干预组(G)。造模后给药，观察各组大鼠的神经行为学异常及超山东大学硕士学位论文微结构变化。体外实验： 将各组新生大鼠的脑细胞制成单细胞悬液，培养4日后，N组给予正常环境培养，H组给予缺氧缺糖环境，G组给予缺氧缺糖环境后添加GYKl52466培养，6小时后比较各组细胞生长状态，采用流式细胞仪进行脑细胞凋亡分析。结果：体内实验：神经行为学观察，G组与H组相比，异常神经行为学有所改善；电镜下观察，H组神经元细胞核结构破坏，核膜破裂、核仁轻度皱缩，而G组结构趋向完整。体外实验：与模型组相比，GYKl52466治疗组的细胞凋亡数明显减少，数值有极其显著性差异(P0001)。结论：谷氨酸受体阻滞剂GYKl25466可有效的减轻新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时异常的神经行为学表现和病理学改变，抑制缺血缺氧后神经细胞细胞凋亡的功能，证实GYKl25466具有一定的神经保护作用。关键词：缺氧缺血性脑病；谷氨酸； AMPA； GYKl52466山东大学硕士学位论文THE INFLUENCE oF GLUTAMATE RECEPTERBLoCKER ON THE APoPTOSIS 0F HYP0CISCHEMIC ENCEPHALOPATHY NERVE CELLSPostgraduate： Yan NaMajor：PaediatricsTutor：An LiABSTRACTBackground Hypoxic-ischemic encephalopathy(HIE)is the common disease inthe perinatal period and also the main cause for the newbornS death or disabilityTheischemic and hypoxic state results in the oxygenglucose deprivation in the nervetissue and the serious nerve cell damageAccording to the latest research，glutamateand its alpha-amino一3-hydrox-5一methyl一4一isoxazolepropionic acid(AMPA)receptorplay a significant role in the occurrence and progress of HIEThe AMPA receptorexpression peak forms in the 23-32 week fetal white brain developmentaloligodendrocyte(OL)When the ischemic cerebral damage Occurs in the prematureinfant，glutamate is over released，then the glutamate concentration in the brain risessharplyIn tum，the excessive activation of the AMPA receptor leads to the neuronSdeath for the overexcitationAs a result，excitotoxicity is produced to cause widelybrain pathologic damageThe research involves two menthods-in vivo animalexperiment and in vitro cell cultivation to study the intervention of glutamate receptorblocker GYKl25466 on the newborn ratS nerve cell in the hypoxic-ischemic braindamage and aims at discussing the protective effect of the GYKl25466 on thecentral lesion caused by HIE and providing experimental basis for the further researchon the pathogenesis and effective prevention of HIEObjective To discuss glutami c3山东大学硕士学位论文acid receptor blocker hypoxicischemic encephalopathy(hypoxicischemicencephalopathy,HIE)newborn rats cell apoptosis of inhibitionMethods In vivo：the newbom rat randomly divided into blank control group(N)，hypoxicischemicbrain damage group(H)and GYKl52466 intervention group(G)Made the drug，observe the rat neural behavior abnormalities and ultrastructural changesIn vitro：thenewborn ratS brain cells suspension liquid made unicellular,cultivate after 4 days，Nwere given cultivating environment normal，H group of oxygen to give short of sugarenvironment，to lack of oxygen of group G sugar added after GYKl52466 cultivatingenvironment，after 6 hours each cell growth state compared，the flow cytometricanalysis on brain cell apoptosisResults In vivo：nerve behavior observation，group G and group H abnormal neural behavior than improved，by electronmicroscopy observation，group H of neurons nuclei structural damage，and nuclearmembrane rupture，nucleoli mild shrinks，and group G structure tents to completeInvitro：compared with model group，GYKl52466 the treatment group were far fewercell apoptosis，numerical have extremely significant difference(P0001)Conclusion：Glutamate receptor blocker GYKl25466 Can effectively reducethe newborn rat hypoxicischemic brain damage abnormal neural behaviorperformance and pathology change，restrain blood anoxic nerve cells after the cellapoptosis，confirmed that GYKl25466 has certain nerve protection4Key words：HIE；glutamate；AMPA；GYKl52466山东大学硕士学位论文英文缩写 英文全称AMPAAMPARAPCNSBIBCIAAEAAGluGlyGluRHIBDHIEEAAT符号说明中文译名仅一ami no一3一hydroxy一5一methyl一4 0c一氨基羟甲基恶唑丙酸isoxazolpropionatem-amino一3一hydroxy一5一methyl一4 0c一氨基羟甲基恶唑丙酸isoxazolpropionate receptorapoptosiscentral nervous systembrain injurybrain circuitryinhibitory amino acidexcitative amino acidglutamateglycineglutamate receptorhypox i ci schemi c brai n damage受体细胞凋亡中枢神经系统脑损伤大脑神经元回路抑制性氨基酸兴奋性氨基酸谷氨酸甘氨酸谷氨酸受体缺氧缺血性脑损伤hypoxicischemic encephalopathy 缺氧缺血性脑病EAA transporter 兴奋性氨基酸转运体iGluRs intropic