尿液葡萄糖酮体及其他化学检查

,尿液葡萄糖酮体及其他化学检查,黄 ,教学目标,了解机体酮体代谢的过程；,理解尿液酮体、HCG检查的检测原理；,掌握尿液葡萄糖检查的检测原理、方法学评价、质量保证及临床意义；尿液酮体、HCG检查的临床意义。,一、尿液葡萄糖检查,生理情况下，原尿中的葡萄糖可被肾小管和集合管全部被重吸收进入血液。所以正常人尿液中几乎不含或仅含微量葡萄糖，一般尿糖定性试验为阴性。当机体发生病变，尿液中出现葡萄糖，葡萄糖定性试验为阳性的尿液称为糖尿（glucosuria）。,糖尿定义,一、尿液葡萄糖检查,糖尿形成的原因,血糖浓度,肾血流量,肾糖阈,一、尿液葡萄糖检查,尿液葡萄糖检查方法,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法,班氏还原法,薄层层析法,邻甲苯胺法,葡萄糖+H2O+O2 葡萄糖氧化酶 葡萄糖酸内酯+H2O2 H2O2 +色原剂 过氧化物酶 有色物质,葡萄糖氧化酶过氧化物酶法,一、尿液葡萄糖检查,葡萄糖氧化酶过氧化物酶法,一、尿液葡萄糖检查,检测特异性强、灵敏度高、简便快速,氧化还原反应，易受尿液中的氧化剂还原剂的影响,班氏还原法,一、尿液葡萄糖检查,在高热和强碱溶液中，葡萄糖或者其他还原性糖，能将溶液中蓝色的硫酸铜还原为氢氧化亚铜沉淀，进而形成红色的氧化亚铜沉淀。,班氏还原法,一、尿液葡萄糖检查,许多单糖和非糖还原物质都能反应，测定的是尿中总还原物。,氧化还原反应，易受尿液中的氧化剂还原剂的影响。,化学物质对尿糖测定的影响,化学物质对尿糖测定的影响,一、尿液葡萄糖检查,检测结果分析,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法阴性，班氏还原法阳性。,试纸质量问题； 尿液中含有较高浓度的还原性物质； 存在少量葡萄糖伴有高浓度的还原物质。,一、尿液葡萄糖检查,检测结果分析,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法阳性，班氏还原法阴性。,尿液标本被过氧化物或者次氯酸盐污染。,一、尿液葡萄糖检查,邻甲苯胺法,葡萄糖与邻甲苯胺在强酸溶液中加热，葡萄糖的醛基与邻甲苯胺缩合形成葡萄糖基胺，后者脱水生成席夫碱，再经结构重排，生成有色化合物，在630nm有吸收峰。,与尿液中的所有糖类发生反应 。,一、尿液葡萄糖检查,薄层层析法,在层析法中有固定相和流动相，两相间可做相对流动。当样品中各种糖随流动相通过固定相时，即反复发生吸附、脱附、解析或其他亲和作用，由于各种糖在上述性能上的差异而产生移动速度的差异，而相互分离。,六种糖的Rf近似平均值,一、尿液葡萄糖检查,其他糖检验方法,果糖与溶于强酸的间苯二酚加热后显红色反应。,半乳糖与硝酸共热，可被氧化为白色的粘酸结晶。,戊糖与盐酸共沸后生成糠醛，再与二羟基甲苯作用形成绿色化合物。,一、尿液葡萄糖检查,临床意义,血糖增高性糖尿,血糖正常性糖尿,暂时性糖尿,其他糖尿,二、尿液酮体检查,酮体是脂肪酸在肝内氧化不完全而形成的一类中间产物的统称，包含乙酰乙酸、-羟丁酸、丙酮三种成分。,生理意义：肝脏向肝外(肌肉/大脑)组织输出脂肪酸能源的有效形式。,病理意义：在糖尿病或者严重饥饿时，肝生酮大于肝外利用，发生酮症酸中毒。,二、尿液酮体检查,检测方法,亚硝基铁氰化钠法：乙酰乙酸和丙酮与亚硝基铁氰化钠反应生成紫色化合物。,Gerhardt法：高铁离子与乙酰乙酸的烯醇式基团发生螯合，形成酒红色的乙酰乙酸铁复合物。,检测方法,二、尿液酮体检查,二、尿液酮体检查,临床意义,不能有效利用碳水化合物,碳水化合物摄入不足,碳水化合物丢失,其他,三、尿液人绒毛膜促性腺激素检查,人绒毛膜促性腺激素（Human chorionic gonadotrophin, hCG）是胎盘合体滋养层细胞产生的一种具有促进性腺发育的糖蛋白类激素。,hCG分子量约为4.7万，由、两个肽链组成。单个亚基（肽链）不具有生物学活性，当其连接成完整的化合物时才具有活性。,三、尿液人绒毛膜促性腺激素检查,hCG 亚基的氨基酸数量及其排列顺序与卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和促甲状腺激素(TSH)的亚基几乎相同。,临床上均采用高效的抗hCG亚基单克隆抗体进行特异性hCG检查。,受孕后血清HCG变化曲线,生理作用,三、尿液人绒毛膜促性腺激素检查,有利于受精卵的生长；,促进卵泡成熟、促甲状腺及睾丸间质细胞的活性；,与黄体生成激素相似的生物活性；,抑制淋巴细胞免疫性，保护滋养层不受母体的免疫攻击。,检测方法,三、尿液人绒毛膜促性腺激素检查,ELISA,胶体金实验,电化学发光实验,放射免疫分析,胶乳凝集抑制实验,血凝抑制实验,检孕卡实验,尿液hCG各种检测方法比较,临床意义,三、尿液人绒毛膜促性腺激素检查,早期妊娠诊断,异位妊娠诊断,流产诊断和监测,妊娠滋养细胞疾病诊断,肿瘤标记物,四、尿液胆色素检查,尿中胆色素包括胆红素（bilirubin）、尿胆原(urobilinogen)及尿胆素(urobilin)，俗称尿三胆。由于送检的多为新鲜尿，尿胆原尚未氧化成尿胆素，故多查前两者，俗称尿二胆。,四、尿液胆色素检查,胆红素是红细胞破坏后的代谢产生。可分为未经肝处理的未结合的胆红素和经肝与葡萄糖醛酸结合形成的结合胆红素。未结合胆红素不溶于水，在血中与蛋白质结合不能通过肾小球滤膜。结合胆红素分子量小，溶解度高，可通过肾小球滤膜，由尿中排出。,胆红素检验方法,重氮法：在强酸介质中，结合胆红素与重氮盐发生偶联反应呈红色。,Harrison法：胆红素被硫酸钡吸附而浓缩，与氯化铁反应，被氧化为胆青素、胆绿素和胆黄素复合物。,Smith碘环法：胆红素被碘氧化成胆绿素，在尿液与试剂接触界面呈绿色环。,四、尿液胆色素检查,尿胆原检验方法,四、尿液胆色素检查,Ehrlich法：尿胆原与-甲氨基苯重氮化硼酸盐发生偶联反应。,改良Ehrlich法：在酸性溶液中，尿胆原与对二甲氨基苯甲醛反应成樱红色。,Schleisinger法：在无胆红素尿液中，加入碘液，氧化尿胆原成尿胆素，与锌离子作用，形成带绿色荧光复合物。,五、尿液亚硝酸盐的检测,尿路感染时，一些感染病原菌可将尿液中的硝酸盐还原为亚硝酸盐。,体液中有许多细胞能利用精氨酸在NO合成酶的作用下生成NO，在体内有氧的条件下，极易被氧化成为硝酸盐和亚硝酸盐，经过血液从尿中排出。,五、尿液亚硝酸盐的检测,检测原理：亚硝酸盐还原法；,临床意义：作为尿路感染的快速筛检；,尿液NIT阳性的三个条件：尿中致病菌是否存在亚硝酸盐还原酶、尿在膀胱内是否停留足够细菌作用的时间、尿液中是否有硝酸盐的存在。,六、白细胞检查,检测原理：酯酶法，粒细胞胞质含有特异性酯酶，使试带吲哚酚酯产生吲哚酚，后者与重氮盐形成紫红色缩合物。,主要用于肾脏、泌尿道感染性疾病的诊断、治疗监测。,注意与显微镜直接白细胞检测法结果的比较分析。,No.* PH 6.5 NIT - GLU - 0mmol/L PRO - 0 g/L BLD - 0 mg/L SG 1.025 BIL -