高通量离体活性测定方法在杀虫活性研究方面的应用细胞毒理学在杀虫课件

第九章

杀虫剂毒理学研究新方法第九章

杀虫剂毒理学研究新方法高通量离体活性测定方法在杀虫活性研究方面的应用细胞毒理学在杀虫剂作用机理方面的应用电生理测定方法在杀虫剂作用机理方面的应用QSAR分析方法分子生物学研究方法在杀虫剂作用机理方面的应用高通量离体活性测定方法在杀虫活性研究方面的应用高通量筛选（highthroughputscreening，HTS）就是以玻璃片、膜片或培养板为载体，用高密度、微量自动化加样的方法，实现短时间内分析大量样本的筛选方法。采用传统方法，一年内仅能筛选75000个样品。采用高通量筛选，每天的筛选量可高达100000种化合物。高通量离体活性测定方法高通量筛选（highthroughputscreenin高通量筛选的组成自动化操作系统高灵敏度的检测系统分子、细胞水平的高特异性体外筛选模型被筛样品管理库数据采集传输处理系统高通量筛选的组成自动化操作系统高通量筛选的应用对样品成分进行大规模的生物活性筛选，是高通量筛选的最主要的应用。高通量筛选流程图赵元弟，杜磊，陈同生，曾绍群，骆清铭.高通量药物筛选技术的研究现状及光编码技术在其中的应用.激光生物学报，2003（03）.高通量筛选的应用对样品成分进行大规模的生物活性筛选，是高通量高通量筛选的应用从分子水平、细胞水平认识药物的作用和作用机理。高通量筛选的应用从分子水平、细胞水平认识药物的作用和作用机理MTT法与细胞毒性流式细胞术细胞毒理学方法MTT法与细胞毒性细胞毒理学方法MTT法原理MTT法（MTT比色法），是一种检测细胞存活和生长的方法。其原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。MTT法原理MTT法（MTT比色法），是一种检测细胞存活和生MTT法操作流程实例MTT法操作流程实例流式细胞术流式细胞术（FlowCytometry,FCM）是一种在液流系统中，快速测定单个细胞或细胞器的生物学性质，并把特定的细胞或细胞器从群体中加以分类收集的技术。流式细胞术流式细胞术（FlowCytometry,FCM流式细胞术的原理流式细胞术的原理流式细胞术的应用其特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射和光吸收来定量测定细胞DNA含量、细胞体积、蛋白质含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原等许多重要参数。根据这些参数将不同性质的细胞分开，以获得供生物学和医学研究用的纯细胞群体。目前最高分选速度已达到每秒钟3万个细胞。流式细胞术检测细胞凋亡图流式细胞术的应用其特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射1791年，Galvanin发现动物的肌肉电位1849年，Dubois等改进刺激技术和记录技术，发现生物电的两种基本形式——静息电位和动作电位，使电生理学逐渐成为一门独立的学科。随着近代电子技术和分子生物学的发展和应用，电生理学成为研究昆虫生理功能的一项专门技术和方法。电生理测定方法1791年，Galvanin发现动物的肌肉电位电生理测定电生理学在昆虫毒理学上的应用研究杀虫剂的毒理机制研究杀虫剂的抗药性和选择性目前的研究主要是感觉神经器官和神经系统的电活动。电生理学在昆虫毒理学上的应用研究杀虫剂的毒理机制触角电位仪原理图触角电位仪原理图触角电位图张龙.飞蝗嗅觉的细胞与分子机制研究进展.生命科学，2010（12）.触角电位图张龙.飞蝗嗅觉的细胞与分子机制研究进展.生命科学，膜片钳技术膜片钳技术(patch-clamptechnique)是在电压钳基础上发展起来的一种新技术,可在很小膜面积上进行电压钳制,即可将细胞膜上一个通道的电位固定在一定水平,观察流过通道的离子电流。膜片钳技术膜片钳技术(patch-clamptechniq膜片钳技术原理图膜片钳技术原理图（Quantitativestructure-activityrelationships，QSAR）——定量结构活性相关性QSAR的原理是基于设想农药分子进入生物体内，通过一系列的生物膜，经过多种细胞及细胞器的贮存、释放，最终到达作用部位，与靶标作用，从而产生活性反应。QSAR分析方法（Quantitativestructure-activiQASR是对已知先导化合物的一系列衍生物进行定量的生物活性测定，分析衍生物的主要物理化学参数和生物活性之间的关系，建立结构——活性数学模型，并以这种数学模型来指导药物分子设计，克服盲目大量合成筛选的弊端。天然除虫菊酯结构式QASR是对已知先导化合物的一系列衍生物进行定量的生物活性测它以电子计算机为处理工具，来分析化合物结构与活性之间的关系，从而确定一个化合物分子式中哪一部位为其活性部位，然后在农药活性测定及电脑分析的指导下，设计出结构新颖的具有高的生物活性的化合物。拟除虫菊酯类结构式它以电子计算机为处理工具，来分析化合物结构与活性之间的关系，分子生物学研究方法DNA基本操作技术RNA基本操作技术基因克隆技术蛋白质组和蛋白质组学技术基因表达研究技术基因敲除技术蛋白质及RNA相互作用技术利用酵母鉴定靶基因功能基因芯片及数据分析分子生物学研究方法DNA基本操作技术DNA重组操作示意图DNA重组操作示意图聚合酶链式反应技术（PCR）聚合酶链式反应技术（PCR）聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳第九章

杀虫剂毒理学研究新方法第九章

杀虫剂毒理学研究新方法高通量离体活性测定方法在杀虫活性研究方面的应用细胞毒理学在杀虫剂作用机理方面的应用电生理测定方法在杀虫剂作用机理方面的应用QSAR分析方法分子生物学研究方法在杀虫剂作用机理方面的应用高通量离体活性测定方法在杀虫活性研究方面的应用高通量筛选（highthroughputscreening，HTS）就是以玻璃片、膜片或培养板为载体，用高密度、微量自动化加样的方法，实现短时间内分析大量样本的筛选方法。采用传统方法，一年内仅能筛选75000个样品。采用高通量筛选，每天的筛选量可高达100000种化合物。高通量离体活性测定方法高通量筛选（highthroughputscreenin高通量筛选的组成自动化操作系统高灵敏度的检测系统分子、细胞水平的高特异性体外筛选模型被筛样品管理库数据采集传输处理系统高通量筛选的组成自动化操作系统高通量筛选的应用对样品成分进行大规模的生物活性筛选，是高通量筛选的最主要的应用。高通量筛选流程图赵元弟，杜磊，陈同生，曾绍群，骆清铭.高通量药物筛选技术的研究现状及光编码技术在其中的应用.激光生物学报，2003（03）.高通量筛选的应用对样品成分进行大规模的生物活性筛选，是高通量高通量筛选的应用从分子水平、细胞水平认识药物的作用和作用机理。高通量筛选的应用从分子水平、细胞水平认识药物的作用和作用机理MTT法与细胞毒性流式细胞术细胞毒理学方法MTT法与细胞毒性细胞毒理学方法MTT法原理MTT法（MTT比色法），是一种检测细胞存活和生长的方法。其原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。MTT法原理MTT法（MTT比色法），是一种检测细胞存活和生MTT法操作流程实例MTT法操作流程实例流式细胞术流式细胞术（FlowCytometry,FCM）是一种在液流系统中，快速测定单个细胞或细胞器的生物学性质，并把特定的细胞或细胞器从群体中加以分类收集的技术。流式细胞术流式细胞术（FlowCytometry,FCM流式细胞术的原理流式细胞术的原理流式细胞术的应用其特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射和光吸收来定量测定细胞DNA含量、细胞体积、蛋白质含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原等许多重要参数。根据这些参数将不同性质的细胞分开，以获得供生物学和医学研究用的纯细胞群体。目前最高分选速度已达到每秒钟3万个细胞。流式细胞术检测细胞凋亡图流式细胞术的应用其特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射1791年，Galvanin发现动物的肌肉电位1849年，Dubois等改进刺激技术和记录技术，发现生物电的两种基本形式——静息电位和动作电位，使电生理学逐渐成为一门独立的学科。随着近代电子技术和分子生物学的发展和应用，电生理学成为研究昆虫生理功能的一项专门技术和方法。电生理测定方法1791年，Galvanin发现动物的肌肉电位电生理测定电生理学在昆虫毒理学上的应用研究杀虫剂的毒理机制研究杀虫剂的抗药性和选择性目前的研究主要是感觉神经器官和神经系统的电活动。电生理学在昆虫毒理学上的应用研究杀虫剂的毒理机制触角电位仪原理图触角电位仪原理图触角电位图张龙.飞蝗嗅觉的细胞与分子机制研究进展.生命科学，2010（12）.触角电位图张龙.飞蝗嗅觉的细胞与分子机制研究进展.生命科学，膜片钳技术膜片钳技术(patch-clamptechnique)是在电压钳基础上发展起来的一种新技术,可在很小膜面积上进行电压钳制,即可将细胞膜上一个通道的电位固定在一定水平,观察流过通道的离子电流。膜片钳技术膜片钳技术(patch-clamptechniq膜片钳技术原理图膜片钳技术原理图（Quantitativestructure-activityrelationships，QSAR）——定量结构活性相关性QSAR的原理是基于设想农药分子进入生物体内，通过一系列的生物膜，经过多种细胞及细胞器的贮存、释放，最终到达作用部位，与靶标作用，从而产生活性反应。QSAR分析方法（Quantitativestructure-activiQASR是对已知先导化合物的一系列衍生物进行定量的生物活性测定，分析衍生物的主要物理化学参数和生物活性之间的关系，建立结构——活性数学模型，并以这种数学模型来指导药物分子设计，克服盲目大量合成筛选的弊端。天然除虫菊酯结构式QASR是对已知先导化合物的一系列衍生物进行定量的生物活性测它以电子计算机为处理工具，来分析化合物结构与活性之间的关系，从而确定一个化合物分子式中哪一部位为其活性部位，然后在农药活性测定及电脑分析的指导下，设计出结构新颖的具有高的