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细胞工程植物细胞工程1.细胞的全能性(1)定义:细胞经分裂和后,仍然具有产生或分化成其他的潜能。(2)在生物的生长发育过程中,并不是所有的细胞都表现出全能性,这是因为在特定的时间和条件下,细胞中的基因会地表达。2.植物组织培养技术理论基础:。3.植物组织培养技术前提:的植物器官、组织或细胞等。4.植物组织培养技术结果:脱分化形成,再诱导其再分化成胚状体,长出和,进而发育成完整的植株。5.生长素/细胞分裂素的比值高时:6.植物体细胞杂交:将不同来源的植物体细胞,在一定条件下融合成,并把培育成新的技术。7.去壁:用去除植物细胞壁,获得原生质体。8.人工诱导原生质体融合的方法①物理法:等。②化学法:融合法、融合法等。9.植物体细胞杂交的原理原生质体融合的过程利用了细胞膜的性,杂种细胞发育成杂种植株利用了植物细胞的。10.意义:打破、实现育种,培育植物新品种。第2课时植物细胞工程的应用1.快速繁殖概念:用于快速繁殖优良品种的技术,也叫作繁殖技术。2.作物脱毒选材部位:植物顶端附近的部位(如)。3.单倍体育种原理:细胞的和。第2节动物细胞工程第1课时动物细胞培养1.动物细胞工程常用的技术:动物细胞培养、和动物细胞核移植等,其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。2.动物细胞培养:从动物体中取出相关的组织,将它分散成,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。3.动物细胞培养培养条件①营养条件eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(无机物:无机盐,有机物:糖类、氨基酸、等,天然成分:等))将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基,称为。培养动物细胞一般使用培养基,也称为。②无菌、无毒的环境:需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。培养液还需要定期更换,以便清除,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。③温度、pH和渗透eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(温度:哺乳动物细胞多以为宜,pH:多数动物细胞适宜pH为,渗透压))④气体环境eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(O2:细胞代谢所必需的,CO2:))在进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,并将它们置于含有和5%CO2的混合气体的中进行培养。4.悬液中分散的细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上,这一现象叫。5.当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞的现象,叫作。6.干细胞的来源:、骨髓和等多种组织和器官中。7.成体干细胞特点:具有组织性,只能分化成特定的细胞或组织,发育成完整个体的能力。8.诱导多能干细胞:通过体外诱导等细胞,获得类似胚胎干细胞的一种细胞,被称为诱导多能干细胞(简称细胞)。第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体9.动物细胞融合技术原理:。10.诱导融合的方法eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(PEG融合法,法,法))11.制备过程制备特异性B淋巴细胞eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①用特定抗原对小鼠进行免疫,②从小鼠的脾中得到能产生,特定抗体的))⇓获得杂交瘤eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①将骨髓瘤细胞与多种B淋巴细胞,诱导融合,②用特定的选择培养基筛选出,细胞,该杂种细胞既能,,又能))⇓培养和检测⇓将杂交瘤细胞在培养或注射到小鼠内增殖⇓提取单克隆抗体:从细胞或小鼠中提取12.单克隆抗体优点:第3课时动物体细胞核移植技术和克隆动物13.体细胞核移植概念将动物一个细胞的移入去核的中,使这个重新组合的细胞发育成,继而发育为动物个体的技术。14.动物细胞核移植的原理:第3节胚胎工程第1课时胚胎工程的理论基础15.胚胎工程的概念(1)操作对象:动物、受精卵或细胞。(2)技术基础:如、胚胎移植、等。16.受精场所:哺乳动物的内。17.精子获能在内完成18.受精的标志是19.受精完成的标志为20.透明带的反应发生在21.卵细胞膜的反应是22.早期胚胎发育各阶段的特点(1)卵裂:细胞分裂方式为,细胞的数量不断增加,胚胎的总体积,在内进行。(2)桑葚胚:每个细胞都是。(3)囊胚:细胞逐渐,将来发育成胎儿的各种组织,滋养层细胞将来发育成,随着胚胎的进一步发育,出现囊胚腔。(4):囊胚进一步扩大,会导致破裂,胚胎从其中伸展出来。(5)原肠胚:原肠胚表面的细胞层为,向内迁移的细胞形成,一部分细胞在内、外两个胚层之间形成,这三个胚层将逐渐分化形成各种组织、器官等。第2课时胚胎工程技术及其应用23.胚胎工程技术:胚胎工程技术目前在医学和生产上应用较多的是体外受精、和等。24.胚胎移植①移植对象:通过体外受精及其他方式得到的胚胎。②移植条件:、相同的雌性动物体内。25.胚胎移植时两次使用激素:第一次用激素对进行,第二次用激素对供体进行处理。26.胚胎移植过程中进行两次检查的时间和目的分别是第一次检查在后检查的发育状况;第二次检查在后,对受体母牛进行是否检查。27.请就移植胚胎的可能来源思考其生殖方式。胚胎的来源生殖方式核移植体外受精体内受精28.胚胎分割实质:动物的繁殖或克隆。29.主要仪器设备:和30.操作程序(1)选择发育良好、形态正常的或,移入盛有的培养皿中。(2)在显微镜下用或分割刀分割,在分割囊胚阶段的胚胎时,注意将均等分割。(3)还可用分割针分割,做DNA分析,鉴定性别。(4)分割后的胚胎可以直接移植给受体,或经后,再移植给受体。3细胞工程第1节植物细胞工程1.细胞的全能性(1)定义:细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。(2)在生物的生长发育过程中,并不是所有的细胞都表现出全能性,这是因为在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性地表达。2.植物组织培养技术理论基础:植物细胞的全能性。3.植物组织培养技术前提:离体的植物器官、组织或细胞等。4.植物组织培养技术结果:脱分化形成愈伤组织,再诱导其再分化成胚状体,长出芽和根,进而发育成完整的植株。5.生长素/细胞分裂素的比值高时:促进根的分化、(抑制芽的形成)6.植物体细胞杂交:将不同来源的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新植物体的技术。7.去壁:用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁,获得原生质体。8.人工诱导原生质体融合的方法①物理法:电融合法、离心法等。②化学法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等。9.植物体细胞杂交的原理原生质体融合的过程利用了细胞膜的流动性,杂种细胞发育成杂种植株利用了植物细胞的全能性。10.意义:打破生殖隔离、实现远缘杂交育种,培育植物新品种。第2课时植物细胞工程的应用1.快速繁殖概念:用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术,也叫作微型繁殖技术。2.作物脱毒选材部位:植物顶端分生区附近的部位(如茎尖)。3.单倍体育种原理:细胞的全能性和染色体变异。第2节动物细胞工程第1课时动物细胞培养1.动物细胞工程常用的技术:动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等,其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。2.动物细胞培养:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。3.动物细胞培养培养条件①营养条件eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(无机物:无机盐,有机物:糖类、氨基酸、维生素等,天然成分:血清等))将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基,称为合成培养基。培养动物细胞一般使用液体培养基,也称为培养液。②无菌、无毒的环境:需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。培养液还需要定期更换,以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。③温度、pH和渗透压eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(温度:哺乳动物细胞多以36.5±0.5℃为宜,pH:多数动物细胞适宜pH为7.2~7.4,渗透压))④气体环境eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(O2:细胞代谢所必需的,CO2:维持培养液的pH))在进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。4.悬液中分散的细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上,这一现象叫细胞贴壁。5.当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞停止分裂增殖的现象,叫作接触抑制。6.干细胞的来源:早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中。7.成体干细胞特点:具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力。8.诱导多能干细胞:通过体外诱导成纤维等细胞,获得类似胚胎干细胞的一种细胞,被称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)。第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体9.动物细胞融合技术原理:细胞膜的流动性。10.诱导融合的方法eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(PEG融合法,电融合法,灭活病毒诱导法))11.制备过程制备特异性B淋巴细胞eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①用特定抗原对小鼠进行免疫,②从小鼠的脾中得到能产生,特定抗体的B淋巴细胞))⇓获得杂交瘤细胞eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①将骨髓瘤细胞与多种B淋巴细胞,诱导融合,②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤,细胞,该杂种细胞既能迅速大量增殖,,又能产生抗体))⇓克隆化培养和抗体检测⇓将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖⇓提取单克隆抗体:从细胞培养液或小鼠腹水中提取12.单克隆抗体优点:能准确地识别抗原的,与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备。第3课时动物体细胞核移植技术和克隆动物13.体细胞核移植概念将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育为动物个体的技术。14.动物细胞核移植的原理:动物细胞核具有全能性第3节胚胎工程第1课时胚胎工程的理论基础15.胚胎工程的概念(1)操作对象:动物生殖细胞、受精卵或早期胚胎细胞。(2)技术基础:如体外受精、胚胎移植、胚胎分割等。16.受精场所:哺乳动物的输卵管内。17.精子获能在雌性动物生殖道内完成18.受精的标志是在透明带和卵细胞膜之间观察到两个极体19.受精完成的标志为雌、雄原核的融合。20.透明带的反应发生在精子触及卵细胞膜的瞬间。21.卵细胞膜的反应是拒绝其他精子再进入卵内。22.早期胚胎发育各阶段的特点(1)卵裂:细胞分裂方式为有丝分裂,细胞的数量不断增加,胚胎的总体积并不增加,在透明带内进行。(2)桑葚胚:每个细胞都是全能细胞。(3)囊胚:细胞逐渐分化,内细胞团将来发育成胎儿的各种组织,

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