确证化学结构或组分研究资料撰写的基本要求讲课稿北京申报资料市公开课一等奖百校联赛特等奖课件

确证化学结构或组分研究

资料撰写基本要求

---申报资料9第1页申报资料格式和内容

一.新药化学结构式、分子式及分子量二.供确认化学结构用供试品纯度及检验纯度方法三.确证化学结构方法理化常数元素分析紫外吸收光谱红外吸收光谱核磁共振氢谱核磁共振碳谱质谱差热分析X-射线衍射谱其它四.综合解析五.参考文件

第2页(一)结构确证研究普通标准

和要求

1.结构确证研究主要对象2.结构确证研究基本方法3.结构确证研究主要内容4.结构确证研究普通要求第3页1.结构确证研究主要对象

经化学全合成或半合成、微生物发酵以及从动、植物中提取原料药,包含新药、进口药和已经有国家标准药品.第4页按起源：

化学合成、半合成、天然产物中提取、发酵等;按组分：

单一组分、多组分混合物;按分子量：

小分子化合物、大分子化合物;按结构特点：

成盐化合物和非成盐化合物、手性化合物和非手性化合物、含结晶水/溶剂和不含结晶水/溶剂等;第5页2.结构确证研究基本方法

①化学方法：理化分析、元素分析、化学关联等②物理方法：波谱方法、衍射技术

a.射频波、微波与物质相互作用：核磁共振、电子顺磁共振等b.红外、可见、紫外光与物质相互作用：红外光谱、紫外光谱、拉曼光谱等c.X－射线与物质相互作用：X－射线衍射等d.电子与物质相互作用：质谱、电镜等e.其它：热分析、原子吸收、原子发射等第6页3.结构确证研究主要内容

①骨架结构：

分子中各原子之间连接次序和方式;②构型：

分子中各原子之间空间相对位置;③结晶水/结晶溶剂：

与水、有机溶剂经过氢键等结合;④晶型：

分子（或原子）在晶体中排列方式;

第7页骨架结构

例：氟吗西尼第8页

骨架结构研究:a.单晶X－射线衍射;b.常规方法，如元素分析（或高分辨质谱）、UV、IR、NMR（包含二维谱）、MS等组合;应依据化合物骨架结构特点及其复杂程度、有没有对照品及参考文件，合理选取测试项目。第9页

构型

几何构型:双键、环状化合物，惯用顺－反（cis－trans）或Z－E表示

例：西尼地平（±）-3-（2-甲氧基乙基）-5-[3-苯基-2（E）-丙烯基]-2,6-二甲基-4-（3-硝基苯基）-1,4-二氢-3,5-吡啶二甲酸酯第10页

例：拉米夫定

(2R-顺式)-4-氨基-1-(2-羟甲基-1，3-氧硫杂环戊-5-基)-1H-嘧啶-2-酮

第11页

几何构型研究：理化性质差异显著

a.理化常数，比如熔点等;

b.氢谱、碳谱;

c.红外光谱、紫外光谱等;第12页

光学异构：因为分子不对称性引发，惯用D-L或R-S表示。

例：那格列奈（－）－N-（反-4-异丙基环基甲酰基）-D-苯丙氨酸第13页例：前列腺素E1（1R，2R，3R）-3-羟基-2-[（E）-（3S）-3-羟基-1-辛烯基]-5-氧代环戊烷庚酸

第14页

光学异构研究：a.

比旋度测定b.手性柱色谱（HPLC、GC）c.

核磁共振（NMR）d.

单晶X—射线衍射（SXRD）e.

旋光光谱（ORD）f.

圆二色谱（CD）第15页g.其它方法对照品法——依据对照品构型推定化学关联法——利用合成工艺分析

比如，左旋西替利嗪构型确证：手性柱色谱定位（与对照品对比)、比旋度数据、光学纯度分析第16页

晶型研究:a.粉末X-射线衍射法b.红外光谱法、拉曼光谱法c.熔点法d.热分析e.光学显微镜法

第17页无对照品和文件报道：

考查不一样结晶条件下（溶剂、温度、结晶速率等）制备样品熔点、红外光谱、粉末X－射线衍射等;

有对照品:

对比自制药品与已上市药品熔点、红外光谱图、粉末X－射线衍射图谱等;有文件报道:

对文件资料进行分析，选取能够准确反应产品晶型测试项目;第18页

结晶水/结晶溶剂研究:

a.元素分析b.热分析c.干燥失重、水分检验d.单晶X-射线衍射第19页创新药：

在干燥失重、水分测定研究基础上，经过热分析、元素分析等确证样品分子中结晶水/结晶溶剂数量;已上市药品：

采取适当分析方法对样品进行分析，以确证其结晶水/结晶溶剂情况与已上市产品一致;第20页4.结构确证研究普通要求第21页

①对测试样品和对照样品要求：

测试样品:a.精制方法b.纯度要求

大于99.0%，杂质含量应小于0.5%；对于手性药品，应增加对对映体、非对映体纯度要求，普通不低于99.5%。

第22页

对照品:a.正当起源证实

购得标准品(已经有国家标准药品)市售原料药市售制剂中提取得到原料药从正规试剂企业购得试剂等

b.精制方法c.纯度检验

第23页②对图谱、数据要求

附图应为原图复印件或照片;图谱及图谱上标识、数据应清楚，并有完整检测日期、各项参数、测试条件、仪器型号及样品编号等统计。各项检测数据应按要求列表说明，注明其次序。有对照品应将测试品和对照品同一波谱数据在一个表中对比列出。如有可作参考文件数据，也可列在同一表中。质谱应附离子裂解图。第24页(二)对不一样类别药品结构确证要求未知结构化合物：推论结构已知结构化合物：验证结构第25页①未在国内外上市销售原料药

按全新化学单体要求：推论结构a.完成必要各项测试;b.应提供充分试验图谱和数据;c.按新化合物要求进行图谱解析和综合解析;如有参考文件资料，可提供作参考。第26页②已在国外上市销售但还未在国内销售原料药或已经有国家标准原料药

按已知化学结构药品：验证结构

能够使用对照品能够参考文件

第27页

a.有合格对照品化合物：

提供测试样品和对照品在完全相同条件和同一仪器上测得各项图谱和数据，完成所需各项目测试，若二者完全相同，并对主要波谱讯号和测试数据进行了正确解析，即可得出二者化学结构一致结论。

第28页b.有详细文件数据化合物：

可对结构确证研究内容、方法提供线索，并为解析提供参考，不过不能作为结构确证研究充分证据，仍需要进行较为详尽图谱解析和综合解析。

第29页c.无对照品和文件数据化合物：

除了目标化合物结构外，缺乏其它支持性资料，所以标准上应按全新化学单体要求进行全方面研究，提供充分试验图谱和数据，可结合其它研究工作（比如合成工艺路线确实定）以深入推论化合物结构。第30页(三)对特殊化学结构药品结构确证要求

第31页1.立体异构体药品

立体异构体：①光学异构体a.对映异构体

b.非对映异构体

②几何异构体（顺、反异构体）第32页手性药品----绝对构型和相对构型

a.单一对映体----绝对构型

比旋度测定手性柱色谱(手性HPLC和GC)核磁共振单晶X-衍射圆二色谱旋光光谱第33页

b.消旋体----有多个手性中心时要求确定相对构型;c.立体异构混合物----确定异构体组成和百分比;第34页“手性药品申报资料及审评关键点”

(药审中心)

①应注意确证产品立体构型。可依据手性中心多少、文件数据是否充分、对照品有没有来选择适当确实证方法，必要时可采取单晶X－射线衍射进行确证。②比旋度是必须检测项目之一，已知起始原料构型和化学合成方法立体选择性也可作为依据之一。第35页2.含有多晶型药品晶型:是指结晶物质晶格内分子排列形式。

多晶型物质晶格内部分子间力差异可能引发药品各种理化性质改变，主要对熔点、溶解度及溶出速率、稳定性、有效性影响。第36页

重点：以适宜方法取得药品晶型数据。惯用方法：

粉末X-衍射法红外吸收光谱法熔点热分析光学显微镜第37页

①创新药品a.不一样结晶条件下（溶剂、温度、结晶速率等）晶型一致性；b.不一样晶型是否影响药品活性和毒性等;第38页②结构已知仿制药品a.力争与被仿制品保持一致；

尤其是被仿制药为晶型选择性药品，且各晶型理化性质及生物药剂学性质有显著差异仿制药品，要重点确定与被仿制品种晶型完全一致性（熔点、红外吸收光谱、粉末X—射线衍射图等)。

b.重点关注难溶性固体口服制剂晶型研究；第39页那格列奈晶型研讨会纪要

（药审中心）

在临床前，那格列奈晶型应到达以下要求：

a.红外光吸收图谱,应能清楚分辨出Ｈ晶型特征吸收峰，即在1714cm-1、1649cm-1、1542cm-1、1214cm-1处有强吸收峰；b.粉末Ｘ-射线衍射图谱中在２θ=4.82°-4.9°处不得出现Ｂ型衍射峰，同时在２θ=19.6°与19.9°两个强衍射峰应能够识别（应分离）．c.熔点控制在137℃-141℃范围内，熔距限定为２℃。第40页在临床期间,对那格列奈晶型进行以下工作:

a.熔点:测定本品H晶型与B晶型分别以不一样百分比混合后熔点,并进行差热分析试验工作;b.溶解度:对H、B晶型及熔点为170°C左右第三种晶型分别进行溶解度测试;c.粉末X-射线衍射谱:对当前原料中在19.6°、19.9°(２θ)衍射情况作深入研究;d.IR:完成使用IR法控制H晶型中夹杂B晶型方法学研究;与粉末X-射线衍射方法进行比较研究,以提供制订生产用质量标准依据。第41页3.合成多肽类药品

氨基酸分析（证实多肽组成是否正确）；质谱测定（提供相对分子质量及序列信息）；序列分析以及肽图测绘等；紫外：对含有生色团结构小肽有一定测试意义；

红外：适合用于小肽（含三个氨基酸肽）、拟肽等；

核磁共振：可对小肽结构提供部分信息；

其它方法：HPLC、比旋度测定等。第42页

药品结构中有半胱氨酸，应明确其状态（氧化态或还原态）；药品结构中存在二硫键，应明确二硫键正确连接点；结合合成工艺对中间体研究，对终产品结构进行确证。第43页4.多糖类药品多糖结构描述包含:①多糖分子量范围；②多糖单糖组分；③单糖连接点类型；④单糖和糖苷键构型；⑤重复单位;第44页确证方法：单糖分离、判定：纸色谱法、TLC、HPLC、气-质联用技术等；多糖相对分子量及分子量分布测定：凝胶色谱法；糖苷键连接方式及糖苷键位置：红外、核磁共振、化学反应后产物分析等；第45页5.多组分药品

明确各组分组成百分比，对影响药效和毒性主要成份进行结构确证。可使用经典提取方法或其它分离技术，如制备色谱（TLC，HPLC），分离得到主要药效成份单体，按单体项目要求进行化学结构确证。

在组分多，含量少，难于得到单体时，可使用联机分析技术，如气一质联用（GC—MS），液—质联用（LC—MS），气—付利叶红外联用（GC—FTIR），质—质联用（MS—MS），辅助组分结构验证及定量分析。第46页6.不含金属元素有机盐类或

复合物

应同时提供成盐前后两套波谱和试验数据。对于一些波谱测定有困难或不易说明其结构盐或复合物，可测定药品酸根或碱基波谱，并结合其它试验项目进行确证。第47页7.金属盐类和络合物

除通常要求各项测试外，还应提供确证分子中金属元素种类、存在形式和含量相关图谱和分析数据。不适于或不能测试金属盐本身项目，能够用成盐前酸分子或配位体对应测试结果进行佐证。第48页8.半合成化合物

分子母核结构为已知并能够确证其原分子母核结构在合成过程中未发生改变，可适当简化对母核部分结构确实证工作。重点对新引入基团进行结构确证，能够结合原料结构和合成路线进行论证和说明。如包括构型确证，若母核手性中心构型没有改变时，重点在于侧链和取代基中新引入手性中心构型确定。第49页(四)各项波谱和测试技术要求第50页1.红外吸收光谱(IR)

①基本原理：分子中化学键振动能级跃迁。②主要应用：a.判定化合物结构——有对照品、标准图谱b.推测化合物结构——确定特征官能团、区分晶型等第51页③技术要求：a.按药典要求方法校正和检定仪器；b.正确选择测试方法和条件

固体样品首选溴化钾压片法；离子交换-----氯化钾压片；晶型改变-----糊法；c.准确、合理、充分图谱解析;d.按要求格式列表和撰写资料;

第52页

④资料撰写格式

仪器测试条件仪器校正和检定数据表

解析吸收峰(cm-1)强度振动类型基团第53页

2.紫外吸收光谱(UV)①基本原理：电子跃迁②主要应用：推测共轭体系骨架结构（发色团、助色团）紫外光谱——定性吸收系数——定量第54页③技术要求

a.按药典要求方法校正和检定仪器；b.通常要求三种溶剂：中性、0.1NHCl、0.1NNaOH；c.要求定量，准确计算摩尔吸收系数；d.归属主要吸收谱带；e.数据列表说明；第55页④资料撰写格式

仪器测试条件仪器校正和检定数据表

解析溶剂λmax

ε值基团和吸收带第56页3.核磁共振氢谱(1H-NMR)

①基本原理：利用原子核核自旋现象，经过一定振动频率电磁波照射时，原子核吸收电磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。②主要应用可提供供试品中氢原子数目、周围化学环境、相互间关系、空间排列等信息。

第57页③技术要求

a.应使用200MHz以上高分辨NMR仪。b.对各项测试条件应有明确、详尽说明，如仪器型号、规格、溶剂、内标。c.对分子中全部H原子均要有明确解析和归属。d.对复杂结构化合物，应考虑采取适当其它技术加以佐证。第58页④资料撰写格式仪器溶剂、内标给出原子编号分子结构式数据表

(如有对照品或文件数据能够对比列入表中)

解析原子序号化学位移质子数多重性J值对应质子第59页4.核磁共振碳谱(13C-NMR)

①基本原理：

利用原子核核自旋现象，经过一定振动频率电磁波照射时，原子核吸收电磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。②主要应用:可提供供试品中碳原子数目、所处不一样化学环境信息。

第60页③技术要求

a.对各项测试条件应有明确、详尽说明，如仪器型号、规格、溶剂、内标。b.在图谱复杂时，应使用质子噪声去偶或偏共振去偶技术，使图谱简化。c.对分子中全部C原子均要有明确解析和归属。d.对复杂结构化合物，可与类似结构化合物化学位移进行计算比较，确定合理结构。第61页④资料撰写格式仪器溶剂给出碳原子编号分子结构式数据表

(如有对照品或文件数据能够对比列入表中)

解析碳原子序号化学位移碳原子类型第62页5.其它核磁共振谱

DEPT谱:可区分碳原子类型;1H－1Hcosy:能够显示相隔2～3键相互之间存在偶合质子对信息;C-Hcosy(HMQC,异核多量子相关谱):能够了解分子中C-H联结情况;

第63页HSQC(异核单量子相关谱):用于测定1H-13C相关信息，能够直接明确C、H之间连接关系;HMBC(异核多重键相关谱):能够显示1H、13C之间远程偶合信息，即相隔二键和三键1H、13C之间相关信号;解析化合物中存在结构单元，推测化合物中各官能团、结构单元之间连接关系;

19F、31P等:可提供对应元素种类及数目、在分子中所处化学环境等信息;

第64页6.质谱(MS)

①基本原理：将气体分子经电子流轰击,使分子中电子成为带正电荷分子离子,而后裂解成一系列碎片离子,再经过磁场使不一样质荷比正离子分离并统计其相对强度,画出质谱图。

第65页②主要应用：提供分子离子峰、碎片峰、丰度等信息，能够确定分子量、分子式以及推测部分结构单元。对含有同位素元素(如Cl、Br等)药品,利用同位素簇丰度比，可推断药品中部分元素种类、数量，乃至分子式、裂解方式等。第66页③技术要求:a.应尽可能设法取得化合物分子离子峰。当用EI法不能出现分子离子峰时，可试用其它电离源，如CI，FAB，FI，FD等。b.所获数据按要求列表，并对主要碎片离子峰产生进行解释，提供离子裂解图。c.高分辨质谱不能反应药品纯度和结晶水，结晶溶剂，残留溶剂情况。第67页④资料撰写格式仪器测试条件数据表

裂解图解析

M/Z相对丰度碎片离子第68页7.元素分析

①主要应用：确定元素组成、分子式;除氧元素外，其余各种元素普通均能准确测定其含量。能够反应结晶水/结晶溶剂、成盐化合物酸根和碱基等。C、H、N元素可采取自动元素分析仪测定，其它元素可采取适宜物理或化学方法测定。

第69页

②技术要求：a.应详细说明使用仪器、测定方法及条件。尤其是对测试样品预处理方法、条件。b.同一样品测定两次，两次试验数据同时列出，不取平均值。c.应给出计算理论值所依据分子式，包含结晶水（或结晶溶剂)。列表比较实测值与理论值（普通要求误差不超出0.3％），初步判定供试品与目标化合物分子组成是否一致。d.附测试汇报单复印件。第70页8.热分析①基本原理：采取程序控温下，准确统计待测物质理化性质与温度关系，研究其受热过程中晶型转变、熔融、升华等物理改变和脱水、热分解、氧化、还原等化学改变。

第71页

②主要应用：差示扫描量热法（DSC):测定熔点、结晶水/结晶溶剂、考查晶型等。热重法（TGA):测定结晶水、吸附水和结晶溶剂、分解温度等。第72页

③技术要求：a.应说明使用仪器型号、参数设定值，包含升温度速度、样品重量、温度范围。b.供试品与对照品应在同一仪器、相同条件下测定。c.差热分析曲线表示：纵坐标为热流率（dp/dt），恒坐标为温度（℃）。气体普通为氮气，流速为40ml/min。热重分析曲线表示：纵坐标为重量（mg）或重量百分数，横坐标为温度（℃），气体普通为氮气，流速为40ml/min。

第73页④资料撰写格式

仪器测试条件测试结果和讨论第74页9.X－射线衍射粉末X-射线衍射主要应用:a.固体状态下单一化合物判别b.晶型确定c.晶态与非晶态物质判断等

第75页

单晶X－射线衍射①主要应用:a.化合物骨架结构信息b.化合物相对或绝对构型c.构象及差向异构d.盐键及配位键f.结晶水/溶剂第76页②资料撰写格式仪器测试条件结构解析晶体学参数结构测定方法结构数据结构图结论第77页10.综合解析①综合解析普通过程:a.确定化合物分子式

元素分析质谱法（尤其是高分辨质谱）综合各种谱图提供碳、氢等原子数b.依据分子式计算不饱和度c.确定分子中存在主要官能团和结构单元d.明确各官能团、结构单元连接方式e.对构型、晶型、结晶水/结晶溶剂进行分析第78页

②技术要求：

a.有对照品

样品和对照品测试结果是否一致波谱信号归属b.无对照品

详细解析、正确归属参考文件能够作为主要参考资料第79页③资料撰写要求：

简明扼要有机合理深入

第80页稳定性研究资料撰写

基本要求

----申报资料14第81页申报资料格式和内容

一.供试品起源及批号二.试验内容

1.加速试验

(40±2℃、RH75±5％

)2.长久试验(25±2℃、RH60±10％

三.考查项目四.试验结果五.结论与讨论六.附图

第82页(一)稳定性研究基本内容

和特点影响原因试验加速试验长久留样试验

第83页三种试验比较

时间条件目影响原因试验10天最为猛烈初步确定药品性质及包装容器和材料，估测加速与长久留样应采取温度和湿度。加速试验6个月较为猛烈初步评定正常条件下放置更长时间稳定性。长久试验时间最长，贯通研究工作一直模拟上市产品储存条件是确定使用期、储存条件和包装材料最终依据。第84页1.影响原因试验

新药:原料药和制剂均提议进行该项试验，制剂稳定性试验能够在处方筛选和工艺设计过程中进行;

已经有国家标准品种:暂不要求，但勉励研发企业进行制剂影响原因考查;

第85页

(1)试验目标

a.考查药品在极端条件下固有稳定性，了解其降解路径和可能降解产物；同时得到降解产物也可用于相关杂质检验方法适用性评定。

b.为制剂工艺筛选、包装材料和容器选择、贮存条件确实定等提供依据。c.为加速试验和长久试验应采取温度和湿度等条件提供依据。

第86页

(2)试验普通要求

经典影响原因试验:

光照

高温

高湿

其它：氧化、pH影响等。

第87页

原料药:将一批供试品置适宜容器中(量瓶或培养皿),摊成≤5mm厚薄层(疏松原料药摊成≤10mm厚薄层)进行试验。

制剂:除去内包装最小制剂单位,分散为单层置适宜条件下进行。

如试验结果不明确,应加试2个批号样品。第88页

光照试验

供试品放在装有日光灯光照箱内,于照度4500lux±500lux下放置10天，于第5天和第10天取样。

ICHQ1B要求样品总照度不低于1.2*106Lux.hr，近紫外能量不低于200w.hr/m2。

第89页

高温试验

60℃下放置10天，于第5天和第10天取样，检测评价指标。

若供试品有显著改变（如含量下降5%），则在40℃下同法进行试验。

若60℃无显著改变，不再进行40℃试验。

ICH要求试验温度为:高于加速试验温度10℃，如50℃、60℃进行。

第90页

高湿试验

在25℃、90％±5％RH下放置10天，于第5天和第10天取样，指标可包含吸湿增重项。

若吸湿增重5%以上，则在25℃、75±5％RH下同法进行试验；若吸湿增重5%以下，且其它考查项目符合要求，则不再进行此项试验。

ICH要求试验湿度为:高于加速试验75%RH湿度进行。

第91页

热循环（冻融）试验对于一些特殊药品，如温度改变可能引发物相分离、黏度减小、沉淀或聚集药品，还需要经过热循环试验来验证其运输或使用过程中稳定性。如：凝胶剂、霜剂、软膏剂、栓剂、难溶性药品注射剂等。第92页美FDA关于“稳定性指导标准

草案”

（1998年6月发表）

对于易发生物相分离、黏度减小、沉淀或聚集药品需经过热循环试验来验证其运输或使用过程中稳定性。作为影响原因试验一部分，应模拟药品在运输与使用过程中可能碰到温度条件下，循环考查上市包装药品稳定性。第93页

详细方法以下：a.对于温度改变范围在冰点以上药品，热循环试验应包含三次循环，每次循环应在2～8℃两天，然后在40℃加速条件下考查两天。b.对于可能暴露于冰点以下药品，热循环试验应包含三次循环，每次循环应在-10～-20℃两天，然后在40℃加速条件下考查两天。

第94页

c.对于吸入气雾剂，推荐热循环试验包含一天内进行三到四次六小时循环，温度在冰点以下和40℃（75～85%RH）之间，该试验需连续考查六周。d.对于冷冻保留药品，应考查该药在微波炉或热水浴中加速融化时稳定性，除非说明书中明确禁止如此操作。第95页2.加速试验

新药申请以及已经有国家标准品种申请，均需进行该项试验。第96页(1)试验目标

a.

经过加紧市售包装中药品化学或物理改变速度，考查药品稳定性，为包装、配送及贮存提供必要资料。

b.初步估测短时期内超出正常贮存条件（如运输中可能出现连续几天高温）时对样品稳定性影响。

C.加速试验结果能够作为长久稳定试验补充，估算在非加速条件下更长时间内化学改变，为初步确定产品使用期提供依据。

第97页(2)试验普通要求

模拟市售包装三批样品，比长久放置温度最少高15℃条件下进行。

普通可选择40℃±2℃、75％±5％RH条件下，进行6个月试验，在试验期间第0、1、2、3、6个月末取样。如不符合质量标准要求，则应在中间条件即30℃±2℃、60％±5％RH同法进行6个月以上试验。

第98页

对采取不可透过性包装含有水性介质制剂(如:溶液剂、混悬剂、乳剂、注射剂等):可不要求相对湿度;对采取半通透性容器包装制剂(如:多层共挤PVC软袋装注射液,塑料瓶装滴眼液、滴鼻液等):应在40℃±2℃、20％±5％RH条件下进行;乳剂、混悬剂、软膏剂、糊剂、凝胶剂、眼膏剂、栓剂、气雾剂、泡腾片及泡腾颗粒等:直接采取:30℃±2℃、65％±5％RH条件下进行;对热敏感药品加速试验可在25℃±2℃、

60％±5％RH条件下同法进行。第99页3.长久试验

新药申请以及已经有国家标准品种申请，均需进行该项试验。

第100页(1)试验目标

主要考查原料药或制剂在市售包装条件下,在运输、保留、使用过程中稳定性,更直接地反应药品稳定性特征。

第101页(2)试验普通要求

模拟市售包装三批样品在25℃±2℃、60％±10％RH条件进行试验，取样普通为第一年每3个月末一次，第二年每6个月末一次，以后每年末一次。

对热敏感药品，可在确定温度下考查。比如，对于需在冰箱中冷藏保留药品，其长久留样考查温度就能够设定为6℃±2℃；而对于需冷冻保留药品，长久留样考查温度就能够设定-20℃±5℃。

第102页

对于申请临床研究新药和已经有国家标准品种注册申请，长久试验应进行最少6个月。

对于申请生产研究新药，应提供足够长时间长久试验资料。

第103页ICH/WHO关于长久试验和加速试验

条件新要求（2月）

ICH要求不一样气候带，不一样长久试验条件:气候带Ⅰ：温带21℃45%RH

气候带Ⅱ：高湿亚热带25℃60%RH

气候带Ⅲ：干热30℃35%RH

气候带Ⅳ：湿热30℃70%RH第104页

温带:英国、北欧、加拿大、俄罗斯；

亚热带:美国、日本、西欧（葡萄牙-希腊）；

干热带:伊朗、伊拉克、苏丹；

湿热带:巴西、加纳、印度尼西亚、尼加拉瓜、菲律宾。第105页7月，ICH公布Q1F以调整后气候带Ⅳ储备条件作为长久稳定性试验测定条件：30℃（±2℃）/65%（±5%）RH

第106页对我国气候带和稳定性试验条件

思索

①我国气候情况较为复杂，不能单纯认为属于气候带Ⅱ；②尽可能综合考虑到上市产品所处不一样环境，以确保在一些条件下，如高湿高热、干燥地域、严寒地域产品稳定性。第107页

进口中国样品，提议按照ICH新指导标准，进行30℃（±2℃）/65%（±5%）RH条件长久留样稳定性研究。

第108页(二)稳定性研究内在规律

1.含有整体性和系统性和制备工艺、质量研究相互关联。所使用分析方法应是质量研究中经过验证方法;研究结果为质控方法和质量标准建立提供依据；与制剂处方工艺有亲密联络；2.含有阶段性贯通药品研发一直。临床前申报生产获准上市后第109页（三）稳定性研究须关注几个问题第110页1.对样品要求①规模

稳定性研究用样品应为中试规模产品.

②生产工艺、设备

样品应与大生产所用工艺、设备、流程一致.

③批次

影响原因试验采取1批样品进行;

加速试验和长久试验采取3批样品进行.

第111页ICH关于新原料药及其制剂稳定性指导标准（Q1A）最新修订稿原料药:所考查三批样品最少应为中试规模，其合成路线应与工业化生产一致，生产流程应仿照工业化生产流程，其质量应能代表工业化生产产品质量。制剂:所考查三批样品中有两批应为中试规模，另一批批量在合理情况下可适当减小。该三批样品应尽可能采取不一样批次原料药生产。第112页2.考察项目设置①检测项目齐全性物理稳定性化学稳定性微生物学稳定性

第113页物理稳定性是指在要求条件下使用期内,该药品原有物理性质(包含外观、性状、均匀性、溶出性、悬浮性等很多物理特征)保持不变。第114页影响物理稳定性相关原因

（1）引湿增重所致性状改变；（2）相变造成呈色改变；

----原料药晶型改变----制剂中晶型改变----制剂中其它相变

（3）溶解性改变；（4）熔点改变；（5）分散性改变；

----包合物包封率改变----悬浮性改变----聚合影响

第115页化学稳定性指在要求条件下整个使用期内，该药品每一个活性成份均能保持其化学完整性与要求程度标示活性程度。第116页影响化学稳定性相关原因

（1）溶液pH；

----对水解反应影响----对氧化反应影响

（2）广义酸碱对水解反应催化；（3）金属离子对氧化反应影响；第117页微生物学稳定性指在要求条件下全部使用期内，该药品按照要求无菌或微生物生长程度状态能被保持程度。第118页影响微生物学稳定性相关原因（1）微生物污染和繁殖可造成药品质量改变；

----物理性状破坏：颜色、嗅味、澄明度、粘稠度、均匀度等；----有效成份破坏；----产生微粒物质；（2）制剂处方组成与性质是微生物污染内在原因；

----制剂处方组成中很多成份是微生物营养源；----制剂本身pH可适合微生物生长；第119页

酸碱度对大多数微生物生长影响酸性条件（pH)碱性条件（pH)微生物生长情况6-74-63-42-3﹤1.57-99-1010-11﹥12生长最繁茂生长良好略受抑制，尚能生长生长受严重抑制不能生长第120页

一些微生物pH耐受范围微生物类别pH耐受范围酵母菌霉菌乳酸杆菌假单孢菌束大肠菌类肠球菌属1.5-8.51.5-11.03.0-6.53.0-11.03.0-10.04.8-11.0第121页关于化学药稳定性申报要求常见问题答疑（药审中心）

申报小针、粉针、输液剂稳定性研究除进行外观色泽、含量、pH、澄明度、相关物质等考查外，为了确保效期内产品质量，需在效期末增加无菌、细菌内毒素（或热原）、不溶性微粒（输液剂）等考查。第122页②检测项目标特异性应依据原料药结构和制剂特征设定必要检测项目。如：

例1.手性药品：应考查其立体构型改变；例2.分子中存在易水解酯基:应考查该药品在不一样酸碱条件下稳定性；例3.水合物:应增加水分检验，以确定结晶水稳定性；例4.脂质体制剂：应检验主药泄漏率与粒径改变；

第123页3.放置条件选择

①放置条件应充分考虑到日后产品贮藏、运输及使用过程中可能碰到环境原因;②考查放置条件应考虑剂型、包材等各种原因;第124页

如:半透过性容器包装（塑料瓶、多层非PVC共挤袋）内制剂，除了对常规指标进行考查外，还应该对其可能发生水损失进行评价。

这类产品加速试验应在较低相对湿度条件下进行，如:20％RH，以验证是否存在水分丢失。第125页4.考查时间点设置

①普通需要设置多个时间点考查样品质量;②稳定性趋势判定要求和试验目标来设置;

如长久试验中，总考查时间应含盖所预期使用期;对于一些不稳定产品，可考虑适当增加取样时间点;第126页5.对分析方法要求

应经过充分验证，含有一定专属性、准确性、精密度、灵敏度等。方法确实定和方法验证内容应结合质量研究工作进行。第127页6.“显著改变”概念

原料药“显著改变”应包含:①性状,如颜色、熔点、溶解度、比旋度超出标准要求,晶型、水分等改变超出标准要求;②含量测定超出标准要求;③相关物质,如降解产物、异构体改变超出标准要求;④结晶水发生改变;

第128页

制剂“显著改变”应包含:

①含量测定中发生5%改变;或者不能到达生物学或者免疫学检测过程效价指标;②药品任何一个降解产物超出标准要求;③性状、物理性质以及特殊制剂功效性试验(如颜色、相分离、再混悬能力、结快、硬度、每揿给药剂量等)超出标准要求;④pH值超出标准要求;⑤溶出度或释放度超出标准要求;第129页

对包装在半通透性容器内药品：

在经过30℃（±2℃）/40%（±5%）RH条件下平衡放置3个月后，与其初始值发生5%水分减失被认为是“显著改变”。第130页7.需重新配制使用药品

稳定性要求

对注射用粉针剂、溶液片剂等应考查临床使用条件下稳定性。

方法：在实际使用条件下时间周期内，采取溶解或者稀释后制剂产品进行质量评价，在试验起始点、中间时间点和结束时间点分别检测评价指标。第131页8.多剂量包装产品拆封后

稳定性考查：

对于多剂量产品使用，拆封后产品暴露于外界环境原因，可能变得不稳定，轻易使微生物超标，产生降解产物等；为确保产品安全、有效，应深入进行稳定性研究，将研究结果写入使用说明书。第132页考查样品：选择1-3批中试样品，其中有一批应临近效期末；假如是多规格、多包装产品，应选择最轻易产生改变规格和包装样品进行试验。

模拟临床使用方法和环境，考查屡次拆封后稳定性。考查项目应与货架期标准一致，包含样品物理、化学、生物学性质。

考查时间应足够长。

第133页

(五)稳定性研究结果评价

系统分析和评价，整体评判产品稳定性;确定药品保留条件、包装材料/容器、使用期。第134页1.保存条件确定新药需要综合三种稳定性试验结果加以分析;考虑到药品在流经过程中可能碰到情况;贮存条件应该按照规范术语加以描述;已经有国家标准品种保留条件可参考已上市同品种贮存条件。第135页

中国药典要求

遮光（不透光容器）

密闭（预防尘土和异物进入）

密封（预防风化、吸潮、挥发、异物进入）

熔封或严封（预防空气和水份进入）

阴凉处（不超出20℃）

凉暗处（避光，不超出20℃）

冷处（2-1