表达载体的构建

表达载体的构建Tag内容描述：<p>1、EBEB 病毒病毒 LMP1LMP1 基因靶向基因靶向 shRNAshRNA 表达载体表达载体 构建方法的比较研究构建方法的比较研究(1)(1) 【关键词】疱疹病毒 4 型,人；RNA 干扰；遗传载体 Comparativestudybetweentwoconstructionmethodsofshor thairpinRNAexpressionvectortargetingEpsteinBarrviru sLMP1gene 【Abstract】AIM:Toexplorethedifferencesbetweentwoco nstructionmethodsofshorthairpinRNAexpressionvectort argetingEpsteinBarrviruslatentmembraneprotein1,soas tolookforamorestableandconvenientwayofconstructingt hespecialshRNAvector。</p><p>2、2 3卷1期 2 0 0 7年 1月 生物工程学报 C h i n e s e J o u r n a l o fB i o t e c h n o l o g y V0 J 2 3 No 1 J a n u a r y 2 0 07 选择标记可去 除的植物高效表达载体 Co n s t r u c t i o n o f S e l e c t a b l e Ex Ve c t o r sEx p r e s s i o n V e c t o rs 的构建 M a r k e r r e m o v a b l e Pl a nt 高 尚 ， 苏 鹃 ， 贾洪革 ， 郭洪年 ， 田颖川 1 ， 方荣祥 ， 陈晓英 G A O S h a n g ，S U L e i ，J I A Ho n g - G e ，GU O H o n g Ni a n ，T I AN Y i n g C h u a n ，F A NG R o n g - Xi a n g a n d 。</p><p>3、hPIN1基因酵母双杂交表达载体的构建及其毒性与自激活效应检测孟祥贵1 黄 轶2 杨梅华3 刘立杰1(1第三军医大学新桥医院健康体检中心，重庆 400037；2 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室, 重庆市生化与分子药理重点实验室， 重庆 400016；3 第三军医大学新桥医院神经外科，重庆 400037)摘要 目 的克隆人肽基脯氨酰顺反异构酶PIN1基因，构建酵母双杂交系统表达载体，并检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无激活作用。方 法 运用RT-PCR 从人胃癌组织中扩增PIN1基因片段,平端克隆入环状自连pMD18-T载体，测序鉴定后以此。</p><p>4、二、基因表达载体的构建（核心步 骤） 先用同一种限制 酶分别切割目的 基因和质粒，再 用DNA连接酶将 二者连接，形成 重组DNA分子。 三、将目的基因导入受体细胞（转化） n n 常用的受体细胞：常用的受体细胞： n n 有大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物有大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物 细胞等。细胞等。 1、受体细胞是植物细胞 n农杆菌转化法：主要侵染双子叶植物（伤 口分泌酚类化合物吸引农杆菌） n基因枪法 n花粉管通道法 1）土壤农杆菌法 2）基因枪法 3）花粉管通道法 2、受体细胞是动物细胞 n显微注射法 n注入动物受精卵 198。</p><p>5、表达载体的构建方法及步骤一、载体的选择及如何阅读质粒图谱 目前，载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。一个合格质粒的组成要素：（1）复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。（2）抗生素抗性基因可以便于加以检测，如 Amp+ ,Kan+（3）多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段（4） P/E 启动子/增强子（5）Terms 终止信号（6）加 poly（A）信号可以起到稳定 mRNA 作用选择载体主要依据构建的目的，同时要考虑载体中应。</p><p>6、Survivin基因真核表达载体的构建及其在cos-7中的表达作者：李红李明红杨桦镡旭民 【摘要】 目的克隆人survivin基因并在真核细胞中表达。方法 以人喉癌组织中提取总RNA为模版，采用反转录聚合酶链RT-PCR法获得survivin cDNA。将该基因克隆到pcDNA3.0载体中,构建真核细胞表达载体pcDNA3.0/survivin，将测序正确的survivin基因通过脂质体介导下转染cos-7，Western blot检测survivin蛋白在cos-7中表达。结果 DNA测序证明获得了survivin基因，其序列与GeneBank中报道序列完全一致。Western blot检测survivin蛋白获得高效表达，其相对分子质量为。</p><p>7、三叶因子2基因真核表达载体的构建作者：张绍荣，杨晓强，邢锐，宋于刚，陈学清【关键词】 胃溃疡Construction of eukaryotic expression vector of human TFF2 gene【Abstract】 AIM: To construct a eukaryotic expression vector of human TFF2 gene. METHODS: We assembled a TFF2 gene in pfu mix reaction system and cloned it to pGMT easy vector. The positive colonies were first confirmed by restriction enzyme digestion and sequencing and then were inserted to eukaryotic expression vector pcDNA3.1 and verified by。</p><p>8、乙肝多表位抗原基因非融合表达载体的构建和表达【摘要】 目的: 研究乙型肝炎病毒（HBV）多表位基因的在原核载体中的克隆、 游离表达及其产物的抗原性。方法: 设计、 并合成HBV多表位抗原基因BPT, 克隆入原核表达载体pBAD/gIIIA, 进而转化Top10大肠杆菌, 阿拉伯糖诱导表达出HBV多表位抗原蛋白（BBPT）, 并用Western blot方法初步检测该抗原蛋白的抗原性。结果: 成功构建了原核表达载体pBAD/BPT, 在大肠杆菌中表达出HBV多表位抗原蛋白BBPT, Western blot 检测显示该蛋白具有良好抗原性。结论: HBV多表位抗原基因的设计是成功的, 其在大肠杆。</p><p>9、人血管内皮抑素毕赤酵母真核表达载体的构建【摘要】 目的 构建人血管内皮抑素（ES）毕赤酵母真核表达载体。方法 利用RTPCR技术从人体肝脏组织扩增出ES基因，插入毕赤酵母表达载体pPIC9中，酶切鉴定并进行DNA测序鉴定。结果 成功克隆ES基因并筛选出pPIC9载体中的ES阳性克隆，测序证实其序列与已报道的ES基因序列一致。结论 用分子生物学方法构建ES毕赤酵母真核表达载体的成功，使高效表达ES蛋白成为可能。 【关键词】 内皮抑素类 人类 克隆 分子 毕赤酵母 ABSTRACTObjectiveTo construct yeast eukaryotic expression vector carrying huma。</p><p>10、干扰AFP蛋白表达的shRNA表达载体的构建及活性鉴定作者：张国英 刘明社 赵中夫* 张芸 杨慧 武延隽【摘要】 目的：利用含报告基因EGFP的pGenesil-1质粒构建干扰AFP蛋白表达的短发夹RNA (short hairpin RNA，shRNA)表达的载体，并进行活性鉴定。方法：设计表达短发夹RNA的互补DNA序列，经退火成双链，克隆至带有U6启动子的质粒载体pGenesil-1中，构建重组质粒， 转化大肠杆菌DH5菌株，扩增，提取质粒，酶切鉴定后测序分析。构建正确的重组质粒经脂质体转染HepG2细胞，检测转染率和培养细胞上清的AFP含量变化，确定重组质粒的活性。结果：构建。</p><p>11、脑源性神经营养因子融合蛋白真核表达质粒的构建及表达作者：石秦东，张蓬勃，田玉梅，张军峰，陈新林，刘勇【摘要】 目的 构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的脑源性神经营养因子(BDNF)融合蛋白真核表达质粒，并对其表达和定位进行研究。方法 以人血白细胞DNA为模板，利用一对删除终止密码子的引物进行PCR获得BDNF基因片段，并将其与pEGFPN1质粒载体连接，构建BDNFEGFP融合蛋白真核表达质粒。以脂质体Lipofectamine2000 转染Hela细胞，提取总RNA，通过RTPCR方法检测BDNFEGFP在转录水平的表达，Western blot 及荧光显微镜进一步观。</p><p>12、精品论文大全HBsAg 基因的克隆及其香蕉果实表达载体的构建1黄惠琴，胡永华，朱军，方哲，鲍时翔 中国热带农业科学院热带生物技术研究所，海南海口（571101） E-mail：bsxhhqyahoo.com.cn摘 要：乙型肝炎是由乙肝病毒（hepatitis B virus，HBV）引起的全球性传染病，目前主 要通过注射疫苗来预防。然而用酵母等表达系统生产的乙肝疫苗成本高且储存不方便，限制了它的普及。在可食性植物中表达疫苗将是其发展趋势。本研究通过改进的酚-氯仿提取 法从乙肝病毒感染者的血清中提取 HBV DNA，根据报道的序列设计特异性引物，同时在上游引物中引。</p><p>13、21 9 2 论 著 国际检验医学杂志 2 0 1 1 年 1 1 月第 3 2卷第 l 9期I n t J L a b Me d ， N o v e mb e r 2 0 1 1 ， V o 1 3 2 ， N o 1 9 嗜酸乳杆菌 p 一 半乳糖苷酶基 因表达载体 的构建与蛋 白特性分析 邓 红艳 ， 贺松 ， 赫兰辉 ( 成都大学附属医院检验科， 四川 6 1 0 0 8 1 ) 摘 要 ： 目的 构建 嗜酸 乳 杆 菌 半乳 糖 苷 酶基 因表 达载 体 并 分析 其 表 达蛋 白的 特性 和 结 构。方 法 从 嗜 酸 乳 杆 菌 AT C C 4 3 5 6中克隆 l a c Z基 因并构建表 达载体 p MG3 6 e l a c Z， 并对构建后 的表达 载体进行鉴 定和表 达蛋。</p><p>14、基因工程乳酸菌表达载体的构建与应用,研究院 穆熙军,提供营养促进生长,维持肠道菌群平衡,刺激肠道免疫组织产生免疫球蛋白,降低动物血清胆固醇含量,促进小肠局部细胞免疫和体液免疫,乳酸菌,表达抗原蛋白,口服疫苗,表达细胞因子,表达抗菌多肽,表达活性酶/功能性蛋白,文献分析1,文献分析2,文献分析3,宝来利来研发中心,乳酸菌,如何分布？,定殖情况？,Subject 1,pMG36e载体图谱,pMG36e,pMG36e,Subject 2,产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)是一种重要的人兽共患病原菌，能引起动物坏死性肠炎(Necrotic enteritis, NE)、人类食物中毒等。,C 。</p><p>15、______________________________________________________________________________________________________________ 表达载体的构建方法及步骤 一、载体的选择及如何阅读质粒图谱 目前，载体主要有病毒和非病毒两。</p>