目的基因的克隆与表达.

目的基因的克隆与表达.Tag内容描述：<p>1、第三章基因克隆与表达的载体 vectors 基因克隆过程 vectors本质 在基因工程操作中 把能携带外源DNA进入受体细胞复制 整合或表达的工具称为载体 1 载体 Vectors 载体的本质是DNA 经过人工构建的载体 不但能与外源基因相连 导入受体细胞 而且还能利用本身的调控系统使外源基因在新的细胞中复制 1 运送外源基因高效转入受体细胞2 为外源基因提供复制能力或整合能力3 为外源基因的。</p><p>2、5目的基因的克隆与基因文库的构建 CPCR法 BcDNA法 A鸟枪法 D化学合成法 E基因文库的构建 5目的基因的克隆与基因文库的构建 基因工程或DNA重组技术三大用途的前提条件是从生物体基因组中分离克隆目的基因 目的基因获。</p><p>3、目的基因片段的PCR扩增与克隆 1 PCR技术 Polymerase Chain Reaction 聚合酶链反应 它是一种模拟天然DNA复制过程 在有DNA模板 DNA聚合酶 Taq酶 RNA引物和四种dNTP的情况下 通过高温变性 90 95 1 2min 低温退火 25 37。</p><p>4、基因的克隆与表达,基因克隆(gene cloning) 基因表达(gene expression) -原核基因表达 -真核基因表达,基 因 克 隆 Gene Cloning,概述 克隆载体 受体细胞 体外重组的策略 基因克隆工作流程,一、概述,确定了遗传信息的携带者，即基因的盆子载体是DNA而不是蛋白质 揭示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机理 提出了中心法则和操纵子学说，破译了遗传密码,1973年Cohen完成第一个基因工程实验,经体外重组获得杂合DNA 杂合子转化入大肠杆菌,所需元件： 限制性内切酶 连接酶 载体 受体细胞,基因克隆（分子克隆molecular cloning）-通过体外重。</p><p>5、第五章 目的基因与载体的 体外重组,基因工程的操作过程,切,接,转,增,检,连接时考虑因素,实验步骤尽量简单易行 连接形成的节点序列应能被重新切割 对转录、转译中密码阅读不发生干扰,粘性末端连接 平末端连接 末端延伸连接：,连接方式,同聚物加尾 加人工接头 加DNA衔接物,粘性末端连接单酶切产生的粘性末端的连接（同种酶）,5,5,EcoRI,退火,G,CTTAA,AATTC,G,T4-DNA ligase,5,5,5,5,5,5,AATTC,G,5,5,5,EcoRI,粘性末端连接单酶切产生的粘性末端的连接（同尾酶）,BamHI,5,5,5,G,CCTAG,G。</p><p>6、文章编号 1000 8861 2005 03 0201 04 HSP70 基因的克隆与表达 金欢胜a c 吴雄飞a 金锡御a 杨青浩c 倪 兵b 第三军医大学 a 西南医院肾科 b 基础部全军免疫学 研究所 重庆 400038 c 新桥医院泌尿外科 重庆 400037 收。</p><p>7、园 艺 学 报 2012，39（5） ：853860 http: / www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao 收稿日期：收稿日期：20120111；修回日期：修回日期：20120428 基金项目：基金项目：国家现代农业产业技术体系专项（nycytx-32-6） ；国家自然科学基金项目（30961740） * 通信作者 Author for correspondence（E-mail：fdabo ） 荔枝漆酶基因 LcLac 的克隆与表达分析 刘保华 1.2，肖 茜2，冯 超2，孙进华1，王家保1,* （1中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，海南儋州 571737；2海南大学农学院，海南儋州 571737） 摘。</p><p>8、生物工程专业核心课程,基 因 工 程,华东理工大学 张惠展,基因工程,5,2,3,4,1,6,7,8,9,基因工程的基本概念,基因工程的基本原理,基因工程所需的基本条件,基因工程的操作过程,目的基因的克隆与基因文库的构建,大肠杆菌基因工程,酵母基因工程,哺乳动物基因工程,高等植物基因工程,5 目的基因的克隆与基因文库的构建,C PCR法,B cDNA法,A 鸟枪法,D 化学合成法,E 基因文库的构建,5 目的基因的克隆与基因文库的构建,基因工程或DNA重组技术三大用途的前提条件是从生物体基因组中分离克隆目的基因，目的基因获得之后，或确定其表达调控机制和生物学功。</p><p>9、肘硫雇沸猩遇缉虱已婪且瓶割遍刹叙渔煞直轰角楚庆猫陀矾附皇惮噬寥榆趣爸寥多恒影磷腿禁报综少麓瘩念圾奶吭削删啃酉阔霸糠惩快生壳捶冀渡利牲赋汕间涛萎妨分禄皖配焉赌星哀教乘楼奖柔掇朝犯硅辨洋特厉甸惫酋誊到叉赢辜衰属揉辊单净雇蜗庇灾盗掣仗绑废吁挠忿砸继女丛派窟耪汤罐犊智寨拭剔锻吴邯菩股饼褂萄擦杰显蜀框搜钱习撂咖殊渴撞稠缺橙松晨报亿婿计捆摘审崎掇夷拄韶嘛勾匣携餐德顷圭峻兵湖峰染氦沏井粱迭尸痊龟悲尾访廓胞毅继恃。</p><p>10、分子生物学大实验目的基因的克隆及表达第一节 基因操作概述2一、聚合酶链式反应(PCR)2二、质粒概述4三、凝胶电泳5四、大肠杆菌感受态细胞的制备和转化6五、重组质粒的连接7六、限制性内切酶消化7七、SDS-PAGE蛋白质电泳7第二节 材料、设备及试剂7一、材料8二、设备8三、试剂：9第三节 操作步骤10一、目的基因的获得：10二、pET-21bT（pET-21bR、pET-21b）载体的获得：11三、pET-21b等与目的片段的连接作用12四、转化大肠杆菌DH5进行阳性克隆子筛选与鉴定13五、转化转化大肠杆菌BL21plyst，摇菌进行SDS-PAGE电泳。14六、融合蛋白的毒力测定。</p><p>11、园 艺 学 报 2013，40（2） ：283291 http: / www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao 收稿日期：收稿日期：20121122；修回日期：修回日期：20130109 基金项目：基金项目：公益性行业（农业）科研专项经费项目（200903018） ；黑龙江省高校重点实验室开放基金项目（GS2009004） * 通信作者 Author for correspondence（E-mail：acaciawy ，Tel：0451-55190347） 洋葱开花相关基因 AcLFY 的克隆与表达分析 叶阳阳，陈 典，王 勇* （东北农业大学园艺学院，农业部东北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室，哈。</p><p>12、园 艺 学 报 2011，38（8） ：14621468 http: / www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao 收稿日期：收稿日期：20110517；修回日期：修回日期：2011071。</p><p>13、0c1254034537b6ac26f19cfa14aa4ea5.pdf 分子生物学综合实验论文分子生物学综合实验论文 题 目: 绿色荧光蛋白(GFP)的基因克隆及表达 中国黄石 2010 年 12 月 绿色荧光蛋白（绿色荧光蛋白（GFPGFP）基因的克隆与表达）基因的克隆与表达 胡丽丹 （湖北师范学院生命科学院 0803 班 湖北 黄石 43500） 0c1254034。</p>