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细菌革兰氏染色

实验一 细菌的革兰氏染色 生物科学 贺冰冰 040012010025 周二 9、0 节 一 实验目的 1 学习显微镜油镜的使用方法 2 学习微生物的无菌操作技术 3 学习细菌的革兰氏染色法 二 实验原理 1 显微镜及油镜物镜的使用原理 1) 油镜头的标志 油镜头上常刻有 OI 或 HI 字样。

细菌革兰氏染色Tag内容描述:<p>1、实验一 细菌的革兰氏染色 生物科学 贺冰冰 040012010025 周二 9、0 节 一 实验目的 1 学习显微镜油镜的使用方法 2 学习微生物的无菌操作技术 3 学习细菌的革兰氏染色法 二 实验原理 1 显微镜及油镜物镜的使用原理 1) 油镜头的标志 油镜头上常刻有 OI 或 HI 字样,有的还刻有一圈红线或黑线标记。在低倍物镜、 高被物镜和油镜 3 种物镜中,油镜的放大倍数和数值孔径最大,而工作距离最 短。 2 ) 显微镜的分辨率 显微镜性能主要是看它的分辨率的大小,然后看它的总放大倍数。分瓣率是指 显微镜能分辨出物体两点间最小距离(D)的能力。D 值。</p><p>2、实验二 革兰氏染色及细菌特 殊结构观察 2006.03.08 一、实验目的 学习细菌的革兰氏染色原理和方法 了解细菌的特殊形态结构: 芽孢、荚膜、鞭毛 二、实验原理 单染色法:只能观察微生物的大小、形状 、和细胞排列状况,但不能鉴别微生物以 及它的特殊构造等。 复染色法:用两种或两种以上染色液进行 染色,有协助鉴别微生物的作用,故也称 鉴别染色法。常用的有: 革兰氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法 、鞭毛染色法等。 革兰氏染色 丹麦C.Gram创立,用于细菌分类学研究 细菌细胞壁的结构 G肽聚糖层较薄,交联度低,含较多脂 质,故用乙醇。</p><p>3、实验二 细菌的革兰氏染色及芽孢染色法,实验一存在问题,1、香柏油要加适量 2、涂完菌后接种环一定要灼烧灭菌 3、无菌操作 4、擦镜纸浪费 5、载玻片要洗干净 6、画图不符合要求,细菌 个体微小 半透明,未 染色 细菌大致形态大小,单染色法,复染色法,能看清形态大小 但是无鉴别意义,能看清形态大小 又有鉴别意义,显微镜,细菌的染色,(一)实验目的:,1、学习并掌握革兰氏染色法和芽孢染色法。 2、巩固显微镜油镜的使用技术和无菌操作技术。,革兰氏染色法:是1884年由丹麦病理学家所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)。</p><p>4、实验二细菌涂(抹)片的制备和革兰氏染色,目的要求:1、掌握细菌抹片的制备方法和常用染色方法。 2、认识革兰氏染色和抗酸性染色的反应特性。 实验内容: 1、 细菌抹片的制备: 玻片准备:透明、洁净、无油渍。 抹片:液体材料、非液体材料、组织脏器材料的抹片方法讲解、示范。 干燥固定:火焰固定和化学固定的示范。讲解其目的及注意事项。 2、 细菌涂片的制备:讲解并示范涂片、干燥、固定的方法。 3、 细菌常用染色方法:革兰氏染色法,细菌抹片 的制备,革兰氏染色法: 1. 制片:取待检病料或细菌培养物常规抹(涂)片、干燥、固定。 2。</p><p>5、实验一 革兰氏染色、细菌接种,实验内容,一,革兰氏染色(操作) 二,细菌接种 平板划线法(操作) 斜面培养基接种法(操作) 半固体培养基接种法/穿刺接种法(操作) 液体培养基接种法(操作) 细菌在液体、固体、半固体培养基中的生长现象(示教),实验内容,一,革兰氏染色(操作) 二,细菌接种 平板划线法(操作) 斜面培养基接种法(操作) 半固体培养基接种法/穿刺接种法(操作) 液体培养基接种法(操作) 细菌在液体、固体、半固体培养基中的生长现象(示教),革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家Christain Gran 创立的。,实验原理。</p><p>6、Central Laboratory of Biology,实验四 油镜的使用及细菌革兰氏染色法,微生物学实验,课前提问与目的要求,【课前提问】,1.油镜的特点及使用范围是什么? 2.革兰氏染色的原理是什么?,【目的要求】,1. 学习并掌握油镜的原理和使用方法; 2. 了解革兰氏染色原理; 3. 学习并掌握革兰氏染色的方法。,【基本原理】,1. 油镜提高分辨率 油镜与其他物镜的不同是载玻片与物镜之间是隔一层油质。如香柏油的折射率n=1.52,与玻璃相同。 光线通过不减低视野的照明度; 更主要能增加数值孔径,提高显微镜的放大效能。 分辨率=/2NA =光波波 (物镜的数值。</p><p>7、实验2细菌革兰染色,第一,实验目的,掌握微生物生产、染色的基本技术,进一步观察细菌革兰染色和无菌操作菌的基本形态,C.Gram(革兰)于1884年设计了识别不同种类细菌的染色方法。第二,实验原理,革兰氏染色,1,碱性染料结晶紫细菌液体涂层早期染色,2,用碘溶液在介质上染色,其作用是提高染料和细胞之间的相互作用,使结合更加牢固。3,用乙醇或丙酮冲洗以脱色。经过脱色后,结晶紫是细胞内残留的革兰阳性细菌。</p><p>8、实验二细菌革兰氏染色,一、实验目的,学习微生物制片、染色的基本技术掌握细菌革兰氏染色及无菌操作技术进一步观察细菌的基本形态,C.Gram(革兰)于1884年发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法。,二、实验原理,革兰氏染色,1、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染,2、用碘溶液进行媒染,其作用是提高染料和细胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。,3、用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色后仍将结晶紫保留。</p><p>9、细菌普通染色 和革兰氏染色,目的要求 a. 掌握细菌涂片标本的制备方法和普通染色的步骤和关键点 b. 掌握革兰氏染色法的步骤和关键点 c. 识别细菌的革兰氏染色结果并画图 d. 学习无菌操作技术,材料用具 显微镜,擦镜纸,纱布 革兰氏染液 香柏油,自来水,95%酒精; 载玻片,插镜纸,接种环,镊子,酒精灯; 金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌,未知菌12小时的液体培养液 大肠杆菌和酵母菌平板,实验步。</p>
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