真核表达载体

真核表达载体Tag内容描述：<p>1、1、pCMVp-NEO-BAN 载体载体 特点:该真核细胞表达载体分子量为 6600 碱基对，主要由 CMVp 启动子、兔 -球蛋白基 因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗 neo 基因以及 pBR322 骨架构成，在大多 数真核细胞内都能高水平稳定地表达外源目的基因。更重要的是，由于该真核细胞表达载 体中抗 neo 基因存在，转染细胞后，用 G418 筛选，可建立稳定的、高表达目的基因的细 胞株。 插入外源基因的克隆位点包括 Sal1、BamH1 和 EcoR1 位点。注意在此载体中有二个 Ec oR1 位点存在。 2、pEGFP, 增强型绦色荧光蛋白表达载体增强型绦色荧光蛋白表达。</p><p>2、ING4真核表达载体的构建及对胶质瘤 细胞U87MG增殖的影响 作者姓名（排序）： 李晓梅 作者单位： 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院 第一作者姓名及身份证号码：李晓梅 230204197304071424 通讯作者姓名： 耿敬姝 1 研究背景 INGs（INhibitor of Growth肿瘤生长抑制因子） 是近些年发现一个肿瘤抑制基因家族，包括ING1、 ING2/ING12L、ING3、ING4 、ING5和三种酿酒酵母 INGs（Yng1、Yng2、及Pho23）, 它们彼此之间保持 较高的同源性。ING4基因是新近发现的ING基因家族 的新成员，定位于人12q13-32，由8个外显子和7个内 含子组成，编码248个氨基酸。</p><p>3、ING4真核表达载体的构建及对胶质瘤 细胞U87MG增殖的影响 作者姓名（排序）： 李晓梅 作者单位： 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院 第一作者姓名及身份证号码：李晓梅 230204197304071424 通讯作者姓名： 耿敬姝 1 研究背景 INGs（INhibitor of Growth肿瘤生长抑制因子） 是近些年发现一个肿瘤抑制基因家族，包括ING1、 ING2/ING12L、ING3、ING4 、ING5和三种酿酒酵母 INGs（Yng1、Yng2、及Pho23）, 它们彼此之间保持 较高的同源性。ING4基因是新近发现的ING基因家 族的新成员，定位于人12q13-32，由8个外显子和7个 内含子组成，编码248个氨基酸。</p><p>4、文章来源 毕业论文网 www.biyelunwen.com.cnTGF3真核表达载体转染骨髓基质干细胞促进其向软骨分化的实验文章来源 毕业论文网 www.biyelunwen.com.cn作者：郑东，杨述华，袁晓梅，李进，冯勇，徐亮，梅荣成 【摘要】 目的构建生长转化因子(TGF3)含绿色加强绿色荧光蛋白的真核表达质粒pIRES2EGFPTGF3，然后用该质粒转染骨髓基质干细胞(Marrow stromal cells,MSCs)并促进MSCs向软骨方向分化。方法用RTPCR法从大鼠的胚胎组织中提取TGF3的DNA全长，首先连接到pMDl8T载体，扩增、纯化后经测序公司测序确定插入目的基因序列的正确性，然后再用带。</p><p>5、含报告基因的凋亡素基因真核表达载体构建研究 * 王福庆 1? 王庆宝2? 韩国新2 ( 1 . 滨州市人民医院, 山东 滨州 ? 256600 ; 2 . 泰山医学院, 山东 泰安?271016) 摘要: 目的? 构建含报告基因的凋亡素基因真核表达载体。方法? 对 pMD18T?VP3质粒进行 EcorI和 Ba mHI 双酶切, 回收 366 bp(含凋亡素基因完整序列 )片段。对增强型绿荧光蛋白 pEGFP?C2质粒酶切, 回收载体大片段。 将凋亡素基因通过连接反应, 连接到增强型绿荧光蛋白 ( EGFP)基因 C末端的终止密码前, 并使两者读框不移位, 构建成 pEGFP?VP3质粒, 并对其进行酶切分析和测序鉴定载体。</p><p>6、三叶因子2基因真核表达载体的构建作者：张绍荣，杨晓强，邢锐，宋于刚，陈学清【关键词】 胃溃疡Construction of eukaryotic expression vector of human TFF2 gene【Abstract】 AIM: To construct a eukaryotic expression vector of human TFF2 gene. METHODS: We assembled a TFF2 gene in pfu mix reaction system and cloned it to pGMT easy vector. The positive colonies were first confirmed by restriction enzyme digestion and sequencing and then were inserted to eukaryotic expression vector pcDNA3.1 and verified by。</p><p>7、人CD44基因真核表达载体构建及在乳腺癌细胞中的表达作者：房新建 许文林 张徐 钱晖 陈琛 方莉莉 陈巧云【摘要】 目的： 从人类乳腺癌耐多柔比星细胞株细胞（MCF7/Adr)中克隆CD44基因并构建CD44基因真核表达载体pcDNA3.1CD44; 将pcNDA3.1CD44稳定转染入人乳腺癌细胞株（MCF7）细胞中。方法： 从MCF7/Adr细胞中提取总RNA进行RTPCR，获得全长的cDNA模板；将含有CD44基因的cDNA模板使用限制性内切酶进行双酶切获得带有酶切位点的CD44基因,再将带有酶切位点的CD44基因经TA克隆后测序验证，然后亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1中，双酶切鉴定后再。</p><p>8、人cbl 基因真核表达载体的构建及表达【Abstract】AIM： To construct the eukaryotic expressing vector of human cbl and test its expression in African green monkey kidney cell line COS7. METHODS: Human cbl gene tagged with flag was amplified from pEFHAcbl plasmid by PCR. The product was cloned into pGEMT easy, sequenced and then subcloned into eukaryotic expressing vector pcDNA3.1(+). The recombined vector was then transfected into COS7 cells with lipofectin and the expression of cbl gene was detecte。</p><p>9、人TGFBI基因克隆及真核表达载体的构建作者：葛红岩于旭辉尚巍赵秀梅张璐高维奇刘平【摘要】 目的:克隆人TGFBI基因 ,并构建其真核表达载体。方法:通过RT-PCR从供体角膜移植术后留下的角膜组织中克隆人TGFBI基因全长编码区，将该DNA片断亚克隆到克隆载体pMD18-T中，进一步通过和Sal I双酶切将目的片断定向克隆至真核表达质粒载pCI 中。经PCR,酶切和序列测定方法鉴定重组质粒。结果:获得了人 TGFBI的编码基因，并成功建了其真核表达载体。结论:人TGFBI基真核表达质粒的成功构建并鉴定。 【关键词】 TGFBI角膜营养不良真核表达Cloning of huma。</p><p>10、人源肝癌单链抗体（scFv）基因真核表达载体的构建和表达【摘要】 目的: 构建人源肝癌单链抗体（scFv）基因真核表达载体pSectag2/scFv并在中国仓鼠卵巢（CHO)细胞中获得表达。方法: 利用噬菌体细胞内重组技术筛选得到了肝癌特异性scFv, 用PCR技术及核酸内切酶技术将其克隆入真核表达载体pSectag2, 构建重组载体pSectag2/scFv, 测序鉴定后, 电转染CHO细胞, 利用SDSPAGE和Western blot检测目的蛋白的表达情况。结果: 将750 bp人源肝癌scFv插入真核表达载体pSectag2, 经DNA测序鉴定正确, 成功构建了pSectag2/scFv。将Sectag2/scFv转染CHO细胞。</p><p>11、单链抗体A 7基因真核表达载体的构建【摘要】 目的 构建抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因的真核表达载体，为单链抗体A 7基因的真核表达及基因治疗重症肌无力奠定基础. 方法 应用PCR技术，从已构建的含有抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因的重组原核表达载体pHEN 2单链抗体A 7上扩增单链抗体A 7基因并纯化，将纯化后的PCR产物经EcoR和Avr双酶切后，用低熔点琼脂糖凝胶电泳回收并纯化，再与经同样酶切并纯化的真核表达载体pPIC 9 K连接，将其产物转化至大肠杆菌DH 5 后扩增，再用Avr和EcoR酶切和测定序列检查ScFv A 7基因。</p><p>12、口蹄疫病毒VP1基因真核表达载体的构建及其在树突状细胞的表达作者：李杰, 王若, 石玮, 边海霞, 张丽, 张雷, 王家鑫【摘要】 目的: 构建口蹄疫病毒VP1基因的真核表达载体, 转染并筛选稳定表达VP1的树突状细胞(dendritic cell, DC)。方法: 将pMD18VP1克隆于pcDNA3.1(+)中, 构建重组质粒, 酶切鉴定, DNA测序证实序列正确后, 利用脂质体将重组质粒转染DC, 经含G418培养基筛选获得抗G418细胞克隆, 用Western blot鉴定FMDV VP1基因在DC中的表达。结果: 构建的pcDNA3.1VP1真核表达载体经限制性内切酶酶切鉴定及序列分析证实了其序列的正确性, SDS。</p><p>13、小鼠趋化因子CXCL10真核表达载体的构建【摘要】 应用RT-PCR方法，从小鼠脾脏T细胞的mRNA中，扩增获得编码小鼠趋化因子CXCL10的cDNA，并加上人单核细胞趋化蛋白1的信号肽基因，将其克隆到Pucm-T载体，经酶切及测序鉴定，进而构建CXCL10重组真核表达载体。采用脂质体法体外转染COS-7真核细胞，经Western blot和趋化指数检测，转染细胞能够表达CXCL10蛋白，其上清对淋巴细胞具有趋化作用。CXCL10的真核表达载体构建成功，为进一步研究其在肿瘤治疗中的作用奠定了基础。 【关键词】 CXCL10；基因克隆；真核表达载体Gene cloning and eukaryoti。</p><p>14、真核表达质粒pVAX1的应用作者：曲云鹏，刘建国，杨德琴【关键词】 pVAX1；DNA疫苗；质粒从20世纪90年代DNA疫苗诞生以来，其在医学领域已取得长足的进步和发展，它的出现为预防感染性疾病的发生提供了一种新思维、新方法。但是，目前在DNA疫苗中所应用的载体质粒仅局限于实验室研究和动物实验，如何使DNA疫苗应用于人体实验，最终走向临床研究，是摆在当今广大科研人员面前的关键难题。pVAX1的出现为解决这一难题提供了可能，它是由美国食品和药品管理委员会（FDA）推荐的唯一可以应用于人体实验的载体质粒。迄今为止，关于pVAX1的研究已涉。</p><p>15、靶向遗传印记基因PEG10的siRNA真核表达载体的构建及鉴定作者：黄锦，林菊生，常莹，周秀敏【摘要】 目的 构建并鉴定针对遗传印记基因PEG10的siRNA真核表达载体。方法 根据PEG10基因cDNA序列，设计针对目的基因的4个siRNA靶序列，将其插入H1启动子下游，克隆到真核表达载体psiRNAhH1neo中，通过酶切鉴定和DNA测序鉴定。结果 酶切鉴定及DNA测序结果显示插入片断正确。结论 本研究成功构建针对PEG10的真核表达载体，可能成为肝癌基因治疗中的一种新型、高效的治疗载体。 【关键词】 遗传印记基因；PEG10；siRNA；真核表达载体；鉴定原发性肝。</p><p>16、鼠骨骺增殖区细胞的分离鉴定和克隆构建PTHrp基因真核表达载体作者 黄仕龙陈安民郭风劲张衣北【关键词】 殖区软骨细胞,摘要：目的分离、鉴定大鼠骨骺生长板增殖区软骨细胞，克隆甲状旁腺激素相关蛋白（PTHrp）基因并构建真核表达载体pEGFPIRES2PTHrp。方法Percoll不连续密度梯度离心法分离生长板增殖区软骨细胞，用X型胶原抗体和电镜鉴定，提取总RNA，RTPCR方法获得PTHrp基因的全长cDNA，插入pCR21 TA克隆载体中进行序列测定，测序正确后将其亚克隆至表达载体pEGFPIRES2。结果分离出增殖区软骨细胞，经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测。</p>