尿酮体尿胆红素尿胆原尿血红蛋白尿肌红蛋白乳糜尿定性检查

,邱群凤,尿液检验,2016Mar.,龙岩市第一医院,1.尿酮体检查 2.尿胆红素检查 3.尿胆原检查 4.尿血红蛋白检查5.尿肌红蛋白检查 6.乳糜尿检查,1,当机体能量代谢发生障碍，脂肪分解代谢增加，血中酮体升高，过多的酮体从尿中排出，称为酮尿。,实验一 尿酮体改良rothera法定性检查,(罗瑟拉),2,实验一 尿酮体改良rothera法定性检查,【原理】本法对 乙酰乙酸 灵敏度为80mg/L 丙酮 灵敏度为 1000mg/L,亚硝基铁氰化钠法(改良rothera法),3,【操作】（详见实验课本 P96 ） 1加酮体粉 : 1小勺 2滴加尿液 : 23滴,没过酮体粉为宜 3观察结果 : 如下规则,4,【干扰因素】,5,【注意事项】1.试剂配制要准确,易受潮,应密闭、干燥保存；2.乙酰乙酸不稳定,丙酮易挥发,使用新鲜尿液；3.控制反应温度,实验室温度过低时在30水浴箱中完成；4.存在大量非结晶尿酸盐时，可能出现橙色反应影响结果判断，离心除去。,6,实验二 尿胆红素Harrison法定性检查,胆红素+氯化钡沉淀+三价铁胆青素/胆绿素/胆黄素 (蓝绿色/绿色或黄绿色),酸性条件,【原理】,(哈里森),7,【操作】（详见实验课本 P97 ） 1.加尿液: 加尿液5ml2.吸附胆红素: 加2.5ml氯化钡溶液于尿中混匀离心35min弃上清液3.加试剂: 向沉淀表面加Fouchet试剂2滴放置片刻,观察沉淀表面颜色变化4.判断结果,8,【结果判断】,9,【干扰因素】,10,【注意事项】1. 使用新鲜尿液,避光收集,碱性尿液先酸化;2. 保证硫酸根离子充足,确保能产生沉淀;3. 严格控制加入Fouchet试剂量;4. 注意可能影响结果药物的因素;5. 改实验法优点:灵敏度较高,0.9umpl/L,11,实验三 尿胆原改良Ehrlich法定性检查,【原理】,尿胆原+对二甲氨基苯甲醛樱红色化合物,简单快速，分析仪，定性或定量； 不同试带灵敏度不同（1-4mg/L）。偶氮反应试带不受胆红素影响，对尿胆原特异。,方法学评价,(埃利希),酸性条件,12,【操作】（详见实验课本 P99 ） 1.加入氯化钡除去胆红素: 尿液与Bacl2比例为 4:12.加尿液:加尿液shang qing ye 2ml3.加试剂:加Ehrlich试剂0.2ml,室温下静置10min4.观察结果:在白色衬纸下,从管口向管底观察颜色变化5.稀释阳性标本并重复操作 ( P99 ),13,【结果判断】,14,【干扰因素】 Ehrlich醛反应,15,【注意事项】1尿液标本避光收集2. 尿胆原与饮水量,排尿时间,pH的关系3. 控制试剂与标本比例4. 注意实验温度5. 尿液标本中含有影响结果的物质6. 稀释阳性标本时不高于1:1607. Ehrlich试剂与尿液的比例应控制在10:1,16,实验四 尿血红蛋白邻联甲苯胺法定性检查,尿液中Hb来源： 血管内溶血 尿路出血,正常人血浆中游离Hb微量(50mg/L),与结合珠蛋白形成Hb-Hp复合物，在单核-巨噬细胞系统代谢，故尿中Hb极微。定性：阴性,验证尿液潜在出血的试验: 隐血试验(occult blood test),17,【原理】,（色素原）,18,【操作】（详见实验课本 P101 ） 1.滴加尿液：先滴1滴在滤纸上2.烘干滤纸：烘干后痕迹处继续滴1滴尿液,反复34次3.加试剂:邻联甲苯胺冰醋酸溶液23滴,再滴3%过氧化氢 23滴4.观察结果:立即观察颜色变化,19,【结果判断】,20,【注意事项】1.器材合格: 滤纸质量优良,试验用具无血迹或脓液2.标本新鲜: 可先煮沸,以破坏白细胞中的过氧化氢酶及其他易热性触酶3. 烘干滤纸: 应少量多次并保证标本量足够4.保证试剂有效5.控制试剂剂量,21,实验五 尿肌红蛋白邻联甲苯胺法定性检查,【原理】肌红蛋白和血红蛋白一样，分子中含血红素基因，具有类过氧化物酶活性能用联苯胺和邻联甲苯胺与过氧化氢反应检出肌红蛋白能溶于80%饱和度的硫酸铵溶液中而血红蛋白则不能，因而可鉴别,22,【操作】（详见实验课本 P102 ） 1. 以磺基水杨酸定性尿蛋白2. 以邻联甲苯胺法定性血红蛋白3. 加尿液,加入硫酸铵沉淀血红蛋白4. 再次定性血红蛋白5. 判断结果,23,【注意事项】1. 标本新鲜2. 加入硫酸铵应缓慢,防局部温度过高,将肌红蛋白一并沉淀3. 可用NaOH调节pH至7.07.5,24,实验六 乳糜尿定性检查,【原理】乳糜由脂肪微粒组成,可溶于乙醚,较大脂粒可通过脂溶性染料苏丹3着色识别,而脂肪被萃取而使尿液由乳浊变澄清.为乳糜定性试验阳性,25,【操作】（详见实验课本 P104 ） 1. 溶解脂肪2. 静置离心3. 隔水蒸干4. 制片染色