【精品】除菌过滤验证

,Life Sciences,除菌过滤验证,颇尔生命科学技术研究中心Filtration. Separation. Solution. SM, Pall Corporation 2005,内容大纲过滤验证报告概论除菌过滤器验证历史产品信息表验证策略与验证实验最恶劣条件选择, Pall Corporation 2005,过滤器验证三阶段 核心验证 持续验证 工艺特定验证, Pall Corporation 2005,核心验证 细菌截留试验 :,标准微生物标准试验程序, 与完整性检测关联 生物安全试验 溶出物分析 公布的验证指南, Pall Corporation 2005,举例： Pall 过滤器验证指南 由 Pall 公司进行验证并提供数据 标准条件 (ASTM F838-05) 下细菌挑战数据 符合 1987 年 FDA 无菌工艺指南 “ 除菌级 ” 定义 参考润湿流体（水或醇）前进流完整性数据和细菌挑战结果关联 标准溶媒（常为水或醇）中滤芯溶出物数据 生物安全性数据（美国药典）, Pall Corporation 2005,持续验证 对每批产品样品过滤器进行细菌截留试验 确认完整性检测与细菌去除效率持续有效性, Pall Corporation 2005,持续验证, QC 测试 滤出物样品实验 :,TOC,颗粒物,pH,内毒素,蒸汽耐受细菌截留, 每支滤芯测试完整性, P 级证书, Pall Corporation 2005,工艺特定验证 流体差异 工艺差异条件通常与核心验证时不同,现正被法规监管所强调, Pall Corporation 2005,过滤器验证报告, Pall Corporation 2005,过滤器验证报告内容, 细菌存活性, 确定物料杀菌特性, 确定合理的清洗方案, 细菌截留性, 确认最恶劣工艺条件下滤膜除菌能力, 化学兼容性, 确认最恶劣工艺条件下过滤器与物料接,触后的完整性, Pall Corporation 2005,过滤器验证报告内容 溶出物 对过滤器在模型溶媒中溶出物进行定性、定量测定 吸附效应 特定产品的滤出液中产品定性、定量测定 产品润湿完整性数据 建立产品润湿的完整性检测参数, Pall Corporation 2005,生物安全性基础研究,细菌截留 / FF 实验关联生物相容性USP 生物反应性,除菌过滤器的验证基于工艺流体参数的用户特定验证物理指标溶出物研究,验证指南中公布的核心验证数据Drug/Biologics MasterFile (DMF/BMF) at FDA, Pall Corporation 2005,除菌过滤工艺验证的发展简史, Pall Corporation 2005,除菌过滤发展历史, 60 年代以前 制药领域采用过滤器 “ 冷除菌 ” ，但无,法进行完整性检测, Seitz 过滤器（石棉组分）、烧结陶瓷等, 60 年代 0.45m 过滤精度的 “ 除菌 ” 滤膜, 对 圆 盘 滤 膜 进 行 “ 泡 点 ” 完 整 性 检 测, 1967 - FDA 报告微生物穿透 0.45 m 滤膜 *, 用 10 7 CFU /cm 2 (Pseudomonas diminuta) 挑战 可被 0.22 (0.2) m 精度滤膜完全拦截 推荐 0.22 (0.2) m 为 “ 除菌级 ” 过滤精度,* Bowman, F., M.P. Calhoun and M. White, “Microbiological methods for quality control of,membrane filters”, J. Pharm. Sci ., 55, 818 (1967), Pall Corporation 2005,除菌过滤发展历史, 1970-80 过滤器制造商进一步发展了 0.2 m 细菌拦截,数据和完整性检测数据, P. diminuta （假单胞菌） 挑战工艺过滤器, 用完整性数据和细菌拦截参数区分 0.2 m 和 0.45 m Forward Flow ( 前进流 ) 完整性检测得到发展，用于,检测大面积过滤器（如滤芯） 1, Pressure Hold ( 压力保持 / 衰减 ) 检测应用到除菌 / 使,用前 完整性检测, 过滤器验证指南首次 发布 ,1. D. B. Pall, “Quality Control of Absolute Bacteria Removal Filters,” Bull. Parenteral Drug,Assoc., 29, 392-204 (1975).,2. Pall Corp ., “Validation Guide for Pall 0.2 micron Ultipor N66 and N66 Posidyne,Membrane Cartridges,” (1980),* G. Howard and R. Duberstein. “A case of penetration of 0.2 m rated membrane filters bybacteria.” Journal of the Parenteral Drug Association .,34: p95 (1980) Pall Corporation 2005,除菌过滤发展历史 1979 FDA 公告警告去离子水中 0.2 m 过滤器发生微生物穿透现象，建议采用 0.1 m 1980 Pall 公司报告微生物穿透 0.2 m 过滤器 * 用含天然微生物的地下水（此基础上额外加入假单胞菌）对 10” 滤芯进行长期微生物负荷挑战,对假单胞菌 100% 拦截天然微生物在 16-24 hr 后发生穿透验证了全部 0.22 和 0.2 m 商业过滤器验证了 0.1 m 过滤器达到对微生物的完全拦截,除菌过滤发展历史 1982 HIMA drafts （药物技术协会） 提议标准微 生 物 挑 战 实 验 方 法 1983 ASTM issues （美国标准检测方法组织）发布微生物挑战标准实验方法 1987 FDA 发行无菌工艺指南，提出除菌过滤 ,1. HIMA (now AdvaMed), “Microbiological Evaluation of Filters for Sterilizing Liquids,” draftdoc. No.3 Vol. 4, April, 1982 (obsolete)2. ASTM, “Standard Test Method for Determining Bacterial Retention of Membrane FiltersUtilized for Liquid Filtration” Standard No. F838-83 (1983, No. F838-05, rev. 2005)3. FDA Guideline on Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing, 1987 Pall Corporation 2005, Pall Corporation 2005,除菌过滤发展历史, 1994 FDA 发行指南文件 *, “ 凡过滤工艺，包括预过滤器、除菌过滤器等，需进,行 描 述 。 ”, “ 必须提交验证报告，包含过滤器细菌挑战数据、化,学 兼 容 性 数 据 ”, “ 产品过滤分装点的过滤器对产品的影响，需进行描,述 ( 例如 , 吸附活性组分、释放溶出物等 ).”,* FDA Guidance for Industry for the Submission Documentation for Sterilization ProcessValidation in Applications for Human and Veterinary Drug Products ( IV.B.1. Drug ProductSolution Filtration) , 1994,除菌过滤发展历史 1995 FDA 人用药物 CGMP 通告 * “ 除 菌 过 滤 工 艺 需 要 特 别 严 格 的 验 证 。 ”,“ 确保在最恶劣状态下，工艺参数得到充分研究、 评 估 、 记 录 。 ”“ 在 药 物 开 发 阶 段 到 上 市 药 物 的 生 产 阶 段 ， 除 菌 过滤工艺的这些相关数据都必须提供。 ”,* FDA Human Drug CGMP Notes, Dec. 1995 Pall Corporation 2005, Pall Corporation 2005,除菌过滤发展历史, 1995 FDA CDER 发布 “Perspective” ( 续 ),核心问题 : *, 灌装线的生产时间有多长？ 药液是否适合微生物生长？, 药液是否改变了滤膜的拦截性能？, 药液是否改变了微生物大小，或其它物理特性，,例如变形，进而可能影响过滤效果？,* FDA CDER Perspective on Isolator Technology, ISPE Barrier Technology Conference,Dec. 1995, Pall Corporation 2005,除菌过滤发展历史, 1998 PDA 发行除菌过滤验证技术报告,（ Technical Report No. 26 ） , 1998-2003 FDA 内部稿 , 2002 议案 ,2003 指南草稿, 2004 FDA 发行无菌工艺指南修正版 ,1. PDA Technical Report No. 26, “Sterilizing Filtration of Liquids,” PDA Journal ofPharmaceutical Science and Technology , v.52, no. S1 (supplement), March, 19982. FDA Guidance for Industry - Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing Current Good Manufacturing Practice (Section IX. Validation of Aseptic Processing andSterilization), 2004, Pall Corporation 2005,除菌级过滤器定义,1987 无菌工艺指南 , “ 通过 10 7 /cm 2 缺陷假单胞菌（ P. diminuta ）挑战,的过滤器 ”,2004 无菌工艺指南 , “ 适 当 验 证 的 过 滤 器 ， 能 从 流 体 中 滤 除 全 部 微 生 物 ”,1. FDA Guideline on Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing, 19872. FDA Guidance for Industry - Sterile Drug Products Produced by Aseptic,Processing Current Good Manufacturing Practice, 2004, Pall Corporation 2005,参数验证目标, 检测流体对过滤器、 B. diminuta 假单胞菌,以及对微生物特性潜在的影响, 细菌存活性和截留性检测 化学兼容性检测, 检测过滤器对产品组分的影响, 溶出物检测, 组分吸附检测, 完整性检测, Pall Corporation 2005,参数验证策略产品特性工艺参数科学原理最恶劣条件尽可能采用真实物料, Pall Corporation 2005,产品信息表P roduct In formation S heet(PINS), Pall Corporation 2005,产品信息表 反映客户物料和工艺情况 对验证至关重要的信息 用 于 建 立 流 体 / 工 艺 个 性 化 实 验 方 案 确保料液正确处理 确保料液检测参数具有代表性, Pall Corporation 2005,产品信息表 客户信息 名称、地址、联系人等 确保客户与 Pall 公司间建立良好沟通 检测要求 客户提出检测要求 Pall 公司与客户讨论后，提供建议, Pall Corporation 2005,产品信息表 报告形式 由客户决定报告形式 独立成份的报告。包括产品信息表PINS 、 验证方案和验证报告 装订成册的报告。验证方案、验证结果和 PINS 合订 特殊形式的报告（例如，额外的副本）, Pall Corporation 2005,产品信息表 料液信息 料液名称（客户决定。该名称被方案、报告引用） 料液名称必须和客户 SOP 等文件中的名称一致 相关信息，如批号等 该产品已知的其它命名, Pall Corporation 2005,产品信息表 料液组分 各 组 分 ， 包 括 溶 媒 的 确 切 百 分 含 量 （ % ） 用于进行溶出物检测时确定模型溶剂 用于预判对验证实验的影响，如： 对细菌特性的影响 化学兼容性问题, Pall Corporation 2005,产品信息表 料液危险性, 明确料液是否有毒性, 隔离操作, 是否有特殊操作要求, 例如：光敏、热敏等, 客户提供料液危险等级, 易燃、有毒、反应等, 存放条件, 稳定、时间、光照等, 处理方法, 实验完毕，安全处理料液的特殊要求, Pall Corporation 2005,产品信息表 料液参数 pH, 离子强度 , 黏度 , 等渗容摩 , 表面张力 料液呈液态的温度范围 客户提供的物料形式 确定是否需要为客户进行物料配制 设计正确实验参数所需要的相关信息 料液参数和工艺温度交互确定预期检测指标, Pall Corporation 2005,产品信息表, 工艺信息 (1), 待验证的过滤器及其使用数量 批量 滤速 温度, 过滤压差,待续 -, Pall Corporation 2005,产品信息表 工艺信息 (2) 流体与过滤器的接触时间 包括工艺间歇时间和任何工艺中止时间 过滤器灭菌条件 蒸 汽 柜 灭 菌 、 在 线 灭 菌 , 射 线 灭 菌 , 等 。 一套过滤设备最大处理批次 如果 1 批，需要提交批间过滤器处理规程, Pall Corporation 2005,产品信息表 产品润湿完整性参数 在需要产品润湿完整性检测数据时使用 客户选择检测方法 前进流（ Forward Flow ） 泡点（ Bubble Point ） 压力衰减（ Pressure Decay ） 客户选择检测气体 空气 氮气, Pall Corporation 2005,产品信息表 收到完整的 PINS 之后 Pall 验证中心与客户核实 PINS 信息 确保全部参数为极限值 工艺信息用于计算 “scaled-down ” 参数（缩小设计） 模拟极限工艺条件 每个实验均为客户专门设计实验方案, Pall Corporation 2005,验证实验,细菌存活性与细菌挑战,“ 用于挑战的微生物必须足够小，以挑战过滤器的微孔，并能模拟实际生产中可能存在的最小微生物。 ” *,* FDA Guideline on Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing, 1987 Pall Corporation 2005,微生物挑战,微生物挑战“ Brevundimonas diminuta (ATCC 19146) 缺陷假单胞菌在恰当的培养、生长和使用条件下，可以作为挑战 0.2 m 精度过滤器的指示菌，因为它的平均直径为 0.3 m 。 ” *,* FDA Guidance for Industry - Sterile Drug Products Produced byAseptic Processing Current Good Manufacturing Practice, 2004 Pall Corporation 2005, Pall Corporation 2005,细菌挑战试验考虑的关键因素 :, Pall Corporation 2005,存活性试验 必 须 在 细 菌 挑 战 试 验 前 进 行 , 其 结 果 决 定 细菌挑战采用的方式 应 用 实 际 产 品 , 全 工 艺 时 间 存活的定义为活细胞浓度降低小于 90%., Pall Corporation 2005,细菌存活性 测试菌液 (10 6 CFU/mL) 接种到客户料液和空白对照液（如灭菌去离子水） 监控细菌浓度，控制接触时间长于工艺时间 将料液和工艺定性为杀菌、中度杀菌、或非杀菌, Pall Corporation 2005,分类定义的标准 非杀菌（ Non-bactericidal ） 与料液接触工艺时间后，细菌 logTr 1 （死亡率 90% ） 中度杀菌（ Moderately Bactericidal ） 与料液接触 60min 内，细菌 logTr 1 （死亡率 90% ） 有可能允许直接在料液中进行细菌挑战实验, Pall Corporation 2005,料液循环过滤工艺时间清洗过滤器用接种细菌的替代溶液挑战,非杀菌,细菌拦截实验选型表料液类型中度杀菌,杀菌, Pall Corporation 2005,微生物挑战 杀菌流体,“ 该情况下，模型流体必须和料液尽可能类似，例如黏度、物理特性等，不得对细菌挑战实验产生不良影响 ”*,* FDA Guideline on Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing, 1987, Pall Corporation 2005,用于细菌拦截实验的流体特性 尽可能采用 产品料液 如不能直接用产品料液，则用 替代流体 类似的化学特性 不含活性成分, Pall Corporation 2005,3 实验膜片- 全部裁剪自滤芯生产用滤膜- 其中至少一个为低限规格产品 ( 亦即 “ 最恶劣条件 ”)1 对照膜片 (0.45m)- 确认试验微生物能够穿透 0.45 微米过滤器- 确认穿透的试验菌能全部回收,细菌截留试验 : 典型实验装置完整系统组成, Pall Corporation 2005,细菌截留试验 : 典型实验装置,测试过滤器,分析过滤器,挑战容器,蠕动泵,排气阀,压力表,排放,细菌挑战试验,测试过滤器,分析过滤器,产品容器,接种容器 Pall Corporation 2005, Pall Corporation 2005,细菌挑战试验,接种后的挑战溶液循环, Pall Corporation 2005,细菌挑战试验 生 存 性 试 验 : 约 200 ml 产品样品 产品安全信息表 全部产品工艺细节 截留试验 : 约 1L 产品样品 产品安全信息表 全部产品工艺细节, Pall Corporation 2005,细菌生存性及挑战试验 用户 提 供 全 部 产 品 样 品 ( 及 可 能 的 类 似 物 ) 提 供 产 品 及 工 艺 细 节 信 息 . 颇尔 提供全部实验用过滤器及设备 进行全部生存性及截留实验 提供全部试验方案和报告, Pall Corporation 2005,除菌级过滤器细菌拦截实验的标准, Brevundimonas diminuta (ATCC 19146) 缺陷假单,胞菌，或其它代表 “ 最恶劣 ” 状况的微生物种群 严格控制的培养条件 ( 美国实验材料协会 ASTM,F838-05 规范 ), 最小微生物尺寸 ( B. diminuta 0.3 x 0.8 m) 微生物个体独立分散, 证明可穿透 0.45 m 对照过滤器 模拟 “ 最恶劣 ” 工艺条件 挑战量 1 x 10 7 cfu/cm 2, 对滤液进行全流体无菌检测, Pall Corporation 2005,验证实验,化学兼容性, Pall Corporation 2005,化学兼容性检测 确认过滤器与客户工艺流体化学兼容性 过滤器与工艺流体在设定条件下接触特定时间 通过接触前、后过滤器完整性检测结果判断化学兼容性, Pall Corporation 2005,“ 当 考 虑 化 学 兼 容 性 时 ， 重 要 的 是 应 包 含 过 滤 器 的全部组成 .”“ 完 整 性 检 测 是 和 细 菌 挑 战 试 验 关 联 的 物 理 测 试 方法 ， 是 一 种 兼 容 性 测 试 的 方 法 ”PDA Technical Report No. 26,化学兼容性, Pall Corporation 2005, 数据库信息 类似工艺条件的实验室研究处理前后的完整性测试外观检查,化学兼容性, Pall Corporation 2005,化学兼容性 数 据 库 查 询 : 产品全部组成 及每种成分浓度 全部工艺信息细节 实验 : 提供约 1L 产品样品 产品安全信息 全部工艺信息细节, Pall Corporation 2005, 用户 提供产品样品、生物安全性及工艺信息 颇尔 查询并提供数据库中相关书面信息报告或 提 供 实 验 方 案 ， 过 滤 器 并 进 行 试 验 , 提 交最终报告,化学兼容性, Pall Corporation 2005,验证实验,溶出物检测, Pall Corporation 2005,“ 他 们 （ 制 药 商 ） 必 须 有 数 据 显 示 溶 出 物 的种类、数量和毒性 ”Motisse (FDA) Human Drug CGMP Notes, 1994,溶出物检测, Pall Corporation 2005,溶出物检测, Pall Corporation 2005,溶剂转至旋转蒸发器,预称重的坩埚,滤芯在抽提溶剂中往复运动,溶出物检测, Pall Corporation 2005,数量,定性,溶出物检测, Pall Corporation 2005, 溶出物的来源 :, 硬件、支撑层、滤膜、润湿剂、添加剂等。, 对过滤器溶出物进行定量、定性分析, 不挥发物残留 (NVR) 定量检测, 紫外可见光谱 UV-Vis 、红外光谱 FTIR 、气质,联用 GC/MS 等方法定性检测, 依据工艺流体特性选择模型溶剂 *, 检测条件反映工艺温度和时间,* Weitzmann, C ., “ The use of model solvents for evaluating extractables from filters usedto process pharmaceutical products,” Pharmaceutical Technology , 21 (#4), 72-99 (1997),溶出物检测, Pall Corporation 2005,“ 当产品组成使得无法使用标准分析方法时 ,一种合适的模型溶剂可以用于衡量溶出物水平 ”PDA Technical Report 26,溶出物检测,Ref: Pall 0.2 m Fluorodyne II Membrane Validation Guide,USTR 1548 Pall Corporation 2005,溶出物检测： 公布的验证研究典型的不挥发残留物：高压锅灭菌后的 Fluorodyne II 滤芯 :, Pall Corporation 2005,过滤器 NVR 只有背景数值的 0.01%过滤器溶出物将无法在产品溶液中测定,溶出物检测： NVR 测定时药物产品的干扰, Pall Corporation 2005,溶出物检测：要求 产品全部组成 及每种成分浓度 产品 pH 范围 过滤器灭菌条件 工艺参数如温度和时间, Pall Corporation 2005, 用户, 提 供 产 品 和 工 艺 信 息 细 节 ., 颇尔, 模型溶剂评估, 提供模型溶剂、实验过滤器和设备 进行全部实验 (NVR / FTIR) 提供全部试验方案和报告,溶出物检测：责任, Pall Corporation 2005,验证实验,吸附, Pall Corporation 2005,吸附作用评估“ 应 考 察 吸 附 是 否 是 个 问 题 ; 如 果 是 ， 就必 须 阐 明 ”PDA Technical Report No. 26“ 过 滤 器 不 应 影 响 产 品 如 去 除 产 品 组 分 或 释出 物 质 ”European GMP guidelines,吸附作用评估,滤出液样品,实验过滤器,产品容器 Pall Corporation 2005,泵,滤出液样品,产品容器 Pall Corporation 2005,吸附作用评估实验过滤器泵, Pall Corporation 2005,吸附作用评估,滤出体积,浓度100%, Pall Corporation 2005,吸附作用：实验要求 四种方式可用 : 用户自行试验，需要时颇尔可给建议 颇尔在用户现场进行试验，留样在用户现场分析 颇尔在颇尔实验室进行试验，送样至用户现场分析 颇尔在颇尔实验室进行试验，并完成样品分析, Pall Corporation 2005,吸附作用：责任 用户 提供产品样品、产品安全信息、产品及工艺信息细节 ( 选项 2,3,4) 分析样品 ( 选项 1, 2, 3) 颇尔 提供实验用过滤器、设备、取样 ( 选项 2,3,4) 分析滤出样品 ( 只在选项 4) 提供全部试验方案和报告, Pall Corporation 2005,验证实验,产品润湿完整性检测,压力表,Bubbles,气源,调压阀过滤器 泡点 Bubble Point 前进流 Forward Flow 压力衰减 Pressure Hold Pall Corporation 2005,产品润湿完整性检测数据三类完整性检测方法的原理类似，基于特定压力条件下气体穿透润湿,滤膜的物理现象, Pall Corporation 2005,产品润湿完整性检测数据 确定用客户产品润湿过滤器时恰当的完整性参数 完整性检测方法包括： 前进流、泡点、压力衰减 产品润湿完整性数据与标准流体润湿完整性数据进行关联 标准流体润湿的完整性数据与细菌挑战数据关联（参见验证指南 ） 产品润湿完整性数据源自实验检测值，不是理论计算值, Pall Corporation 2005,产品润湿完整性检测数据生成 水润湿实验的缺点 使用前的试验稀释产品 使 用 前 - 试 验 后 水 的 去 除 验 证 使 用 后 - 试 验 时 产 品 的 去 除 验 证 时间, Pall Corporation 2005,产品润湿完整性检测数据生成 对大多数用户产品可行 使用产品润湿的数据可使生产简单 法规对使用参数的评价要求 法规要求灭菌后使用前的试验 文件和测试要求已经变得更加复杂, Pall Corporation 2005,产品润湿完整性检测数据生成表 面 张 力 + 粘度水润湿水润湿的 K L 测试,干燥过滤器产品润湿,产 品 润 湿 的 K L 测 试结果分析计算报告, Pall Corporation 2005,过滤器验证要求小结,* FDA Guideline on Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing, 1987 Pall Corporation 2005,为验证实验选择最恶劣条件“ 工艺标准操作程序允许的工艺和环境的极限（上限、下限），较之理想状态而言，具有导致工艺或产品不合格的最高风险 ” *,为验证实验选择最恶劣条件,“ 过滤器验证必须采用最恶劣条件，例如最长过滤时间和最高过滤压力 ” *,* FDA Guidance for Industry - Sterile Drug Products Produced by AsepticProcessing Current Good Manufacturing Practice, 2004 Pall Corporation 2005, Pall Corporation 2005,选择最恶劣条件产品分类 参考 “1987 Aseptic Processing Guideline” （无菌工艺指南）对产品进行分类 “ 最 恶 劣 条 件 ” 的 调 整 必 须 科 学 地 进 行 通常，最高组分含量和最极端操作条件（最大流速、 最 大 压 差 、 极 端 温 度 等 ） 是 “ 最 恶 劣 条 件 ” 的 典 型代表, Pall Corporation 2005,选择最恶劣条件产品分类 考虑产品分类 产品组分 检测料液必须由包括活性组分在内的最高比例组分构成 产品组分浓缩 通常检测最高含量状况的组分 考虑活性和相关特性, Pall Corporation 2005,选择最恶劣条件产品分类, 离子强度, 改变滤膜、待检有机体表面电荷，可能产生吸附, 等渗容摩, 较高渗透压可能导致微生物收缩, pH, 改变滤膜、待检有机物表面电荷，可能产生吸附 影响细菌存活性 检测极端 pH, Pall Corporation 2005,选择最恶劣条件产品分类 黏度 高 黏 度 流 体 通 常 伴 随 更 高 压 力 / 或 升 温 过 滤 工 艺 表面张力（包含表面活性剂） 表面活性剂（ 0.5% ）能降低吸附作用 养分 低养分环境可能导致细菌细胞尺寸变小，并改变细胞表面特性, Pall Corporation 2005,为细菌存活性检测选择最恶劣条件 采用真实产品 存活性检测时间涵盖产品与过滤器接触时间 最高检测温度 ( 37 o C) 如工艺温度 37 o C, 采用 “ 中度杀菌 ” 流程 在工艺温度下循环过滤产品至最长工艺接触时间，然后在产品中添加细菌，在 37 o C 条件下进行细菌截留检测, Pall Corporation 2005, 通量 / cm 2 挑战时间 温度 过滤系统的过滤批量 过滤器灭菌条件,每个检测均采用最极端参数,为细菌挑战检测选择最恶劣条件 (1) 极端操作参数 流速 压差, Pall Corporation 2005,为细菌挑战检测选择最恶劣条件 (2) 流速压差互相作用 验证达到或超过工艺参数的最高流速和最高压