张玉梅《医学微生物学》微生物-呼吸道感染细菌

,Medical Microbiology 医 学 微 生 物 学,病原生物学教研室 乔媛媛 E-mail:qiaoyuanyuan_888163.com Office:实验楼A415 Tel:6913209,呼吸道感染细菌：经呼吸道传播、主要引起呼吸道器官或呼吸道以外器官病变的一类细菌。例如：结核分枝杆菌白喉棒状杆菌百日咳鲍特菌流感嗜血杆菌,呼吸道感染细菌,第18章 分枝杆菌属,Mycobacterium tuberculosis,分枝杆菌属的主要特点细长略弯曲的杆菌，有分枝生长趋势；细胞壁含大量的脂质；抗酸染色阳性，故又称抗酸杆菌(acid-fast bacilli)；分为结核分枝杆菌复合群、麻风分枝杆菌和非结核分枝杆菌三类。,结核病的病原菌 1882年德国细菌学家Koch发现 全球性卫生问题 是艾滋病高发区人群的首要死因,2015年主题：“你我共同参与,依法防控结核 ”。,Robert koch (1843-1910),第一节 结核分枝杆菌,（一）形态与染色,一、生物学性状,形态：细长微弯的杆菌，有时呈分枝状； 染色：抗酸染色阳性，染成红色； 结构：有荚膜,无芽胞、鞭毛； L 型：在用过异烟肼的结核患者的痰等标本中有时可看到Much颗粒,齐-尼抗酸染色法：,5%石炭酸复红染色（延长时间或加温）,3%盐酸酒精的脱色,美蓝复染,（二）培养特性,专性需氧菌 最适温度37最适PH值：6.5-6.8 生长缓慢 营养要求高：罗氏培养基,罗氏培养基2-4周,结核杆菌粟粒样菌落,结核杆菌菌落,（三）生化反应,不发酵糖类触酶阳性；热触酶阴性(区别结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌）与牛型分枝杆菌的区别:可合成烟酸和还原硝酸盐,（四）抵抗力,四怕,对乙醇敏感 对湿热敏感 对紫外线敏感 对抗痨药物敏感，但长期用药易出现耐药性,四不怕,耐干燥 耐酸（6% H2SO4) 或碱（4% NaOH)，30min仍有活力 对化学杀菌剂如结晶紫、孔雀绿有抵抗力 对青霉素等抗生素耐药,（五）变异性,结核分枝杆菌可发生形态、菌落、毒力、免疫原性和耐药性等变异 卡介苗（BCG）毒力变异,二、致病性 （一）致病物质：主要是菌体成分 类脂：分枝菌酸（mycolic acid）索状因子（cord factor）磷脂（phosphatide）蜡质D（wax-D） 硫酸脑苷脂（sulfatide） 蛋白质多糖,索状因子,由分枝菌酸和海藻糖结合的一种糖脂 能使细菌在液体培养基中呈索状蜿蜒生长 能破坏细胞线粒体膜，影响细胞呼吸 抑制白细胞游走，引起慢性肉芽肿,肽糖脂和分枝菌酸的复合物 有佐剂作用，可激发机体产生迟发型超敏反应,蜡质D,刺激单核细胞增生，使巨噬细胞变成上皮样细胞 使病灶形成结核结节，干酪样坏死,磷脂, 抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的结合 使细菌能在吞噬细胞中长期存活,蛋白质 多种，主要成分是结核菌素 本身无毒性，有免疫原性，和蜡质D结合后能使机体发生迟发型超敏反应,硫酸脑苷脂,荚膜,能与吞噬细胞表面受体3结合，有助于粘附和入侵 荚膜中多种酶可降解宿主组织的大分子，供给营养 防止宿主有害物质进入结核菌,（二）所致疾病,所致疾病,原发感染,肺部感染,肺外感染,继发感染,原发感染 多发生于儿童 原发综合征（X线见哑铃型阴影） 转归： 纤维化、钙化 继发感染 多发生于成人，病灶常局限 易发生干酪样坏死和空洞形成，菌可随痰 排出，为开放性肺结核,1、肺部感染,2、肺外感染,免疫力低下患者 常见于脑、肾、骨、关节、生殖系统 肠结核、皮肤结核 少数形成全身粟粒性结核或播散性结核,三、免疫性与超敏反应,属胞内菌，其免疫主要是以T细胞为主的细胞免疫 结核的免疫属于感染免疫(infection immunity)，又称有菌免疫,（一）免疫性,（二）免疫与超敏反应,细胞免疫为主,同时存在迟发型超敏反应，均为T细胞介导 郭霍现象细胞免疫：分枝杆菌核糖体RNA引起超敏反应：由结核菌素和蜡质D引起,豚 鼠,初次感染有毒结核杆菌后,局部红肿溃疡，坏死，经久不愈,全身扩散,10-14d,（三）结核菌素试验,原理：是用结核菌素进行皮肤试验，测定机体对结核杆菌能否引起型超敏反应，反应机体对结核菌是否有免疫力。 结核菌素试剂 旧结核菌素（old tuberculin，OT) 纯蛋白衍化物(purified protein derivative，PPD) OT经三氯醋酸沉淀后的纯化物 人结核分枝杆菌制成的PPD-C 卡介苗制成的BCG-PPD 每0.1ml含5单位,方法 PPD-C、BCG-PPD各5个单位两前臂皮内注射 4872小时后观察红肿直径 结果 阳性：5mm；强阳性：15mm PPD-C侧红肿BCG-PPD侧为感染 反之，可能系卡介苗接种所致 阴性：5mm,结核菌素试验结果分析,阳性强阳性 阴性,应用,选择卡介苗接种对象和测定卡介苗接种后的免疫效果； 作为婴幼儿(尚未接种过卡介苗者)结核病的辅助诊断； 测定肿瘤患者的细胞免疫功能； 在未接种BCG的人群中调查结核病的流行情况，了解人群的自然感染率。,四、微生物学检查法,（一）标本的选择 （二）直接涂片镜检抗酸染色，初步诊断,（三）分离培养 罗氏培养基,（四）动物试验 （五）PCR用于早期、快速诊断,五、防治原则,卡介苗预防接种对象：新生儿和结核菌素试验阴性的儿童免疫时间：出生时,7岁,12岁 药物治疗一线药物:异烟肼、利福平、利福定、乙胺丁醇和链霉素二线药物:对氨水杨酸、吡嗪酰胺和环丝氨酸等早发现、早治疗、联合、彻底治愈,麻风分枝杆菌（M. leprae）,麻风病的病原菌 慢性传染病 世界各地均有报道 主要分布在亚、非和拉丁美洲,第19章 棒状杆菌属,一、 生物学性状,菌体细长微弯，一端或两端膨大呈棒状 革兰氏染色阳性 美蓝或Neisser染色，可出现着色深的异染颗粒，在鉴定时有重要意义 排列不规则，常呈V和L状或栅栏状 无鞭毛、无荚膜、无芽胞,1. 形态与染色,Albert染色,2. 培养特性,营养要求较高 吕氏培养基（含凝固血清）上生长迅速，异染颗粒明显 分离培养常用鉴别培养基：含0.03%0.04%亚碲酸钾的血平板,3、变异性,棒状噬菌体 白喉棒状杆菌 获得白喉毒素,白喉毒素：,二、致病性,1、致病物质,A亚单位（毒性部位）：蛋白质合成受阻 B亚单位：有结合和转位功能,作用靶位：特别是心肌和神经细胞,2. 所致疾病 白喉,传染源：患者及带菌者 致病过程：,白喉杆菌 鼻咽粘膜繁殖 炎症 假膜,白喉毒素 扩展到气管等,毒血症 此时假膜易脱落阻塞呼吸道,心肌炎、软腭麻痹、周围神经炎、肾上腺功能障碍,晚期致死原因,与组织紧密粘连,早期致死原因,白喉假膜,三、免疫性,抗毒素免疫感染后机体可获得牢固的免疫力锡克试验(Schick test),四、微生物学检查法（了解）,五、 防治原则,预防 人工主动免疫：白喉类毒素白百破三联疫苗 人工被动免疫：注射白喉抗毒素紧急预防 治疗 白喉抗毒素-皮试、早期、足量 抗生素（青霉素、红霉素）,本章小结,掌握内容 结核分枝杆菌主要生物学性状；致病物质