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实验四 微生物菌落的观察 目的要求实验原理实验材料实验程序结果与思考题目 的 要 求l 学会观察、识别各种不同的微生物菌落的方法。 l 掌握平板菌落计数的方法，运用所学的知识详细的描述所分离平板上的各种微生物菌落。l 学习并掌握斜面接种的操作技术。 实 验 原 理对于一些难区别的菌落还应该借助显微镜来观察其细胞形态以进一步做出正确的判断。实 验 材 料l 实验三所作的平板培养物：A，在 细菌 培养基上生长的各种菌落； B，在 霉菌 培养基上生长的各种菌落。l 实验二所作的 试管斜面 ，酒精灯、接种环等。l 菌种：大肠杆菌 E.coli枯草杆菌 B.subtilis枯草杆菌 B.subtilis实 验 程 序 （观察描述菌落特征）l 运用所掌握的各种微生物菌落的特点，观察、识别、描述所做样品的两个平板上的所有菌落 ,并将结果填入 表 1中。常用的菌落描述词语：大小： 大、中、小、针尖状形状 ： 圆形、隆起、扁平、假根状、不规则状等；边缘情况 ： 整齐、波形、裂叶状、锯齿状等表面情况 ： 干燥、湿润、光滑、皱褶、颗粒状、龟裂状等 ；样 品来源培养基类 型菌落类 型 特征描述菌落数（近似 值）大小 形状 颜 色 表面情况 边缘 情况a A 1A 2B 3B 4b A 1A 2B 3B 4表 1 平板菌落特征描述某些有代表性的菌落图片：细菌酵母菌啤酒酵母菌落 一般较细菌菌落大且厚，表面湿润，粘稠，易被挑起，多为乳白色、土黄色，少数呈红色。 l 常见的酵母菌的菌落菌落形态较大，质地一般比放线菌疏松，外观干燥，不透明，呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状；菌落与培养基的连接紧密，不易挑取，菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色常不一致等 。霉菌霉菌的菌落青霉属 毛霉属 l 定义 :根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征而设计的计数方法，即 一个菌落代表一个单细胞 。统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。 l 对土壤中的微生物进行计数 ,将结果填入表 2中。实 验 程 序 （平板菌落计数）表 2 土壤中微生物计数结果 稀 释度10-5 10-6 1g样 品活菌数1 2 平均 1 2 平均细 菌菌落数霉菌菌落数计数方法 : 每克土壤的菌数 =同一 稀释度 几次重复的菌落平均数 10稀释倍数 计算结果时，常按下列标准从接种后的 3个稀释度中选择一个合适的稀释度，求出每克菌剂中的含菌数。（ 1）同一稀释度各个重复的菌数相差不太悬殊。（ 2）细菌、放线菌、酵母菌以每皿 30300 个菌落为宜，霉菌以每皿 10100 个菌落为宜。选择好计数的稀释度后，即可统计在平板上长出的菌落数，统计结果按下式计算。实 验 程 序 （无菌操作技术 ）在酒精灯火焰旁操作，将所给的两种菌种无菌操作，转接到大试管斜面，并贴标签，培养。点燃酒精灯左手夹住两试管：斜面向上， 45 0度角。灼烧接种环右手拔棉塞，管口
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