ⅱ型糖尿病与血浆硒蛋白浓度——一个试验性研究

逻辑回归分析 基于硒蛋白浓度的逻辑回归模型被做了进一步发展，从而加深了糖尿病组合健康组之间的对比。通过 GPx，SelP 和 SeAlb 浓度与结果的结合，我们进行了不同的输入集的检测以期得到更深一步更深的效果（表格 3） 。糖尿病患者组和健康对照组对比过程中，GPx，SelP 和 SeAlb 水平先是被单个检测然后经过组合再被检测。只有 GPx（OR 3.61；CL 1.50-8.71）和 SeAlb（OR 14.33；CL 2.78-73.92）是有意义的(t 检测，P61 的 HDL0.70） ， 而第二因素中肌酸酐，GPx和 SeAlb 是重要变量。图表 2 显示了一个 scores plot(图表 2，A)和 loadings plot（图表2，B）,其中健康个体和型糖尿病患者被分开在 2 个不同的区域内。因为受测对象数目小，尤其是健康组（n=15） ，这一分析只能提供象征性的结果。但不管怎样它都描述了GPx，SeAlb 和型糖尿病诊断中很重要的临床参数间的关联。讨论搜集关于蛋白存在与缺失作为疾病的特殊生物标志以及该种蛋白在组织和体液的浓度和活性这些信息的重要性近年来表现出来了。当前在如此复杂的矩阵中低水平显示的蛋白质的定量是项很有挑战性的任务。过去几年里，为发展新的，准确的，精准并快速的蛋白质分析方法，人们已经做了大量的工作。但是，现在这些方法中很少有被应用到真正的生物医学研究中的。由于电感耦合等离子质谱仪是极低水平的金属专用的检测器，将其与高分辨率分离技术，例如亲和-高效液相色谱，相结合使用就会变成分析人类疾病中金属蛋白功能的有力工具。型糖尿病患者血浆硒蛋白的调查研究就是应用实例之一。其他的检测系统，比如说原子荧光光谱和原子吸收光谱可以用于生物样品中硒的定量。这两种方法都允许元素专一性，但是与液相分离技术比如高效液相色谱的复杂在线耦合使得专一性分析变得很困难。所以，这些方法还只是被用于型糖尿病患者血浆硒元素的总含量定量。作为一种选择，糖尿病患者血浆内 GPx 活性可通过酶联免疫吸附试验或者别的酶试验测定。问题是这些技术很难操作，耗时长又不够精准，而且 SeAlb 不能进行试验因为（从 Se 的角度讲）它没有酶活性。ICP-MS 易与 HPLC 偶联使用，专一性和灵敏度都比较高。这项研究中，偶联 HPLC-ICP-MS 系统首次应用到血浆硒蛋白和糖尿病关系这一跨学科研究中。这一方法在只要求过滤为样品预处理步骤的操作中融合了蛋白分离技术的高分辨率和高准确度灵敏度。GPx，SelP 和 SeAlb 可以在每 15 分钟进一次样的分析操作中同时被测定， 150 多次的注射进样都不会造成效率降低。研究发现和健康对象相比，型糖尿病患者的 GPx 和 SeAlb 水平显著异常。因为 SelP 在体内担任着 Se 载体的基础角色，而 SeAlb 是非活性蛋白，从饮食摄取的所有可用的 Se 优先被 SelP 吸收，随后被 GPx 吸收，被 SeAlb 吸收只是最后的一个选择。所以，在低 Se 摄入量或者高氧化性条件下，这三种 Se 蛋白理论上在 Se 吸收度上按等级排列。在这种变化了的情况下 SeAlb 和 GPx 是下降最敏感的蛋白质。型糖尿病患者表观显著低水平和低百分含量的 SeAlb 和 GPx 以及 SeAlb，FPG 和 HbAlc 间的关系似乎指示改变了的血浆硒蛋白状态反映了不正常的新陈代谢调控。因为血浆硒蛋白的水平会是氧化应激的一个潜力标志，这一假设与一些别的报道中氧化应激与血糖调控的关系相吻合。许多文献中这一关系还很有争议，可能是因为并不是所有被采用的氧化应激生物标志都通过直接与血糖调控相关的的途径进行生物合成。型糖尿病患者当中有很多体重超标或者肥胖因而可能会受抗胰岛素性影响。与 HDL61mg/dL 的患者相比 HDL30）患者血浆 GPx 水平的 K-S 测验没表现显著差别。最有可能的情况是，二者之间的可能有的生化关系相当弱，以致一个 t 测验不能揭示这一关系。这一点和我们分析过的几个例子有关。事实上在 t 测试中，我们得到了一个接近 0.05 的 P 值，虽然有点高，就像 Kornhauser 等人认为 114 个人会有一个接近 0.05 的 P 值，虽然略低一点。GPx和SeAlb水平同研究对象的年龄紧密相关。别的研究也发现了同样的关联，可能发现于老年人的低效率吸收或者Se代谢掉的增加。但是，我们这一研究中，血浆硒蛋白浓度在型糖尿病患者和健康人体内的差异并不受年龄和性别潜在的混淆作用影响。 需要着重说明的一点是Se的饮食摄入量对硒蛋白的分配，尤其是对SeAlb的分配更有混杂作用。无论如何，个体血浆硒蛋白和饮食摄入量之间的关系很难被确定，文献里也有争议。即使在我们这项研究中，饮食摄入的Se量也没被监控，所有被召的受测对象在接受分析之前接受了至少六个月的同样的饮食控制，而且都住在同样的非缺Se地区。因此，我们可以合理推断我们观察到的重大区别只是研究对像不同的健康状况的结果。关于Se对型糖尿病患者的抗胰岛素性的作用的数据现在还很少。从对动物进行的体内和体外的研究得出的实验性的证据显示Se可能会调节许多类胰岛素的反应从而提高胰岛素敏感性。但这一点在型糖尿病患者身上还未得到证实。Se执行其生理作用的生化机理现在仍不为人所知。我们这一研究中的符号模型的表现显示了与由总Se浓度给出的误导性的图片相比，血浆硒蛋白的状态更有作为型糖尿病综合生物标志的潜力。这项研究为Se在Se不足情况下的糖尿病中所可能起的作用提供了第一份证据。其中缺Se是一个必须条件，它使得研究结果与Se在糖尿病生化层面的真正行为更接近。研究局限性该研究主要的局限在于样本数目相对过小，尤其是对照组（40名患者，15名受控者） 。这一点影响了统计结果的置信区间，限制了我们对数据的理解这正好对详细阐述很重要。详细阐述又要求将受测对象再细分（即