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文档简介

医学微生物学实验二微生物学教研室： 3029130 科教科： 3029945实验内容1.实验一结果的观察和分析；2.细菌内毒素的检测技术；3.抗酸染色；4.实验考试。一、实验一结果的观察和分析空气中 细 菌 咽喉部 细 菌二、内毒素的检测技术（鲎试验）1.内毒素检测方法家兔发热法，鲎试验。2.鲎试验原理3.材料鲎试剂， 内毒素试剂， 鲎试剂专用溶解水， 无菌无热源质吸管内毒素（ LPS）激 活凝固蛋白原 凝固蛋白（溶解状态） （凝胶状态）凝固酶原 凝固酶4.方法步骤（每 4个人一组，两支鲎试剂，一支实验一支对照）（ 1）取两支鲎试剂打开，分别加入 0.1ml 鲎试剂溶解水，使之溶解。（ 2）其中一支加入 0.1ml内毒素，标记上实验组，另一支加入 0.1ml溶解水，作为对照。（ 3）垂直放入 37 温箱， 20-30min观察结果。5.结果及应用实验组出现凝固，对照组不出现凝固1.细菌： 卡介苗 （ BCG）。2.抗酸染液： 石炭酸复红液、 3%盐酸酒精、碱性美兰溶液。3.其它： 接种环、酒精灯、载玻片，玻片夹等。（三）实验材料（四）方法与步骤1.细菌涂片的制备涂片 干燥 固定 2.染色1）初染：用玻片夹夹持涂片标本，滴加 石炭酸复红 23 滴，在火焰高处（ 210cm）徐徐加热， 切勿沸腾 ， 出现蒸汽即暂时离开 ， 加热 35min，若染液蒸发减少，应再加染液，以免干涸， 待标本冷却后用水冲洗 。2）脱色： 3%盐酸酒精脱色 30s1min；用水冲洗。3）复染：用 碱性美兰溶液复染 1min；用水冲洗。4）玻片用吸水纸吸干，油镜观察。（五）实验结果未染色 初染后 脱色后 复染后初染 脱色 复染石炭酸复红盐酸酒精 碱性美兰红色为抗酸染色阳性； 蓝色为抗酸染色阴性。结核杆菌呈红色，常堆积成团，排列无序，偶呈分枝状生长；背景及非抗酸性细菌呈兰色。（六）注意事项1.无菌操作；2.染色要充分，掌握好时间；3.初染时加热勿使染液沸腾，干涸。实验报告1.内毒素的检测
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