绪论2012年下半年

绪 论一、组织学与胚胎学的 研究内容二、组织学与胚胎学的 发展简史三、组织学与胚胎学的 研究技术四、组织学与胚胎学的 常用术语五、组织学与胚胎学的 学习方法一 、 组织学与胚胎学的 研究内容组织学 （ histology）： 研究机体 微细结构及其相关功能的科学 。 胚胎学（ embryology）： 研究个体发生、生长、发育机制的科学。2、胚胎学研究内容：1、组织学研究内容：细胞上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织组织个体胚（ 28周）胎（ 938周）精子卵子 受精卵胚前 胚胎 胚后器官 系统 个体了解内容自学二 、 组织学与胚胎学的 发展简史三 、 组织学与胚胎学 研究技术问题 解决方法 观察对象太小 放大 显微镜观察对象无色，无反差 染色 （ HE染色 ）观察对象生化成分不同 细胞化学 、 免疫组织化学观察对象是活体 培养1、组织切片技术 F 石蜡切片石蜡切片 制作技术：取材和固定脱水和透明浸蜡和包埋切片和贴片染色与封固H&E staining Hematoxylin苏木精 :basic dye, purple-blue Eosin伊红 : acid dye, pink二甲苯 1二甲苯 2100%酒精100%酒精95%酒精95%酒精85%酒精75%酒精二甲苯 2二甲苯 1100%酒精100%酒精95%酒精95%酒精85%酒精75%酒精苏木精染色液盐酸酒精伊红染色液水洗水洗在 染色缸中Frozen section（ 冰冻切片） Better for preserving chemical components(e.g. enzymes) Freezing cryotome staining2、组织化学技术 （ 1）、一般组织化学）、一般组织化学 技术： PAS反应： 糖， 紫红色 油红 O： 脂滴， 红色 甲基绿焦宁： DNA， 蓝紫色RNA， 红色PSA反应：过碘酸雪夫氏反应 (periodic acid Schiff reaction)： 简称PAS反应 ， 是确定组织或细胞中有无多糖存在的一种方法 。 原理 ：多糖 PA氧化 醛 Schiff试剂(亚硫品红 )紫红色沉淀猫小肠 PAS染色示杯状细胞（复旦大学上海医学院组织胚胎学教研室供图）（ 2）、免疫细胞（组织）化学技术利用抗原 （ antigen, Ag）， 抗体 （ antibody） 特异结合的原理 ， 用已知抗体检测未知抗原的一种方法 。（辣根过氧化物酶）（过氧化物酶抗过氧化物酶复合法，简称 PAP法）(peroxidase-antiperoxidase complex method,PAP)（抗生物素（卵白素）生物素法，简称 ABC法）(avidin biotin complex method,ABC)(链霉亲和素生物素化酶复合法，简称 SABC法 )(strept avidin-biotin complex,SABC)链霉亲和素 ,即链霉素抗生物素蛋白 strept avidin， SA3、活体组织研究技术 组织培养（体外实验 in vitro） 活体染色 细胞电泳 细胞融合 细胞分离 低温生物学4、放射自显影术 亦称 “同位素示踪术 ” 是应用某种具有放射性的同位素标记物，注入动物体内或加入细胞的培养基中，该物质被细胞摄取后，将组织或细胞制成切片或涂片，并在暗室中将切片或涂片表面涂一层感光乳胶，这时细胞中的放射性同位素产生的射线就会慢慢地使乳胶感光，经显影、定影处理后，在显微镜下观察标记物的分布和数量情况，就会细胞对某种物质的吸收、合成、分泌和代谢过程。eg.用 3H标记的亮氨酸，注入动物体内， 3-5min在 RER出现， 20min在 G， 1-4h后聚集于酶原颗粒。5、细胞形态结构测量术 细胞形态计量术： 应用 “图像分析仪 ”计算细胞内各微细结构的体积、周长、表面积、数量及分布等数值。 流式细胞术： 应用 “流式细胞仪 ”对单个细胞生物化学和物理特征进行快速定量测定。 显微分光光度测量术： 应用 “显微分光光度计 ”对标本中微细结构的化学成分及其含量进行测定。6、显微镜技术 据光源不同分为：光学显微镜和电子显微镜光学显微镜 (LM) 电子显微镜 (EM)光源：放大倍数：分辨率：观察结构：光 电子流几十、上千倍 几万、几十万，上百万倍0.2um 0.2nm光镜结构 电镜结构（ 1）、光学显微镜一般光学显微镜 （生物显微镜）特殊光学显微镜 荧光显微镜 相差显微镜 暗视野显微镜 偏光显微镜 倒置显微镜 共聚焦激光扫描显微镜（ 2）、电子显微镜 透射电