血液分析仪及临床应用

第三节 血液分析仪及其临床应用血液分析仪及其临床应用 【 检测原理 】根据血细胞非传导性的性质，以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础，来进行血细胞计数和体积测定，这种方法也被称为库尔特原理 图 3-1 细胞计数电阻抗原理n 放大：细胞通过小孔时所产生的脉冲传导微弱，难以直接触发计数电路，必须经电子放大器把信号放大 n 阈值调节：在一定范围内调节参考电平大小，使计数结果更加符合实际 n 甄别：各种微粒通过微孔时均可产生讯号、讯号电平（脉冲幅度）与微粒子大小成正比，所为甄别就是根据阈值调节器提供的参考电平，把低于参考电平的假讯号去掉，以提高准确性 n 整形 经放大和甄别的波形不一致，须经过整形器调整为形状一致标准的平顶波后才能触发电路，送入计数系统，得出计数结果 n 计数得出结果 电阻抗法白细胞检测原理 根据电阻抗的原理，不同体积的白细胞通过小孔时产生的脉冲大小有明显的差异，而不同类型的白细胞（如淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞）经溶血剂作用后有明显的差异，根据脉冲的大小，即可人为地将血内的白细胞分成几群（ 2分群、 3分群）。图 3-2. 直方图与脉冲信号的关系 图 3-3. 白细胞体积分布直方图fL将白细胞体积从 30-450fl分为 256个通道，每个通道为 1.64fl。 第一群（小细胞群， 35-90fl）是淋巴细胞；第二群（ 90-160fl）是单个核细胞区 ， 也称为中间细胞，白血病细胞、异型淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、浆细胞、嗜碱性粒细胞等 ；第三群（ 160fl以上）大细胞区，中性粒。 电阻抗法红细胞测试原理电阻抗法红细胞测试原理n 红细胞计数和红细胞比容测定红细胞计数和红细胞比容测定红细胞通过小孔时，形成相应大小的脉冲，脉冲的多少即红细胞的数目，脉冲的高度代表单个细胞的体积。脉冲高度叠加，经换算即可得红细胞的比积 n 血红蛋白测定原理被稀释的血液加入溶血剂后，红细胞溶解，释放血红蛋白，后者与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋白衍生物，进入血红蛋白测试系统，在特定波长（一般在 530 550nm） 下比色，吸光度的变化与液体中血红蛋白含量成正比，仪器便可显示其浓度。 电阻抗法血小板测定原理电阻抗法血小板测定原理n 血小板随红细胞一起在一个系统中进行检测，根据血小板随红细胞一起在一个系统中进行检测，根据不同的阈值，计算机分别给出血小板与红细胞数目不同的阈值，计算机分别给出血小板与红细胞数目 识别器小孔n 血小板分别储存于血小板分别储存于 64个通道内，直方图范围为个通道内，直方图范围为 2-20fl 之间。不同仪器的血小板直方图范围不一。之间。不同仪器的血小板直方图范围不一。MPV就是此平整曲线所含的群体算术平均体积，就是此平整曲线所含的群体算术平均体积， MPV也就是血小板体积分布直方图的产物。也就是血小板体积分布直方图的产物。 图 3-5. 电阻抗法血小板体积分布直方图图 3-6. 血细胞分析的具体流程 【 临床应用 】n 细胞直方图： 血液分析仪在计数细胞数量的同时，还提供细胞体积分布图形，横坐标为血细胞体积大小，纵坐标为不同体积细胞的相对频率，这些用以表示细胞群体分布情况的曲线图形称细胞直方图。红细胞直方图的 临床应用n 正常红细胞直方图 ： 仪器在 35-250fl的范围内分析红细胞。红细胞体积分布直方图的显示范围为 25-250fl。 正常红细胞主要分布在 50 150fl范围内，从红细胞直方图上看好似两侧对称正态分布曲线。 缺铁性贫血的直方图 ： 曲线峰左移，峰底变宽，显示小细胞不均一性。 MCV： 66.2fl， RDW： 23.9% 轻型地中海贫血的直方图 ： 曲线峰左移，峰底变窄，显示小细胞均一性。 MCV:71.9fl， RDW:13.3% 铁粒幼细胞性贫血的直方图 ： 曲线峰左移，可呈 “双峰 ”形，峰底明显变宽。缺铁性贫血经铁剂治疗有效，在三周左右时也可出现类似的 “双峰 ”状图形，但峰底更宽。 MCV:73.6fl， RDW:22.8% 巨幼红细胞贫血的直方图 ： 治疗前的直方图曲线峰变低、右移，峰底明显变宽，显示明显的大细胞不均一性，是叶酸或维生素 B12缺乏引起巨幼细胞性贫血的重要直方图特征。经叶酸或 B12治疗后，正常红细胞群逐步释放进入外周血，而病理性红细胞并未完全消亡，检测的红细胞直方图可呈 “ 双峰 ” 形，说明治疗有效。 MCV： 131.2fl， RDW： 24.2% 急性失血性贫血的直方图 ： 直方图的曲线峰变低，其它特点与正常红细胞直方图一致。 MCV： 91.3fl， RDW： 13.0% RDW 的临床应用 n 用于缺铁性贫血和轻型地中海贫血的鉴别诊断：由于 Hb合成障碍，两者均可表现为小细胞低色素性贫血，但前者 RDW增高，后者大多数（ 88%）病例 RDW正常。n 用于缺铁性贫血的早期诊断和疗效观察：绝大多数（ 96%） IDA时 RDW均增高， MCV尚处于正常时， RDW增高是缺铁性贫血的早期诊断的重要指标，当 MCV减低时， RDW增高更明显。给予铁剂治疗有效时， RDW先增高，随着正常红细胞的增多和小红细胞的减少，RDW逐渐降至参考范围。n 用于贫血的形态学分类 表 3-2 贫血的 MCV/RDW分类法贫血类型 MCV/RDW特征 常见原因或疾病小细胞均一性 MCV减少，RDW正常 轻型珠蛋白生成障碍性贫血、某些继发性贫血等小细胞不均一性 MCV减少，RDW增高 缺铁性贫血、 - 珠蛋白生成障碍性贫血、 HbH病等大细胞均一性 MCV增大，RDW正常 MDS、 部分再障、部分肝病性贫血、某些肾病性贫血等大细胞不均一性 MCV、RDW均增高 巨幼细胞性贫血、某些肝病性贫血等血小板细胞直方图的 临床应用n 正常血小板直方图 ： 血细胞分析仪通常在 2 30fl范围分析血小板，正常血小板主要集中在于 2 20fl范围内，一般在 2530fl之间的某一点与横坐标重合，直方图是一条呈对数正态分布的光滑曲线。 大血小板直方图 ： 曲线峰右侧右移，在大于 30fl的某一点与横坐标重合， MPV明显增高。如果血小板数减低，可见于 ITP及体外循环时；如果血小板数升高，见于脾切除术后。如果血小板数正常，可见于慢性髓性白血病、骨髓纤维化等 小血小板直方图 ： 曲线峰右侧左移，在小于 20fl的某一点与横坐标重合， MPV值明显减低。如果血小板数减低，可见于 AIDS病毒感染和脾亢等；如果血小板数正常，可见于慢性再障；如果血小板数升高，可见于反应性血小板增多症。 聚集的血小板直方图： 曲线峰变低，如果以 20个的血小板聚集为主，则曲线峰变低、变平，右侧抬高不明显。此时，在白细胞直方图的 35fl处有一个小峰。见于标本采集不当或 EDTA依赖性血小板聚集等 小红细胞干扰的血小板直方图 ： 在曲线峰的右侧抬起并上扬，不与横坐标重合。可见于 IDA或发生溶血的标本 。白细胞直方图的临床应用 正常白细胞直方图 ： 血细胞分析仪通常在 35 450fl的范围内分析白细胞。根据正常白细胞在溶血剂作用后体积的大小，在直方图上从左至右可确认其相应的三个细胞群 中性粒细胞比例增高或淋巴细胞比例减低 ： 粒细胞峰明显变大，淋巴细胞峰明显变小。在严重的细菌感染时，如果中性粒细胞发生中毒性改变，粒细胞峰可向左移动或向右延伸中性粒细胞比例减低或淋