儿童EB病毒感染研究进展PPT课件

EB病毒感染性疾病研究进展 概述 1964年 Epstein和 Barr首次在 Burkitt (BL)淋巴瘤体外培养细胞 株分离出疱疹样病毒 , 故命名为 EB 病毒 ( Epstein-Barr virus, EBV ) 属于 疱疹病毒科 亚科中唯一能引起人类感染的淋巴滤泡病毒 EB病毒具有嗜 B淋巴细胞特性 , 能够在 B淋巴细胞中建立起隐性 感染 ,刺激细胞增生和转化 1968年，发现是传染性单核细胞增多症病因 1970年发现鼻咽癌组织中存在有 EB病毒 DNA EB病毒分子生物学特征 EB病毒属于一种双 链 DNA病毒，两 种形式： 线 状 DNA（可整合于宿主 DNA）与 环 状 DNA（游离体） 形 态 ：呈球形，直径： 150180nm， 最外 层为 脂蛋白包膜，包膜内是 对 称 的 20面体核衣壳，由 162个管状粒 组 成，核衣壳内有直径 为 45nm的致密 体，内含病毒基因 组 基因 结 构：由 DNA顺 序 长 区段（ UL ）构成（可分 为 5段），其中 掺杂 一 短区段（ US）的重复，两端有末端重 复序列（ TR） EB病毒抗原 基因 组为 172000bp， 编码 五种病毒蛋白 : 壳抗原（ Viral capsid antigen, VCA) 膜抗原（ Membrane antigen, MA) 早期抗原（ early antigen, EA) 补 体 结 合抗原（即可溶抗原 S） 病毒相关核抗原（ EBV associated nuclear antigen, EBNA): 流行病学史 EBV感染世界各地均有 发 生 传 染源： 隐 性感染者和患者 传 播途径：通 过 口咽分泌物 经 密切接触 传 染 易感染人群：普遍易感， 90%的成人在儿童 时 期曾有无症状感染 根据血清学 调查 ，我国 3 5 岁 儿童的 EBV VCA-IgG 抗体阳性率达 90%以上 EB病毒感染 易感 细 胞： B细 胞 部位：呼吸道粘膜 感染途径：病毒外膜糖蛋白 gp350/ 220与 CD21结 合（ 补 体分子 C3d受体），通 过 受 体介 导 的 细 胞内吞作用 进 入被感染 细 胞 EB病毒感染形式病毒感染形式 EB病毒感染病毒感染 A B D 隐性感染 溶细胞性感染 转化细胞 C 缺陷性感染 隐性感染 I 型隐性感染：出现在 BL 的恶变细胞中 ,病毒产物 有 EBNA1 和 EBER; II 型隐性感染：涉及鼻咽癌和何杰金氏病 (HD) ,病毒 产物有 EBNA1、 LMP1、 LMP 2、 EBER 和 BamHI A 片段的转录产物等 III 型隐性感染：见于免疫抑制患者的浆细胞淋巴 瘤细胞 ,病毒隐性感染期的 6 种 EBNA、 3 种 LMP 和两种 EBER 均可以被检测到 I V 型隐性感染：仅发生在健康的病毒携带者 B 淋 巴细胞中 ,这些细胞中含有 EBNA1、 LMP2以及 EBER1 RNA。 溶细胞性感染 环状 DNA解链成线状 DNA 表达病毒复制蛋白如早期蛋白、晚期蛋白 细胞溶解，释放子代病毒 缺损性感染 不完整的病毒基因组 缺损性感染能够利用细胞间的传递方式进行扩散 多见于免疫部分缺陷者 细胞转化 B细胞转化：静止 B淋巴细胞，当感染 EB病毒后， 10%左右可转化为淋巴母细胞样细胞系（ LCL）； NK细胞转化 T细胞转化 EB病毒感染病毒感染 A B D 淋巴细胞增 生性疾病 非淋巴细胞的 恶性肿瘤 自身免疫 性疾病 EB病毒感染所致疾病病毒感染所致疾病 C 原发感染 传染性单核细胞增多症 （ Infectious mononucleosis , IM ） 由 EBV感染引起的淋巴细胞良性增生性疾病 典型表现：发热、咽峡炎、淋巴结肿大、肝脾肿大、 皮肤黏膜皮疹、外周血淋巴细胞增多并出现异型淋巴 细胞（为 EBNA阳性的 B细胞） 婴幼儿期不典型（不能对 EB病毒产生充分的免疫反应 ） 本病可侵犯全身多个脏器，临床呈多样化，易误诊、 临床类型： 咽炎型 、 腺热型 、 淋巴结肿大型 、 肺炎型 、肝炎型、胃肠型、肾炎型、皮疹型、脑炎型、心脏 型及生殖腺型等； 并发症：咽部继发性感染、脾破裂、胃肠道出血、自 身免疫溶血性贫血、再障、粒细胞缺乏症及血小板减 少症等 腭扁桃体淋巴组织增生 慢性扁桃体炎部分病原是由 EBV感染所致 30 多例腭扁桃体淋巴组织增生组织的 EB 病毒检测 ，几乎 100% 的切片中可见个别或少数 EBERs阳性 B 淋巴细胞的存在 呈 EA-D 原位杂交阳性 , 即呈 EB 病毒溶解性感染 巢式 PCR 显示 , 所检测到的 EB 病毒可以是 30 bp 缺失型 LMP1 株 连锁淋巴细胞增生综合征 (X-linked lymphoproliferative syndrome , XLP) XLP 是一种与 EB病毒感染相关的以性连锁免疫缺 陷为特征的家族性遗传病 XLP为 SH2PIa基因突变所致， SH2PIa基因编码 T 细胞及 NK细胞信号传导的蛋白质，突变可致 T细 胞失控性增生 主要临床特征为 EBV感染后出现骨髓危象、低丙 种球蛋白血症及淋巴细胞增生综合征 大约有 75%在发病后几周内死于致死性 IM,包括失 控的恶性淋巴瘤或 B淋巴细胞恶性增生浸润器官 的衰竭 病毒相关的噬血细胞综合征 ( Virus-associated Hemophagocytic syndrome , VAHS) 噬血细胞综合征是以组织中组织细胞显著增生及血细 胞显著的吞噬作用为共同特点、在组织学基础上命名 感染性噬血细胞综合征目前认识到可有细菌、病毒、 或霉菌感染所致，其中 EBV最常见 病理机制：感染导致 NK细胞功能低下或缺如，导致 抗原驱动 T 细胞持久激活和巨噬活化因子产生，分泌 超量的细胞因子（细胞因子风暴） ,使 T 淋巴细胞及巨 噬细胞本身处于失去控制的活化状态 VAHS诊断标准 (1) 发热超过 1周 ,热峰 3815 ; (2) 脾脏肿大 (肋下 3 cm) ; (3) 全血细胞减少 (非骨髓增生减低引起的 2 或 3 系细胞减 少 ) ,血红蛋白 90 g/ L ,血小板 100 109 / L ,中性粒细 胞 1 109 / L ; (4)高甘油三酯 ( TG) 血征和 (或 ) 低纤维蛋白原血征 (空腹 TG 210 mmol/ L 或大于同年龄正常值的 3 个标准差 ,纤维 蛋白原 115 g/ L 或小于同年龄正常值的 3 个标准差 ) ; (5) 组织病理学改变为脾、淋巴结、骨髓组织细胞增生并 见噬血细胞现象 ,无恶性肿瘤证据。 （ 6）自然杀伤细胞 (N K) 活性降低或缺乏 （ 7）高铁蛋白血征 ( 500g/ L) （ 8）可溶性 CD25 升高 ( 2400 IU/ ml) 慢性活动性 EB 病毒感染 ( chronic active EB virus infection) 定义：是一种 EB 病毒感染后异常抗 EBV 抗体增 高和 EBV-DNA 升高，可出现慢性或复发性传染 性单核细胞增多症样症状，同时易发展为淋巴瘤 、病毒相关噬血细胞综合征、间质性肺炎、中枢 神经系统病变进而发展为多脏器衰竭的的淋巴组 织增生性疾病。 CAEBV 的 发病机制 宿主免疫调节紊乱 B淋巴细胞 T淋巴细胞 NK 细胞 穿孔素基因突变 病毒基因的调节紊乱 染色体畸变 CAEBV 的临床特征 三大突出表现： 持续或间断发热、肝脾肿大和淋 巴结病 其他常见的临床症状和体征： 定期或持续疲劳， 咽喉痛疼，淋巴结触痛、贫血、肌肉酸痛、关节 痛、牛痘样水疱及蚊虫过敏 CAEBV的 合并症 血液系统： 感染相关性噬血细胞综合征、血小板减少性紫癜、弥散性血 管内凝血病、白血病、 T 细胞和 NK 细胞淋巴瘤等； 呼吸系统： 间质性肺炎和胸腔积液； 中枢神经系统： 急性和慢性损害，急性损害包括脑炎、脑膜炎、脑膜 脑炎和末梢神经炎等，慢性损害表现为感染后炎症反应造成脑组织脱髓鞘 样改变，临床出现慢性、反复性中枢神经系统症状 消化系统： 消化道溃疡、腹泻、肝炎、肝硬化和肝功能衰竭 眼睛： 可致突眼症，视网膜炎 皮肤： 除了牛痘样水疱及蚊虫过敏外，还可表现为各种皮损如干燥综合 征、不典型皮疹及口腔溃疡等 心血管： 冠状动脉瘤、心瓣膜病、心肌炎、心内膜炎、脉管炎，其中以 冠状动脉瘤、心瓣膜病最为常见 其他： 肾损伤、脓毒症等 CAEB分型 根据 CAEBV 病变细胞膜免疫分为二类型： T 细胞亚型： 最常见，较重、进展较快。 临床特征：高热及高滴度 EBV相关抗体，易发生肝肿大和淋巴结病，此型 可能与 EBV 裂解期感染有关。 病理机制：主要是 T 细胞的激活及细胞因子如 IFN-、 TNF-的释放导致 了严重的炎症反应及发热 NK 细胞亚型： 较轻、进展慢。 临床特征：以蚊虫过敏及相应的皮肤损害、骨髓或外周血中大颗粒样异 常淋巴细胞增多及 IgE 增高为其特征。 病理机制：外周血中 IL-13 明显增高， IL-13 为 TH2 细胞分泌因子，能促 进 B 淋巴细胞分化，从而分泌抗体并转化为 IgE 抑制巨噬细胞和单核细胞 的细胞毒性功能 CAEBV实验室检查 外周血像： 各类血细胞减少，外周血一系或多系减少，其 中以是血红蛋白和血小板减少多见，少部分患者白细胞和 血小板会升高。 肝功能： 血清转氨酶升高，可占 90%以上。其他较常见的 有高胆红素血症（主要是间胆升高为主）、白蛋白降低、 高甘油三酯血症。 凝血功能： 有凝血功能障碍时表现为凝血酶原时间（ PT ）延长、部分凝血活酶时间（ APTT）延长、纤维蛋白原 （ FIB）下降、 D二聚体升高 骨髓检查： 骨髓像提示多数病例为正常骨髓像，一些病例 表现为血细胞减少。如并发噬血细胞综合征，活动期可发 现骨髓中有明显组织细胞增多伴噬血现象，但无恶变证据 影像学检查： 针对受累器官进行影像学检查 CAEBV诊断标准 I. EBV 感染开始症状一直持续 6 个月以上， EBV 抗体滴度异常（包括抗 VCA-IgG 15120，抗 EA 抗体 1640 或 EBNA 抗体 12 II. 主要脏器受损的组织学标志包括如间质性肺炎、骨髓某 成分的增生不良、视网膜炎、淋巴结炎、脑膜脑炎、迁延 性肝炎、脾肿大； III. 证实受损组织中 EBV 数量增加：受损组织中 EB病毒 DNA、 EB病毒 RNA或蛋白增多 或外周血中 EB病毒 DNA 水平增高 诊断 CAEBV需满足上述每一项中的至少一条 ;并 排除任何已知的免疫功能低下包括 HIV感染 SCAEBV诊断标准 临床表现： 间歇性发热，淋巴结病，肝脾肿大 血液系统损害：贫血，血小板减少，淋巴细胞减少或增多， 中性粒细胞减少，多克隆丙种球蛋白病 病毒学方面：下列抗体滴度增高和阳性 （ 1） VCA-IgG 5120， VCA-IgA 阳性， EAD-IgG640， EAD-IgA 阳性， EAD 和 EAR IgG 均 640 （ 2）受损组织中检测出 EBV 基因 其他： 无法用其他疾病解释的慢性病程（ 6 个月） 注：诊断 SCAEBV 需满足上述每项中的至少 1 条； SCAEBV 患者随后有可能 发展为 B 或 T细胞淋巴异常增殖性疾病 EBV感染的实验室诊断 抗体检查： 抗原检查： 基因诊断技术 抗体的临床意义 VCA - IgM抗体在感染早期出现 , 可持续数周到 3个月 VCA - IgG在病程进入恢复期后滴度下降 , 以低水平 维持终身 VCA - IgA在急性期以及有病毒点力时出现 , 阳性率 低于 IgM EA是病毒增殖的标志 , EA抗体在原发感染恢复期和 潜伏感染再活化期出现 , 其出现略迟于 VCA - IgM, 持 续数月至 1年 EBNA - 1 IgG：病毒基因组处于潜伏状态 , 此时细 胞只合成 EBV 核抗原 EBV感染四种组合抗体检查： VCA - IgM、 VCA - IgG、 EA -IgG、 EBNA - 1 - IgG) EBV viral load in whole blood reflects clinical status in patients with infectious mononucleosis, allogeneic transplant, and nasopharyngeal carcinoma EBV感染的治疗 无特效治疗方法 抗病毒治疗：阿昔洛韦、更昔洛韦抑制 DNA 聚合 酶及病毒在裂解感染时的复制。可使病毒载量下 降，但作用短暂，停药后病毒载量复又上升。而 且通常对临床症状和体征无明显改善 抗 B 淋巴细胞（抗 CD21 和 CD24）抗体被表明对 EBV 相关性 B 细胞淋巴组织增生的移植患者和先 天性免疫缺陷综合征有一定疗效 免疫调节剂：如 -干扰素、 -干扰素或 IL-2 被认为 能抑制 EBV相关的 T 淋巴细胞和 B 淋巴细胞增殖性 疾病并有用于治疗 CAEBV 和合并 NK 细胞活性下 降的病例报道 单克隆抗体疗法及细胞疗法：输注自体 EBV 特异 性 CTL细胞可改善