阿魏酸对过氧化氢诱导A375细胞凋亡的保护作用研究

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 阿魏酸对过氧化氢诱导 A375 细胞凋 亡的保护作用研究 P 中国论文网 /6/view-12954709.htm 关键词 阿魏酸；Caspase；凋 亡；A375 细胞；氧化应激 中图分类号 R758.41 文献标识 码 A 文章编号 1673-7210（2017） 11（b）-0011-03 Abstract Objective To observe the effect of ferulic acid on the apoptosis of melanocyte induced by oxidative stress. Methods According to random number table， A375 cells were divided into five groups： control group， model group， and high， middle， low concentrations of ferulic acid groups. Cells in the control -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 group were cultured normally， while peroxide hydrogen was added into the cultured A375 cells of model group and high， middle， low concentrations of ferulic acid groups at the final concentration of 0.1 mmol/L， duration for 4 hours. The cells were stained with fluorescent dye DAPI. The apoptosis of each group was observed by fluorescence microscope. Caspase active kit was used to measure the activity of Caspase in each group. Results Compared with the control group， the activities of Caspase-3， 8 and 9 in the model group were significantly increased， with statistically significant differences （P 0.05） ；而阿 魏酸中、低浓度组的抑制作用不明显。 见表 1。 3 讨论 白癜风是一种常见的色素脱失性 皮肤病，发病率高，虽无明显的自觉症 状，由于皮损部位黑素保护功能缺失， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 在日光照射下可出现局部皮肤潮红、瘙 痒，严重者出现皮炎。白癜风因皮肤上 的皮损色差影响患者的容貌，造成患者 精神上的巨大压力，影响其工作、学习 和生活。氧化应激致色素细胞功能异常 并导致皮肤黑素的代谢障碍，产生白癜 风等色素缺失性皮肤疾病10-11，严重 者可累及毛发，造成灰发、白发等12- 13。有研究证实，白癜风患者表皮黑 素细胞存在氧化应激状态，并存在水平 不断增高的现象14-17 。氧化应激可通 过线粒体、内质网和死亡受体等细胞内 外途径引起黑素细胞的凋亡，促进了白 癜风的发生、发展18 。本研究从黑素 细胞氧化应激损伤角度入手，以含 0.1 mmol/L 过氧化氢的培养基作用于 A375 细胞，造模方法参考了田军等19的研 究结果，以细胞形态学和 Caspase 为观 察对象，探讨阿魏酸对氧化应激诱导的 黑素细胞凋亡的影响。 细胞凋亡过程中伴随着明显的形 态学改变，通过使用荧光染料染色可以 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 通过形态学改变观察细胞在凋亡中的进 程。DAPI 是一种结合于 DNA 双链的荧 光染料，对凋亡过程中的 DNA 变化可 以作出准确反映。观察含 0.1 mmol/L 过 氧化氢的培养基作用细胞 1、2、4、8 h 后 DAPI 染色，结果可见，作用 1、2 h 对细胞损伤作用不明显，作用 4 h 开始 出现较明显的变化，作用 8 h 后细胞死 亡较多，不利于后续实验。本研究以 0.1 mmol/L 过氧化氢作用 4 h 为处理条 件。在用药后，细胞凋亡的中心环节是 由 Caspase 半胱氨酸蛋白酶家族引发的 级联反应，其激活过程主要包括胞外死 亡受体介导和线粒体依赖途径，依次激 活下游的 Caspase，通过切割特异性底 物，导致细胞凋亡过程的不可逆。 Caspase-8、9 都是细胞凋亡过程中的关 键因子，参与该过程的程序化调控，这 些因子受外源死亡受体途径和内源线粒 体途径的激活，Caspase-8、9 是两个途 径的共同部分。在应激状态下，酶原形 式的 Caspase-8、9 活化并激活 Caspase- -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 3 触发细胞凋亡20 。本实验检测了各 组细胞中 Caspase-3、8、9 的活性，结 果显示：模型组 Caspase-3、8、9 活性 水平显著高于空白对照组，提示过氧化 氢所致的氧化应激可激活 A375 细胞凋 亡基因，阿魏酸高剂量组可显著下调 Caspase-3