头孢美唑钠无菌检查消除抑菌性的研究

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 头孢美唑钠无菌检查消除抑菌性的 研究 摘 要：头孢美唑钠无菌检查时 可采用薄膜过滤法消除抑菌性，缓冲液 冲洗量以 900ml/筒为宜，可以选择大肠 埃希菌或金黄色葡萄球菌为阳性对照菌。 本实验对头孢美唑钠无菌检查消除抑菌 性进行研究。 中国论文网 /8/view-12772205.htm 关键词：头孢美唑钠；检查；验 证 头孢美唑钠又称氰唑甲氧头孢菌 素、头孢美他唑、先锋密林、头孢甲氧 氰唑，为第二代头孢菌素，对大肠杆菌、 克雷伯肺炎杆菌、奇异变形杆菌、沙门 菌属等阴性杆菌对本品有较好的敏感性 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 1-5。头孢美唑钠适用于敏感菌引起的 败血症、支气管炎、胆管炎、胆囊炎、 腹膜炎、支气管扩张症感染时、肺炎、 慢性呼吸道疾患继发感染、肺化脓症 （肺脓肿） 、前庭大腺炎、子宫内感染、 子宫附件炎、盆腔死腔炎、颌炎等。无 菌检查法系指检查药品、敷料、缝合线、 无菌器具及适用于药典要求无菌检查的 其他品种是否无菌的一种方法。本实验 对头孢美唑钠无菌检查消除抑菌性进行 研究。 1 试验环境与材料 1.1 试验环境：在环境洁净度为 B+A 的无菌室中进行。 1.2 仪器： BOD 生化培养箱（上 海仙象仪器仪表有限公司） ；赛多利斯 BT25S 分析天平（北京晨曦勇创科技有 限公司） ；全封闭集菌培养器（一次性） （浙江泰林生物技术股份有限公司） ； 细菌培养箱（上海仙象仪器仪表有限公 司） ；HTY-2000B 智能集菌仪（杭州泰 林生物技术设备有限公司） ；YX-24LM -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 不锈钢压力蒸汽灭菌器消毒锅 24L 升 （河南三强医疗器械有限公司） ； KQ250DE 超声波清洗器超声波检测仪 器（烟台鑫康商贸有限公司） 。 1.3 试验用菌株：生孢梭菌 CMCC（B ）64 941、金黄色葡萄球菌 CMCC（B ）26 003、枯草芽孢杆菌 CMCC（B ）63 501、白色念珠菌 CMCC（B ）98 001、黑曲霉 CMCC（B ）98 003、大肠埃希菌 ECMCC （B）44lO23。 1.4 培养基、稀释液及缓冲液 1.4.1 干粉培养基：玫瑰红钠琼 脂培养基（连云港端峰生物科技有限公 司） 、改良马丁琼脂培养基（天津市津 东天正精细化学试剂厂） 、硫乙醇酸盐 培养基（连云港端峰生物科技有限公司） 、营养琼脂培养基（连云港端峰生物科 技有限公司） 。 1.4.2 细菌稀释液：氯化钠溶液 （天津市津东天正精细化学试剂厂） 。 1.4.3 冲洗用缓冲液：蛋白胨缓 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 冲液（连云港端峰生物科技有限公司） 。 2 方法与结果 2.1 菌液制备 2.1.1 取经培养一天的金黄色葡 萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌的 肉汤培养物 1ml，用 0.9%无菌氯化钠溶 液 10 倍稀释至 10-510-7，备用。 2.1.2 取经培养一天的生孢梭菌 硫乙醇酸盐流体培养基的新鲜培养物 1ml，用 0.9%无菌氯化钠溶液 10 倍稀 释至 10-7 备用。 2.1.3 取经培养一天的白色念珠 菌液体培养物 1ml，用 0.9%无菌氯化钠 溶液 10 倍稀释至 10-510-6，备用。 2.1.4 取经培养一周的黑曲霉斜 面培养物，加 35ml 0.9%无菌氯化钠 溶液，洗下黑曲霉孢子，吸取出孢子悬 液 1ml，加 0.9%无菌氯化钠溶液适量稀 释，用标准比浊管比浊，其浊度与标准 比浊管相当后，取 1ml 稀释后的孢子悬 液，用 0.9%无菌氯化钠溶液 10 倍稀释 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 至 10-4，备用。 2.2 菌液计数 每种菌液接种 2 个平皿，取其平 均值。取白色念珠菌、黑曲霉菌菌液各 1ml，注入约 15 毫升、45 摄氏度改良 马丁琼脂平皿，经 26 摄氏度生化培养 箱培养 72 小时，金黄色葡萄球菌液、 枯草芽孢杆菌液、生孢梭菌液、大肠埃 希菌液各 1 ml，注入约 15 毫升、45 摄 氏度营养琼脂平皿，经 36 摄氏度生化 培养箱培养 48 小时，活菌计数。生孢 梭菌CMCC（ B）64 941菌落数 69cfu/ml，大肠埃希菌 ECMCC （B） 44lO23 菌落数 82cfu/ml，金黄色葡萄球 菌CMCC（B）26 003菌落数 73cfu/ml，枯草芽孢杆菌 CMCC（B） 63 501菌落数 66cfu/ml，白色念珠菌 CMCC（B ）98 001菌落数 63cfu/ml， 黑曲霉CMCC （B ）98 003菌落数 69cfu/ml。 2.3 实验 2.3.1 供试液制备 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 取供试品 70 克，加 0.9%无菌氯 化钠溶液 70 毫升转移至锥形瓶内，混 匀，静止十分钟，取上清液稀释五十倍， 分别置于七个滤筒中过滤，采用 0.1% 蛋白胨缓冲液进行冲洗，冲洗液用量为 每筒 900ml，每次 100ml，在最后一次 冲洗中分别加入 1ml 已制备好的上述 7 株菌液（约为 10100 个/筒） ，依照 2010 年版中国药典二部附录无菌检 查法，加入相应的培养基，按规定条件 培养 14 天，每天观察并记录。 2.3.2 对照组 另取 7 个滤筒，分别加入 1ml 相 应的试验菌，再加入相应等量培养基， 作为对照，按规定条件培养 14 天，每 天观察并记录。 2.3.3 供试品对照组 取供试品 20 克，加 0.9%无菌氯 化钠溶液 20 毫升转移至锥形瓶内，混 匀，静止十分钟，取上清液稀释五十倍， 分别置于七个滤筒中过滤，采用 0.1% 蛋白胨缓冲液进行冲洗，冲洗液用量为 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 每筒 900ml，每次 100ml，再分别加入 硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养 基，依照 2010 年版中国药典二部 无菌检查法，按规定条件培养 14 天， 每天观察并记录。 2.3.4 空白对照组 取试验用硫乙醇酸盐流体培养基 和改良马丁培养基，按规定条件培养 14 天，每天观察并记录。 2.3.5 阴性对照组 取冲洗用 0.1%蛋白胨缓冲液及 0.9%的无菌氯化钠溶液适量，分置于两 个滤筒中过滤，再分别加入硫乙醇酸盐 流体培养基和改良马丁培养基，按规定 条件培养 14 天，每天观察并记录。 2.3.6 培养 硫乙醇酸盐流体培养基桶 3035培养；真菌培养基桶 2328 培养，培养 14 天，每天观察