微等离子体与点阵Er-YAG激光(2940nm)治疗兔耳增生性瘢痕的疗效比较

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 微等离子体与点阵 Er:YAG 激光 (2940nm)治疗兔耳增生性瘢痕的疗效 比较 摘要目的：探讨微等离子体与 点阵 Er：YAG 激光（2940nm ）对兔耳 增生性瘢痕的治疗效果。方法：同种属 雌性新西兰大耳白兔 6 只，于每只兔耳 腹侧面中段制作增生性瘢痕模型。28d 后，将造模成功的瘢痕块随机分为 3 组， 分别行微等离子体、点阵激光治疗和空 白对照，治疗后 27d 取材，进行 HE、Masson 和天狼猩红染色，观察各 组瘢痕组织中成纤维细胞数目、胶原分 布特征及、型胶原纤维的构成比。 结果：两个治疗组瘢痕组织变软变平且 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 弹性增加，成纤维细胞数均较对照组减 少，以 Plasma 组更为明显；胶原纤维 的形态及排列向正常皮肤中的形态及排 列转变，型胶原纤维的比例均增加， 两治疗组间无显著差异。结论：微等离 子体与点阵 Er：YAG 激光（2940nm） 治疗兔耳增生性瘢痕均有效，且在抑制 瘢痕组织内成纤维细胞增生方面，微等 离子体具有更明显的优势。 中国论文网 /6/view-13026746.htm 关键词 激光；瘢痕；成纤维细 胞；胶原；兔；微等离子体 中图分类号R619+.6 文献标志 码A 文章编号1008-6455（2017）03- 0066-04 成纤维细胞的过度增殖和细胞外 基质的过度沉积是增生性瘢痕的病理学 基础。干预成纤维细胞的生物学活动， 改变细胞外基质的主要成分：、型 胶原的排列形态，可治疗增生性瘢痕。 点阵 Er：YAG 激光（2 940nm）目前己 在治疗凹陷性瘢痕方面取得了良好疗效。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 微等离子体射频技术也已成功用于细小 皱纹、妊娠及凹陷性瘢痕的治疗，且已 证实二者在刺激胶原蛋白再生及改善胶 原纤维排列方面疗效突出。因此，我们 采用微等离子与点阵 Er： YAG 激光治 疗兔耳增生性瘢痕，通过观察各组兔耳 增生性瘢痕的病理组织切片中成纤维细 胞数目、胶原纤维排布特征，以及 、型胶原构成比例的变化来探讨其 对增生性瘢痕的治疗是否有效，并比较 二者的疗效。 1 资料和方法 1.1 实验动物和设备：同种属新 西兰大白兔 6 只，雌性，体重 （2.50.20）kg，采于河北医科大学 实验动物中心，许可证号：SCXK（冀） 2008-2-001。实验设备： Plasma 微等 离子射频仪（Alma Lasers，Israel） ； 点阵 Er：WAG 激光（2 940hm）： （Asclepion MCL30 Dermablate，German） ；偏光显微镜， （Olympus，Japan） ；实验试剂：天 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 狼猩红（Sigma，America） 。 1.2 动物模型制作：参照李荟元 等动物增生性瘢痕模型的制作方法，速 眠新、氯胺酮以 1：1 的比例混合后按 0.2ml/kg 肌注，全麻。于每只兔耳腹侧 面中段，用圆形环钻沿长轴避开血管， 各做 4 个直径为 8mm 的圆形全层皮肤 缺损创面，并刮除软骨膜，共形成 48 个圆形创面（图 1） 。创面 1 周左右上皮 化后，去除痂皮，造模术后 28d 左右达 到增生高峰，瘢痕块颜色发红、质硬、 明显突起于周围皮肤，但未超出原术野 范围（图 2a-a，2b-b） 。随机切取部分瘢 痕组织，HE 染色可见过度增殖的成纤 维细胞、微血管、胶原纤维，认为造模 成功。 1.3 实验过程：造模术后 28d，共 形成增生性瘢痕 42 处，随机分为 3 组： Plasma 治疗组：无套管治疗头， 0.6ms， 80w，1 遍；点阵 Er：WAG 激光（2 940hm）治疗组：微孔点阵模 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 式，光斑 13mm13mm，分 9 层打孔， 能量密度 162J-/em2。空白对照组： 不做治疗。治疗后创面表面外涂红霉素 眼膏，继续分笼避光饲养，未见水疱、 紫癜及血疱等，恢复过程中未见感染。 1.4 观察和测量：造模术后 55d， 观察并记录各组兔耳创面愈合、瘢痕增 生情况及经治疗后瘢痕颜色、质地、厚 度变化。麻醉成功后，11 号尖刀切取兔 耳增生性瘢痕组织对应的全层兔耳，即 刻放入中性福尔马林缓冲固定液中，并 分组标记。4固定 2 周后，以全层兔 耳为断面，纵向截取瘢痕标本，梯度脱 水，二甲苯透明，石蜡包埋，切片。 HE 染色：在 400 倍普通光学显微镜 下观察兔耳增生性瘢痕组织的特征性结 构；每张兔耳瘢痕组织切片中央及两侧 各随机选取 2 个不重叠视野，分别记录 镜下目测到的成纤维细胞数目； Masson 染色：400 倍普通光学显微镜 下观察兔耳增生性瘢痕组织中胶原纤维 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 形状，密度以及排列走向情况；天狼 猩红染色：将空白切片置于 1%饱和苦 味酸天狼星红溶液染色 1h，流水冲洗 5min。苏木精复染 2min，常规分化返 蓝，流水冲洗，常规脱水，透明，封片。 在 400 倍偏振光显微镜下观察，型胶 原纤维为粗大明亮且不均匀的红色或黄 色纤维，显示很强的双折光性，排列密 集无序；型胶原纤维为纤细的绿色纤 维，显示弱的双折光性，呈疏网状分布 于型胶原纤维周围，摄片，麦克奥迪 数码医学图像分析：以绿色纤维代表 型胶原纤维，分析出图像中绿色纤维的 阳性总面积；以黄色和红色纤维代型 胶原纤维，分析出图像中红色黄色纤维 的阳性总面积。将型胶原纤维的阳性 总面积除以型胶原纤维的阳性总面积， 计算出型胶原纤维比例。 1.5 统计学处理：统计各实验组 兔耳增生性瘢痕组织中不同视野下单位 面积内成纤维细胞数目，型胶原所占 比例，数据用均数标准差表示。应用 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 SPSS13.0 软件进行完全随机分组的方差 分析，以 P0.05 作为判断差异显著性 的标准。 2 结果 2.1 大体观察：对照组：瘢痕组 织色红、质硬，突起于皮肤表面，但未 超出原手术范围；Plasma 治疗组：治疗 后即刻可见瘢痕组织表面均匀分布的焦 黄色点状微孔、少量点状渗血及淡黄色 渗液。创面自行结痂，10d 左右完全脱 落。取材前可观察到瘢痕颜色变浅、质 地更接近周围正常皮肤（图 2a、2b） 。 点阵 Er-YAG 激光治疗组：治疗后即刻 可见均匀分布的白色至微黄的针尖状气 化孔，无明显渗出。痂皮较薄，一周左 右自行脱落。至取材前可见瘢痕组织体 积缩小，颜色较对照组变淡，质地平软， 弹性增加（图 2b-a） 。 2.2 病理染色结果 2.2.1 HE 染色：对照组：成纤维 细胞大量增生且排列无序，微血管增生 明显（图 3a） ，成纤维细胞数 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 （77.149.304）个/视野；Plasma 治疗 组：成纤维细胞增生受抑，数目减少 （图 3b） ， （59.1210.344）个/视野；点 阵激光治疗组：成纤维数目变少，排列 有序（图 3c） ， （66.007.943 ）个/视野。 经统计，3 组标本镜下单位面积成纤维 细胞数目有统计学差异 （P=48.324，P=0.0000.01） ；SNK 法 多重比较结果显示，三组标本中任意两 组之间总体均数差异均具有统计学意义 （均 P0.05） ，微等离子组较点阵激光 组成纤维细胞数减少更为明显。 2.2.2 Masson 染色结果：对照组胶原纤 维大量增生，形状粗大且排布紊乱，可 见旋涡结构（图 4a） 。两治疗组胶原纤 维变细长且较对照组排列疏散并趋于一 致（图 4b、4c ） 。 2 2.3 偏光显微镜观察与图象分析： 对照组瘢痕组织中，胶原纤维分布密集 且无序，黄色粗大的型胶原纤维呈丛 束状分布，排列无序，粗细不均，约占 整个视野的 59.2%，呈细丝状绿色的 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 9 型胶原纤维呈网疏状分布于型胶原周 围，约占（40.84.13）%（图 5a） ；微 等离子组：胶原纤维排列较对照组有序， 且方向趋于一致，型胶原比例增加， 约占（45.93.07）%（图 5b） 。点阵激 光组，胶原纤维分布疏散，排布渐规则， 型胶原比例较对照组亦明显增加，约 占（44.43.06）%（图 5c） 。不同处理 组的兔耳增生性瘢痕组织中型胶原所 占比例有统计学差异 （F=5.745，P=0.008 ） ；SNK 法多重比 较结果显示，除了微等离子组与点阵激 光组之间总体均数差异没有统计学意义 外，其余任两组总体均数差异均有统计 学意义（均 P0.05） ，可认为微等离子 与点阵激光均能使兔耳瘢痕组织中型 胶原比例增加，但二者无明显区别。 3 讨论 增生性瘢痕形成的实质是成纤维 细胞的过度增殖，胶原蛋白的过度合成 大大超过其分解代谢的速度，导致细胞 外基质的过度沉积。作为细胞外间质的 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 10 主要成分，、型胶原起着最为重要 的支撑作用。型胶原是早期创面瘢痕 愈合的基础，占据着整个瘢痕组织，抗 张力性很强，决定了组织僵硬度。型 胶原是正常皮肤组织中网状纤维的主要 组成成分，较前者伸展性和柔软度好， 决定组织的弹性。 瘢痕增生的早期即可观察到组织 内胶原含量、比例及结构的改变，临床 针对胶原的治疗可明显改善瘢痕质地， 因此通过干预胶原增生及排布情况来控 制瘢痕增生的方法是科学可行的。 近年来激光医学及射频技术以其 安全性高、创伤小的优势成为治疗病理 性瘢痕的新技术。本实验将微等离子体 与点阵 Er：YAG 激光（2940nm ）可影 响组织胶原的发生与发展这一特性运用 于增生性瘢痕的早期干预，即在早期就 开始诱导其胶原的含量及形态向正常组 织转化，以进一步改善预后，探讨疗效 是否的发生率。陆雯丽等发现经微等离 子治疗后患处水肿程度较轻，结痂时间 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 11 及红斑期较短，大大减少患者的停工时 间，大量临床实验均证明了微等离子体 射频技术对各类原因导致的瘢痕的有效 性，是治疗瘢痕的一项安全且疗效理想 的技术。 点阵激光首先在治疗萎缩性瘢痕 方面取得了良好的疗效，其原理为点阵 式光热作用：组织中水分子吸收能量后， 产生矩阵状排列的微热损伤区，使周围 组织发生创伤愈合反应来刺激真皮胶原 再生、重构，使治疗区瘢痕更接近正常 组织。点阵激光能精准地汽化所到层次 以上的皮肤，凝固层较薄，皮肤更快修 复，术中痛感较微针等其他治疗方法轻 微，术后炎症反