全自动微板检测技术在献血者血型检测工作中的应用

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 全自动微板检测技术在献血者血型 检测工作中的应用 根据 GB 18467-2001献血者健 康检查要求4.2.1 条款的相关规定1 ， 血站必须对献血者的 ABO 血型和 Rh 血 型进行检测。献血者血型检测以前多数 血站是采用手工卡片法或试管法操作， 批量检测工作量较大，易因手工机械性 重复操作而产生血型差错。本血站自去 年 4 月份开始使用深圳爱康 Poseidon 数 字全自动血型仪结合 TECAN 全自动样 本处理系统对献血者血液标本进行常规 检测 ABO 血型和 Rh（D）血型，至今 年 3 月底共检测标本 27355 人次，检测 出 Rh（ D）阴性献血者 58 例，阴性率 为 0.21%，发现外采初筛 ABO 血型错 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 误 8 例，在实际工作中取得较好的效果， 降低了工作强度，避免了人为因素导致 的血型错误。血型检测的操作实现了自 动化、标准化，并可将血型检测原始资 料归档备份，提高了临床输血的安全性。 现将我站全自动微板检测血型技术在实 际工作中的应用体会及注意事项总结如 下。 中国论文网 /6/view-12957042.htm 1 材料与方法 1.1 标本来源：2010 年 4 月至 2011 年 3 月本站 27355 名无偿献血者 EDTA-K2 抗凝血液标本。 1.2 仪器与材料： TECANRMP100 全自动样本处理系统， 爱康 Poseidon 数字全自动血型仪，新康 X96 型微量振荡器，奥林巴斯 1012 孔 V 型底梯度微板，812 孔深孔血球稀释 板。 1.3 试剂：抗 A、抗 B 血型定型 试剂（长春博德） ，使用前用生理盐水 配成 1：15 的工作液；Rh（D）血型定 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 型试剂（长春博德） ，使用前用生理盐 水配成 1：20 的工作液；ABO 反定型 用红细胞（北京金豪） 。 1.4 应用软件：Poseidon 血型分 析系统 V3.35。 1.5 检测方法 1.5.1 加样 （1）ABO 正、反定型：梯度板 第 1、2、3 列为反定型孔位，第 4、5 列为正定型孔位。加完标本血浆后直接 吸取 10ul 标本浓缩 RBC 与 300ul 生理 盐水在血球稀释板上进行混匀配制成稀 释后标本 RBC。正定型孔：分别加入 25ul 稀释后标本 RBC 和 25ul 正定试剂。 反定型孔：分别加入 12ul 标本血浆和 38ul 反定型用红细胞。 （2）Rh（D）定型：标本的加 样顺序按梯度板的竖列排序。每孔分别 加入 25ul 稀释后标本 RBC 和 25ul 抗 D 试剂。 1.5.2 震荡： 加样完成后立即将梯度板放在微 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 量振荡器上振荡，振荡频率以液体不溢 出为宜，振荡时间为 10 秒左右，以孔 中心无血球团为准。 1.5.3 静置： 振荡后静置 1 个小时（最少不得 小于 40 分钟） ，放置过程中不能振动梯 度板。 1.5.4 判读： 采用 Poseidon 数字全自动血型仪， 利用 CCD 摄像数码分析技术进行凝集 判别，对梯度板上的血型结果进行扫锚 判读。结果判断方法：（1）单一孔结 果：红细胞均匀分布在 V 型孔底的为阳 性，红细胞沉降集中在孔底中央形成一 点的为阴性，如有异常情况打“?”。 （2）综合结果：ABO 正反定型结果相 符在“综合结果 ”栏给出正确的 ABO 血 型。Rh （D ）血型正常在“综合结果”栏 给出正确的 Rh（D）筛查血型。对 ABO 正反定型不符或任意单一孔打“?”， 则在“综合结果 ” 栏打“?”，此时要采用 手工试管法进行结果复查。对复查结果 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 仍为 ABO 正反定型不符和 Rh（D）血 型筛查阴性的标本，送我站血型参比室 做进一步鉴定，依据鉴定结果对血型结 果进行定论。 2 结果 2.1 对本站 27355 名无偿献血者 标本进行常规检测 ABO 血型和 Rh（D）血型，共筛查出 Rh（D）阴性 标本 58 例，阴性率为 0.21%。将 58 例 Rh（D）筛查阴性标本送血型参比室进 行进一步鉴定，结果均为 Rh（D）阴性。 2.2 发现外采初筛 ABO 血型错 误 8 例。 2.3 发现 ABO 正反定型不符 5 例，其中 3 例为冷凝集素引起，2 例为 标本抗凝不全引起。 3 讨论 ABO 血型系统及 Rh 血型系统是 在输血工作中最为重要的两个血型系统， 献血者血型的正确鉴定是保证输血安全 的基本前提。本站采用爱康数字全自动 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 血型仪结合全自动样本处理系统对献血 者 ABO 血型及 Rh 血型进行检测，本次 共筛查出 58 例 Rh（D）阴性，经血型 参比室鉴定全部为 Rh（D）阴性，阴性 率为 0.21%，符合我国汉族人群 RhD 阴 性者占 0.2%0.5% 的特点2 。 本次共发现外采初筛 ABO 血型 错误 8 例。我站街头献血是采用手工卡 片法对献血者末梢血进行 ABO 正定型 初筛，存在很多导致血型初筛差错的因 素，如：工作现场冷热温差大，试剂保 存条件差，效价下降并易受污染；献血 人员太多时试验反应时间可能得不到保 证；献血环境拥挤嘈杂会分散工作人员 的注意力导致人为差错等。因此必须对 献血后的复检标本进行 ABO 正反定型 和 Rh（ D）血型复检试验，以确保血型 结果正确无误。 本次共发现 ABO 正反定型不符 5 例，其中 3 例为冷凝集素引起，2 例 为标本抗凝不全引起。正常人血浆中含 有少量冷凝集素，效价很低且4 才 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 有活性，一般对 ABO 定型无影响，但 也有冷凝集素增高的个例，可导致室温 环境下 ABO 正反定型不符。当外采人 员留取献血者血液标本时如未及时颠倒 混匀，会导致标本抗凝不好而引起血浆 中纤维蛋白去除不完全，也会造成红细 胞假性凝集，导致 ABO 血型正反定型 不符。 我们认为全自动微板检测血型技 术有以下优点：（1）采用全自动设备 加样，加样量精确、加样速度快，降低 了工作强度，避免了手工加样的人为误 差和差错；（2）血液样本用量少和试 剂用量少，节约试剂成本；（3）通过 静置自然沉降的方法，排除由于离心等 外力因素所至的假阳性和假阴性结果， 提高了检测结果的准确性；（4）采用 血型仪自动判读结果，可对血型检测原 始记录进行打印和备份，保证了血型检 测结