高效液相色谱法测定巴中栀子熊果酸含量

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 高效液相色谱法测定巴中栀子熊果 酸含量 摘 要：建立反相高效液相色谱 法测定巴中栀子中熊果酸的含量。方法： 采用奥泰公司 C18 色谱柱 （220mm4.6mm，5m） ，甲醇-乙腈- 磷酸盐溶液（ 取磷酸二氢钾 1g，加水 800 毫升溶解，加 1 毫升磷酸，用水稀 释至 1000ml） （585：10）为流动 相，检测波长为 210nm，流速为 1.0ml/min，柱温为 30。熊果酸在 0.10.55mg mL-1 范围内呈良好的线 性关系。熊果酸平均回收率分别为 99.3%。 结论：本法简便、准确，可用于巴中栀 子中熊果酸的含量测定。 中国论文网 /8/view-12892471.htm -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 关键词：栀子；含量；测定 栀子是茜草科植物栀子的果实。 栀子的果实是传统中药，具有护肝、利 胆、降压、镇静、止血、消肿等作用。 栀子气味：苦、寒、无毒。 药性赋 记载：“味苦，性大寒，无毒。沉也， 阴也。其用有二：疗心中懊颠倒而 不得眠，治脐下血滞小便而不得利。易 老云：轻飘而象肺，色赤而象火，又能 泻肿中之火。 ”栀子临床常用于热病心烦、 黄疸尿赤、血热吐衄、血淋涩痛、目赤 肿痛、火毒疮疡等。熊果酸是存在于天 然植物中的一种三萜类化合物，具有镇 静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、 降低血糖等多种生物学效应，熊果酸还 具有明显的抗氧化功能，为栀子主要成 分之一。熊果酸具有迅速降低谷丙转氨 酶、血清转氨酶、消退黄疽、增进食欲、 抗纤维化和恢复肝功能的作用1-5。栀 子生于丘陵山地或山坡灌林中，分布于 中南、西南及江苏、安徽、浙江、江西、 福建、台湾等地。本文采用高效液相法 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 对巴中栀子中的熊果酸的进行了含量测 定。 1 仪器与试药 1.1 仪器：EX1600 四元低压梯 度液相色谱仪（南京皓而普分析设备有 限公司） ；B03001-004 在线脱气机（上 海笛柏实验设备有限公司） ；HH-601 超 级恒温水浴（北京富瑞恒创科技有限公 司） ；08890-xx 超声波清洗器（北京中 科科尔仪器有限公司） ；FA1204CFAC 型全自 刃 子分析天平（北京同 德创业科技有限公司） ；ULABO 实验室 温度控制器（优莱博技术（北京）有限 公司） ；UV1600 紫外可见分光光度计 （西安华辰乐天实验室设备有限公司） ； 实验室用高纯水制备器（北京科誉兴业 科技发展有限公司） ；XSYF-D 实验室 废水处理设备（北京湘顺源科技有限公 司） 。 1.2 色谱柱：奥泰公司 C18 色谱 柱（220mm4.6mm，5m） 。 1.3 对照品：熊果酸 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 1.4 试剂：甲醇（上海盈公生物 技术有限公司） 、磷酸（广州市西陇化 工有限公司） 、冰醋酸（广州市西陇化 工有限公司） 、醋酸钠（利津县东海工 贸有限公司） 、磷酸二氢铵（上海科丰 化学试剂有限公司） 、三乙胺（北京亚 太龙兴化工有限公司） 、乙腈（上海科 丰化学试剂有限公司） 。 1.5 试药：巴中栀子 2 测定方法确定 2.1 色谱条件 依据查阅文献及考查的结果，确 定色谱条件如下。流动相：甲醇-乙腈- 磷酸盐溶液（取磷酸二氢钾 1g，加水 800 毫升溶解，加 1 毫升磷酸，用水稀 释至 1000ml） （585：10）为流动相， 检测波长：210nm，流速：1.0m min- 1。柱温：30。理论板数按熊果酸峰 计算应不得低于 2000。 2.2 对照品溶液的制备 精密称取熊果酸对照品适量，置 容量瓶中，加甲醇制成每 1mL 含 0.2mg -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 的溶液，即得。 2.3 供试品溶液的制备 精密量取供试品，置具塞锥形瓶 中，精密加入甲醇 20mL，密塞，精密 称定重量，超声处理 30 分钟，放冷， 精密称定，用甲醇补足重量，摇匀，滤 过。取续滤液，即得。 2.4 精密度试验 精密称取熊果酸对照品适量，加 流动相使溶解，制成浓度为 0.3mg mL-1 的供试品溶液。照上述色谱条件， 精密吸取 10l，连续进样 6 次，记录峰 面积。结果，RSD=0.73%，表明本方法 精密度良好。 2.5 对照品的线性考察 精密称取适量熊果酸对照品，加 入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升 含 0.1、0.15、0.25、0.35、0.4.、0.45、0.5 5 毫克的溶液。分别精密上述溶液吸取 10L，注人液相色谱仪，依照 2.1 项下 的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 积（Y）为纵坐标，对照品进样量 （X）为横坐标，绘制标准曲线。结果 表明，熊果酸在 0.10.55mg mL-1 范围内呈良好的线性关系。 2.6 重现性试验 称取同一批的栀子样品 6 份，按 测定方法项下的方法制备供试品溶液， 测定含量，并计算样品的 RSD 值，结 果 RSD 为 0.73%，结果表明此方法的重 现性良好。 2.7 准确度试验 取对照品适量，精密称取已知含 量的样品 9 份，置量瓶中，分别精密加 入熊果酸对照品，按项下方法制备成 110%、 120%、130%。取模拟样品照 “含量测定”项下方法试验，计算回收率 为 99.3%，RSD 为 0.85%。 2.8 样品含量测定 依照上述含量测定方法，再按外 标法以峰面积计算样品的含量，结果样 品的含量分别为 0.32 毫克/克、0.35 毫 克/克、0.33 毫克/克。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 3 讨论 分别考察 0.04moloL-1 磷酸二氢 铵溶液-乙腈-三乙胺（6040：0.01） ， 甲醇-乙腈 -磷酸盐溶液（取磷酸二氢钾 1g，加水 800 毫升溶解，加 1 毫升磷酸， 用水稀释至 1000ml） （565：30） ，甲 醇-1%冰醋酸溶液（ 2872） ，甲醇-乙 腈-磷酸盐溶液（取磷酸二氢钾 1g，加 水 800 毫升溶解，加 1 毫升磷酸，用水 稀释至 1000ml） （585：10）不同比 例的流动相，结果以甲醇-乙腈-磷酸盐 溶液（取磷酸二氢钾 1g，加水 800 毫升 溶解，加 1 毫升磷酸，用水稀释至 1000ml） （585：10）为流动相为流动 相，供试品各峰分离效果最好，故选用 甲醇-乙腈 -磷酸盐溶液（取