人类常见血型系统及疑难配血问题的探讨

人类常见血型系统及疑难配血问题的探讨 【摘要】 人类血型系统主要包括红细胞的 ABO、Rh 及亚型，血 小板非特异性和特异性抗原抗体，白细胞抗原抗体等，因其本身的 复杂性常常使配血结果出现诸多的不确定性，总结配血实验过程中 所可能出现的影响因素并加以改进，保证临床输血治疗的顺利进行。 【关键词】 血型系统 亚型 疑难配血 医院输血科每天进行着大量的血型血清学鉴定实验，在这些实验 中，经常会遇到一些血型不能正确判断或交叉配合试验不符合等疑 难问题或者是难以解释的异常实验室结果，导致患者不能得到及时 有效的输血治疗，甚至输注血型不相容的血液或血液成分后发生输 血不良反应。因此，如何正确系统地认识人类常见的血型系统并解 决好血型血清学疑难问题，是对所在输血医学机构业务水平和临床 服务能力的考核和检验，对保障安全有效的输血治疗有着相当重大 的意义。 1 红细胞 ABO、Rh 血型抗原与抗体 1.1ABO 血型抗原与抗体 （1）抗原：ABO 血型系统至少由 3 组基因所控制，即 H 和 h，A1、A2B 和 O，以及 Se 和 se。在没有 H 基因时(定名为 hh)为 H 抗原物质前身物，结果形成 Oh 型(孟买型 )，在这种情况尽管 ABO 基因存在，A 或 B 抗原将不会形成，是因为不存在 A 和 B 抗 原的前身物 H 抗原物质所致。ABO 基因位点位于第 9 对染色体上。 婴儿一般在 18 个月后才充分表现出抗原性。ABO 抗原有两种： 一种是可溶性糖蛋白，存在于体液及血浆中；一种是脂蛋白，存在 于红细胞膜以及其他一些组织细胞上。两种抗原具有相同型的特异 性。 (2)抗体：ABO 抗体可分为天然抗体和免疫抗体，后者又称为同种 抗体。天然抗体是指未经可察觉的抗原刺激而产生的抗体。通常 O 型的血清中多数为 IgG 抗 A、抗 B，而 A 型或 B 型的血清中大多数 为 IgM 的抗 B 或抗 A。 （3）ABO 血型鉴定： 用已知抗体型特异性试剂血清检测红细 胞的抗原，称为正向定型或红细胞定型；用已知血型试剂红细胞检 测血清中的抗体则称为反向定型或血清定型。O 型血清中的抗 A、B，在测定 A 或 B 亚型中具有重要地位。当区分 A1 和 A2 时， 可用抗 A1 血清。在反向定型中，一般用 A1、B 和 O 型红细胞。O 型红细胞用于检查不规则抗体。当怀疑有抗 A1 时，必须用 A2 试剂 红细胞鉴定。 （4）ABO 亚型特点： ABO 血型亚型的常规分型鉴定为血清学 方法，这种分型方法理论依据是以红细胞表面抗原表位的多少及活 性的强弱，以及该红细胞对相应抗体的吸收、放散能力大小来分型 的。对于多特异性和单特异性抗 IgG 抗人球蛋白试验，出现凝集现 象，需每个红细胞至少要包被 200500 个 IgG 分子才能被检测出来。 ABO 血型亚型红细胞之所以有时不发生肉眼可见的凝集，只是红细 胞上的抗原表位较少所致。流式细胞术法检测 ABO 血型亚型时应 用标记荧光素的抗 A、B 直接结合到具有相应抗原的红细胞上，较 之传统的吸收放散试验，具有简便、快速、结果客观、重复性好、 其灵敏度、特异性都较强的优点，较好地显示抗原含量的多少。 1.2 Rh 血型抗原与抗体 （1）抗原：在 Rh 血型中 D 抗原性最强。常规情况下，临床输血 前检测只进行 RhD 鉴定。倘若检测某一个体 RhD 血型阴性时，须 进一步鉴定 C、E、C 和 E 抗原表达情况。如配血试验中发现有不规 则抗体存在等情况下，也须进行 C、E、C 和 E 抗原检测。 （2）抗体：由于在 Rh 血型中，抗 D 是血清中最常见的免疫性 抗体，为 IgG 性质，在血型系统中 IgG 抗 D 与其他抗体不会产生补 体瀑布式反应。在抗人球蛋白介质和酶介质中呈现较强反应。少数 抗 D 血清含有 IgM 抗体，但总伴有 IgG 抗体。这些 IgM 的抗 D 血 清能在盐水介质中与 Rh 阳性细胞出现凝集。抗 C 可免疫性产生， 也可天然产生。抗体性质可以是 IgG，也可以是 IgM。大约 30的 血清中既含抗 D，又含抗 C。抗 C、抗 D 有时可引起严重的新生儿 溶血病。通常情况下抗 C 携带者输血应输注红细胞 C 抗原阴性的血 液制剂。抗 E 大多数为天然存在，是引起溶血性输血反应的常见 抗体，较少引起新生儿溶血病。抗 E 一般是 IgG 抗体，但仍有极少 数人群具有 IgM 性质的抗体。红细胞 D 抗原阳性随机人群中有 62为红细胞 E 抗原阴性，并且部分红细胞 D 抗原阴性的个体红细 胞 E 抗原也阴性。通常抗 E 与抗 C 同时存在。对红细胞 E 抗原阴性 患者检测抗 E 时，必须排除抗 C 存在的可能性。抗 E 携带者输血需 输注红细胞 E 抗原阴性的悬浮红细胞或全血。抗 C 通常是 IgG 性 质，也是常见的免疫抗体之一。可引起严重的溶血性输血反应或新 生儿溶血病。大部分红细胞 C 抗原阴性者也可红细胞 E 抗原阴性， 因此，对红细胞 C 抗原阴性患者检测抗 C 时，必须排除抗 E 存在的 可能性。抗 C 携带者输血需输注红细胞 C 抗原阴性的悬浮红细胞或 全血。抗 E 不常见，但可引起严重的溶血性输血反应或新生儿溶 血病。抗 E 也是最易引起自身免疫性溶血性贫血的特异性 IgG 自身 抗体。对具有抗 E 的患者输血需输注红细胞 e 抗原阴性的悬浮红细 胞或全血。 1.3 红细胞的其他血型系统 （1）MNS 血型系统；（2）P 血型系统；（ 3）Lewis 血型系统； （4）Kell 血型系统；（5）Lutheran(Lu)血型系统；（6）Duffy 血型 系统；（7）Kidd(JK)血型系统。 2 血小板抗原与抗体 2.1 血小板抗原 （1）血小板非特异性抗原：红细胞 ABO 血型系统的抗原：从 人类血小板上能检测出少量红细胞 A 抗原和 B 抗原，与其红细胞 ABO 血型抗原一致。它们可能与人类白细胞抗原(HLA)相同，是从 血浆中吸附上去的。现证明血小板表面存在 ABO、Lewis 、I、i 和 P 等抗原，但缺乏 Rh、Duffy 、Kell 等系统的抗原。HLA类的 抗原：HLAA 和 B 位点的抗原也可出现在血小板膜上。血小板上 HLA 抗原也是吸附于血小板表面，而不是血小板膜的一个组成部分。 已经证明血小板上存在从血浆中吸附的 HLAA、HLAB 与 HLAC 抗原，均属 HLAI 类抗原。 （2）血小板特异性抗原：血小板特异性抗原是位于血小板膜糖 蛋白(GP)上的抗原表位，是血小板膜的一部分，也是血小板本身固 有的抗原。血小板抗原可应用相应的同种血小板抗体来鉴定。 2.2 血小板抗体 由于反复输注血小板，患者的血清中可产生血小板相应抗原刺激 后抗体，当再输入血小板后，就会产生血小板抗原和抗体的免疫反 应，引起输入血小板的迅速破坏，使得患者血小板计数不仅不升高， 反而有时会减低。输血小板后产生的同种抗体主要是针对血小板特 异性抗原和 HLA 抗原。在多次输血患者中，约有 8产生血小板特 异性抗体。抗体产生的频率主要取决于输注的次数。输注次数越多， 抗体产生的频率就越高。 3 人类白细胞抗原及抗体 3.1 人类白细胞抗原与抗体 （1）人类白细胞抗原：人类白细胞抗原是一个共显性遗传系统， 即每个基因所决定的抗原都在细胞膜上表现出来。HLA 系统的一个 重要特点是不同位点上的等位基因间存在明显的连续不平衡，即实 际观察到的某两个基因出现在同一条单倍型上频率与预期值有一定 差异。 HLA 系统的 A、B、C、DR 和 DQ 位点上的抗原可用血清学方法 检出，一般应用微量淋巴细胞试验，而 D 和 DP 位点抗原可用细胞 培养方法检出。到目前为止，HLA与类抗原均可应用基因进 行检测。 （2）人类白细胞抗体：单一的 HLA 基因产物含有几个抗原决定 簇可以刺激产生不同的同种抗体。临床上人类白细胞抗体由输血、 妊娠或器官移植等免疫产生。根据同种表位可以把同种抗体分为两 类：一类仅与一种 HLA 基因产物反应的抗体；另一类则是能与不止 一种 HLA 基因产物结合的抗体。HLA 抗体的免疫球蛋白类别多数 为 IgG，少数为 IgM。 3.2 人类粒细胞抗原与抗体 （1）人类粒细胞抗原：在中性粒细胞上还存在着特异性同种抗 原，称为人类粒细胞抗原(HNA)，它具有遗传的多态性。目前通过 核酸技术发现 9 个抗原分别是：HNAla、HNA1b、HNA 1c、HNA2a 、HNA2b、HNA 4a、HNA4b、HNA 5a、HNA5b。这些抗原都受控于显性遗传基因。 （2）人类粒细胞抗体：机体受人类粒细胞抗原刺激可产生人类 粒细胞抗体，可导致输血后发热反应、新生儿同种免疫性粒细胞减 少症、自身免疫性中性粒细胞减少症和输血相关性急性肺损伤等1。 4 ABO 和 Rh 定型试验中常见问题 4.1 正定型出现的问题 （1）红细胞致敏：受免疫球蛋白致敏的红细胞，在含高蛋白介 质的试剂中，可发生凝集反应。 （2）ABO 亚型与变异型： ABO 亚型检查中， A、B 抗原可能为 弱抗原，难以检出。另外，在 ABO 变异型如孟买型 (Oh)，类孟买型、 CisAB 型等往往导致正反定型不符合。 （3）近期输血：试验前曾输入与患者 ABO 不同血型的血液，使 血液标本成为 ABO 血型不同的红细胞混合物，定型时显示“ 混合外 观凝集”现象。 （4）嵌合体血型：这种血型者体内有 2 群红细胞群体，定型时 可以出现“混合外观凝集” 现象。 （5）疾病因素导致抗原减弱：某些白血病患者和难治性贫血患 者中，ABO 血型系统的抗原可受到抑制，抗原性减弱导致检出困难。 （6）红细胞多凝集现象：红细胞因遗传或获得性的表面异常， 发生多凝集现象。获得性 B：由于革兰阴性菌的作用，如 O86 大肠 埃希菌大量感染的患者红细胞可获得“类 B”的活性。 （7）血型特异性物质过高：一些卵巢囊肿病例，血型物质的浓 度很高，可中和抗 A 和抗 B 定型试剂，要得到正确的正定型结果， 必须洗涤红细胞多次。 （8）异常的血浆蛋白：受检者血浆中的白蛋白、球蛋白比例异 常，高浓度的纤维蛋白原等问题，能导致缗钱(串) 状形成，造成假 凝集现象。 （9）药物等因素：药物、右旋糖酐70 及静脉注射某些造影剂 可引起红细胞聚集，导致假凝集。抗 A、抗 B 定型试剂的质量不符 合国家标准，往往导致正定型出现假阴性结果，特别是 ABO 亚型抗 原鉴定时会有差异。 4.2 反定型出现的问题 （1）血清异常：脐血中的华通胶或血清蛋白引起缗钱(串) 状形成， 影响反定型结果。 （2）近期内大量的血浆置换治疗：由于使用大量的 ABO 不同型 的血浆做置换治疗，标本血清中含有供体血的抗 A 或抗 B 抗体，造 成假凝集现象。 （3）意外抗体的存在：受检者血浆中含有 ABO 血型抗体以外的 不规则抗体，与 A、B 型试剂红细胞上的抗原发生阳性反应。 （4）低丙种球蛋白血症：低丙种球蛋白血症的患者，可能会因 免疫球蛋白水平全面下降而使血清定型时不发生凝集或凝集反应减 弱。 （5）年龄因素：在尚未产生 ABO 抗体的婴儿，或由母亲被动获 得抗体的婴儿，或抗体效价下降的老年人，试验时可出现异常的结 果。 （6）防腐剂因素：患者可能含有对防腐剂中的成分或对混悬介 质的抗体，导致 ABO 定型差错。 ABO 正反定型不一致时血清学试验必须在正定型试验中增加抗 A1，抗 A、B，必要时可增加抗 H 的反应；反定型时增加 A2 型红 细胞、自身红细胞的反应。结合上述可能导致正反定型不一致的原 因综合分析，必要时可结合吸收放散试验、中和抑制试验、抗体增 强技术，甚至家系调查等以获得正确的 ABO 定型结果。 4.3Rh 定型试验中应注意的问题 常规情况下，红细胞只做 RhD 定型，当有特殊理由时，例如家系 调查、父权鉴定、产前检查时需要确定纯合子或杂合子，以及配血 试验中发现有不规则抗体存在等情况下，才需要做 Rh 血型抗原全 部表型定型。特别是 e 抗原定型，因抗 e 试剂血清来源困难而较少 使用，在大多数情况下，不经试验即可推测出 E 抗原阴性的细胞是 e 阳性的。 Rh 定型主要鉴定 D 抗原，注意必须要有严格的对照试验，包括抗 原的阴、阳性对照以及试剂对照试验，才能避免假阳性和假阴性， 正确地获得定型结果。 （1）导致 Rh 血型鉴定可能出现假阳性的原因：直抗阳性的标本 往往是 ABO 血型错输或自身免疫性溶血性贫血患者的标本，使用 IgG 类 Rh 抗体时可导致假阳性的结果。这些患者的红细胞必须做放 散试验，直到直抗试验为阴性才可以做 Rh 血型鉴定或使用