巨噬细胞与癌症

巨噬细胞与癌症作业读后感 -药剂 1005 班 11 号薛胜爽 1 人类单核细胞系包含哪些细胞？各自特点是什么？ 单核吞噬细胞系统的细胞，有骨髓中的定向干细胞、原单核细胞、幼单核细胞，血液内的 单核细胞和多种器官中的巨噬细胞。后者包括结缔组织的巨噬细胞，肝的 Kupffer 细胞， 肺的尘细胞，淋巴结和脾的巨噬细胞，胸膜腔和腹膜的巨噬细胞，神经组织的小胶质细胞 以及骨组织的破骨细胞等。它们的特点是均来源于血中的单核细胞，细胞核为单个，细胞 膜表面具有抗体和补体的受体，有活跃的吞噬作用等。 单核吞噬细胞系统的功能，除吞噬、清除异物和衰老伤亡的细胞外，巨噬细胞在免疫应答 中还具有重要作用：它是主要的抗原呈递细胞，在免疫应答的起始阶段，巨噬细胞能捕获 和处理抗原，巨噬细胞能把抗原最具特征性的分子基因(抗原决定基) 予以保留，并与巨噬 细胞自身的 MHC-II 类分子结合，形成抗原肽-MHC 分子复合物，将抗原肽呈递给 T 细胞， 促进免疫应答，故巨噬细胞是抗原呈递细胞(antigen presenting cell, APC)；在免疫应答的 效应阶段，它又能聚集于病灶周围，成为破环靶细胞和吞噬细菌的重要成分。此外，此系 统还具有分泌多种生物活性物质(如溶菌酶、补体、肿瘤生长抑制因子) 等功能。 2 什么是 M1,M2 型巨噬细胞？这两类细胞对肿瘤细胞的作用分别是 什么？ M1 型巨噬细胞诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide )表达和活性水平较未刺激组明 显升高,IL-12 产生显著增加,CD16/32 表达上调;而 M2 型巨噬细胞 I 型精氨酸酶(Arg-1)的表 达水平和酶活性较未刺激巨噬细胞显著提高,IL-10 分泌轻度增加,并且表达高水平的 CD206 和 DECTIN-1。巨噬细胞主要可分为 M1 型即经典活化的巨噬细胞和 M2 型即替代性活化 的巨噬细胞在体外培养条件下,通过 IFN- 及脂多糖诱导产生 M1 型巨噬细胞和通过 Th2 型 细胞因子(如 IL-4、IL-13 等) 诱导产生 M2 型巨噬细胞, 具有与体内极化的巨噬细胞相似的表 型和功能,已成为研究巨噬细胞异质性的重要手段。在机体不同生理和疾病状态下, 巨噬细 胞表现出不同的类型,通过表型分析鉴定巨噬细胞类型已成为研究巨噬细胞功能多样性的主 要方法。已有文献主要从精氨酸代谢途径5,6、细胞因子分泌7,8和表面分子的表达9,10 等方面区分 M1 型与 M2 型巨噬细胞。然而,到目前为止, 关于 M1 和 M2 型巨噬细胞的表型 特征尚未统一。为了评价各种表型指标及其意义,我们参照公认的经典的方法在体外诱(M2 巨噬细胞是如何促进肿瘤发展的这已在体内模型中得到验证,依靠体外仿真模仿 TAM 促进 肿瘤进展的模型， ，MDM 分化成 M1 型巨噬细胞后显现出更强的肿瘤杀伤活性，M2 型巨 噬细胞促进肿瘤的作用要在有血清培养条件下 MDM 分化后才能获得。此外，在无血清条 件下 MDM 吞噬活性评价结果相比，M2 的吞噬活性强于 M1 型巨噬细胞。因此，研究数据 证实 M2 型巨噬细胞在体外具有肿瘤促进作用，提示开发靶向 TAM 的癌症治疗手段是有依 据的 3CSF-1 与巨噬细胞的分化有什么关系？对肿瘤育后有什么影响？ 可转染非分裂细胞的腺病毒将与 M 功能密切的巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和 型干 扰素(IFN-)基因转入其中, M-CSF 除了维持巨噬祖细胞的存活、增殖、分化外，对成熟 M 的功能具有调节作用；IFN- 是目前知道的活性最强的 M 活化因子(MAF)。我们曾将 M-CSF 和 IFN- 基因单独或联合转入 M，结果显示联合基因转染组的效应功能和抗原提 呈功能较单基因转染组显著增强。为了探讨联合转染的 M 的抗肿瘤作用，本研究中，我 们选用肿瘤抗原触发的 M-CSF 和 IFN- 基因转染的 M 治疗实验性肺转移黑色素瘤小鼠， 观察了其体内疗效并检测了经治疗后荷瘤小鼠 CTL 活性变化。 GM-CSF 对某些实体瘤细胞具有杀伤作用已被许多实验证实 8，9 。本研究结果显示不同浓 度的 GM-CSF 对 A549 细胞均有杀伤作用，并呈剂量依赖性方式。尽管其杀伤效力不及化 疗药物 VP16，但作为细胞因子仍具有十分重要的临床价,GM-CSF 对肿瘤细胞杀伤效应除 细胞溶解 10、增殖抑制 11作用外，还可能与诱导凋亡有关。 巨噬细胞杀肿瘤的重要方式是分泌 NO、TNF、H2O2 等多种细胞毒效应分子。H2O2 的形成必需 SOD 催化，因此，检测肺癌患者 AM 产生 NO、TNF、SOD 活性高低在一定 程度上反映肺癌患者抗肿瘤免疫功能的强弱。本研究显示，肺癌患者 AM 经 GM-CSF 刺激 后 iNOS 表达增强，其培养上清液中 NO、TNF 水平明显升高，说明 AM 抗肿瘤活性可被 GM-CSF 刺激而增强；SOD 活性升高无统计学意义，提示 GM-CSF 刺激 AM 产生各种效 应分子的能力具有不均一性 GM-CSF 对某些实体瘤细胞具有杀伤作用已被许多实验证实 8， 9。本研究结果显示不同浓度的 GM-CSF 对 A549 细胞均有杀伤作用，并呈剂量依赖性 方式。尽管其杀伤效力不及化疗药物 VP16，但作为细胞因子仍具有十分重要的临床价值。 GM-CSF 对肿瘤的杀伤机制目前尚不甚清楚。我们在研究中发现，经 GM-CSF 处理的 A549 细胞出现典型的细胞凋亡形态改变，进一步研究与之相应的生化基础，显示有 DNA 梯状物形成，提示 GM-CSF 对 A549 细胞有诱导凋亡之作用。由此推测，GM-CSF 对肿瘤 细胞杀伤效应除细胞溶解 10、增殖抑制 11作用外，还可能与诱导凋亡有关。 4NF-kb 与 iNos-TNF 关系是什么？ NFk 与 TNF 抗前列腺癌作用的关系。方法：合成全硫代修饰的双链寡核苷酸 BNFkB 抑制剂；培养人前列腺癌细胞 PC3 和成纤维细胞 L929，休外分析，NFkB 抑制剂对 TNF 细胞毒作用的影响。制作 PC3 细胞裸鼠动物模型，瘤块直径达 4mm 时，肌注含有 94 个氨基酸的前列腺分泌蛋白（PSP94）和肿瘤坏死因子衍生物 11a 融合基因的 pcDNA- PSP94-TNFD11a 真核表达质粒 DNA，50g/只，给药一次；肌注 NFkB 抑制剂 5mol只，连续给药 10d。设生理盐水和环磷酰胺对照组、pcDNA-PSP94 和 pcDNA- PSP94-TNF D11a 质粒 DNA 组、NF kB 抑制剂组。结果以 PC3 及 L929 为靶细胞、 NFkB 抑制剂 TNF 的细胞毒作用无明显影响。动物实验结果显示，pcDNA-PSP94-TNF D11a 和 NF kB 抑制剂联合 组抑瘤率为 36，是 pcDNA-PSP94-TNFD11a 组的 18 倍，pcDNA-PSP94 组与 pcDNAPSP94NFkB 抑制剂组、NFkB 抑制剂组与生 理盐水组肿瘤大小均无明显差别。结论 NFkB 抑制剂在体内可明显增强 TNF 的抗前列腺 癌作用。 5 巨噬细胞是如何影响肿瘤细胞生成的？ .肿瘤组织中的巨噬细胞,即肿瘤相关巨噬细胞的关系以及在肿瘤中发挥的多种功能正被深 入的研究.肿瘤相关巨噬细胞不同的活化状态决定了其在肿瘤中是发挥抗肿瘤作用或促肿瘤 作用.一方面,TAM 可以通过吞噬、杀伤肿瘤细胞以及递呈肿瘤相关抗原发挥免疫监视和抗 肿瘤作用;另一方面,TAM 可以通过释放许多趋化因促进肿瘤生长和血管生成, 并且可以降解 基质促进肿瘤侵袭和转移. 巨噬细胞至少可以被分为两种类型:M1 型,即经典活化的巨噬细 胞 和 M2 型,即替代性活化的巨噬细胞 (Alternatively activated macrophage).M1 型巨噬细 胞在细菌或其产物脂多糖,可能是癌