肾炎康复片对糖尿病肾病早期患者尿足细胞标志蛋白podocalyxin的影响

肾炎康复片对糖尿病肾病早期患者尿足细胞顶端膜蛋白肾炎康复片对糖尿病肾病早期患者尿足细胞顶端膜蛋白 Podocalyxin 的影响的影响 武文斌 杨帅帅 (山东省潍坊市益都中心医院肾脏科 262500) 【摘要】目的目的 观察肾炎康复片对糖尿病肾病早期患者尿足细胞顶端 膜蛋白 Podocalyxin(PCX)的影响,以期阐明其部分治疗机理。方法方法 对 32 例糖尿病肾病早期患者服用肾炎康复片治疗(每日 3 次，每次 5 粒)疗程为 3 个月。在治疗前和治疗 3 个月后分别监测尿足细胞顶 端膜蛋白(PCX)、尿蛋白肌酐比值(ACR)、N-乙酰-氨基葡萄糖 苷酶（NAG） 、可滴定酸(TA)、铵(NH4+)，然后对治疗前后进行疗效评 价。结果结果 治疗 3 个月后，尿 PCX 较治疗前有非常显著降低 （P0.05） 。结论结论 肾炎康复片对 糖尿病肾病早期患者足细胞损伤有保护作用，从而有效减少蛋白尿, 保护近端肾小管；但对远端肾小管影响不明显。 【关键词】糖尿病肾病；早期；肾炎康复片；尿足细胞顶端膜蛋白 Effect of Shenyankangfu Tablet on Podocalyxin in patients With early Diabetic Nephropathy Wuwenbin,yangshuaishuai (Yidu Centre Hospital of Weifang City in Shandong Province,Weifang 262500) 【Abstract】Objective Observing the effect of shenyankangfu tablet on Podocalyxin in patients with early Diabetic Nephropathy to clarify partial therapeutic mechanism.Mathods Give 32 of patients with early Diabetic Nephropathy shenyankangfu tablet to treat for 3 months（5 tablet thrice daily）.To detect the urinary podocyte apical membrane protein (PCX), Urine protein creatinine ratio（ACR）,Immunoglobulin G (IgG),N-acetyl-D-glucosaminidase (NAG), Titratable acid (TA), Ammonium (NH4+) before treatment and after 3 months of treatment，then evaluate the efficency of before and after treatment.Result Aftertreatment for 3months, PCX were very significantly dereased（P0.05).Conclusions shenyankangfu tablet on patients with early Diabetic Nephropathy podocyte injury has a protective effect, thus effectively reducing proteinuria and protecting the proximal tubule, but have no effect on the distal tubule. 【Key words】Diabetic Nephropathy ,early,shenyankangfu tablet; urinary podocyte apical membrane protein 糖尿病在我国的发病率逐年升高，糖尿病肾病是其主要并发症， 也是引起死亡的主要原因1。足细胞是组成肾小球滤过膜的主要成 分，也是阻止大分子物质滤过的屏障，其肾脏受损时，足细胞表现 为足突融合、收缩、胞体缩小等变化，继而与血管基底膜剥离，脱 落至肾小囊中，随尿液排出2。足细胞脱落后大量蛋白质自肾小球 渗漏，导致毛细血管袢透明变性，最终导致肾小球硬化3。足细胞 表面覆盖一层称为 Podocalyxin(PCX)的顶端膜性蛋白4。新近表明 4尿液 PCX 是糖尿病肾病最早期的病理改变。为此我们观察了糖尿 病肾病早期患者服用肾炎康复片前后尿液 PCX 及相关指标的变化， 以期阐明其部分治疗机理。 1 资料和方法 1.1 一般资料 32 例患者均为我院 2009 年 2 月2011 年 10 月门诊就诊的糖尿 病肾病早期患者，其中男 23 例，女 9 例，年龄 4059 岁，平均 （4411.7）岁，均符合 1999 年 WHO 糖尿病诊断标准，尿白蛋白/ 肌酐比值(ACR)在 30300mg/g 之间,血压、肾功能正常、无泌尿系 统感染、心、脑血管病。 1.2 治疗方法 所有患者均保持原有胰岛素等治疗不变,在此治疗基础上加服肾 炎康复片（天津同仁堂集团股份有限公司） ，每日 3 次，每次 5 粒， 疗程为 3 个月。 1.3 观察方法 对符合条件的 32 例患者，治疗前及肾炎康复片治疗 3 月后分别留 尿进行足细胞顶端膜蛋白 PCX、ACR、乙酰 氨基葡萄糖苷酶 （NAG） 、可滴定酸(TA)、铵(NH4+)检测。 1.4 仪器与试剂 1.4.1 尿 PCX、NAG 采用 ELISA 法,酶标仪应用美国产 Micro Reder 4 型,试剂由太阳公司提供。 1.4.2 TA、NH4+采用上海医疗设备厂生产的 ZD-2 型自动电位滴定仪 测定,方法同许国章等5使用的方法。 1.4.3 ACR 采用比色法，应用日本生产的日立-7600 型生化检测 仪测定。 1.5 统计学处理 实验数据用样本均数标准差(xs) 表示，统计分析采用 t 检验，应用 SPSS17.0 for Windows 统计软件处理。以 P0.05 为有 统计学意义。 2 结果 2.1 糖尿病肾病早期患者治疗前后尿相关指标的变化比较见表 1 糖尿病肾病早期患者治疗后尿 PCX 较治疗前有非常显著的降低 (P0.01);尿 ACR、NAG 较治疗前有明显降低(P0.05)；尿 TA、NH4+治疗后有所升高，但治疗前后比较无统计学意义（P0.05） 。 表 1 糖尿病肾病早期患者治疗前后尿相关指标的变化比较表(xs) 3 讨论 糖尿病肾病是糖尿病常见的并发症，糖尿病导致的肾脏损害几乎 可累及肾脏所有结构，并且一旦出现肾功能损害，其进展速度远快 于非糖尿病肾病患者。随着社会经济发展和生活方式的改变，尤其 人口老龄化进程的加速，糖尿病肾病已成为影响人类健康的一个重 大问题 6。糖尿病肾病治疗的关键在于早期发现和治疗，而目前反 映肾功能损害的指标如肾小球滤过率、血清肌酐、血清尿素氮、内 生肌酐清除率等敏感性较差，不能早期发现肾功能异常，对肾功能 障碍的早期诊断和治疗的临床指导价值不大。 足细胞紧贴在肾小球毛细血管的外面，有很长的突起，相互交错 对插，在突起之间形成滤过裂隙，表面覆盖一层滤过裂隙膜，膜上 有 411nm 的小孔，是滤过膜的最后一道屏障,也是肾小球中最易受 组别 例数 PCX (mg/l) ACR (mg/g) NAG (g/g) TA (mmol/l) NH4+ (mmol/l) 治疗前 32 6.110.72332.1287.9257.6218.2717.9911.7329.6915.34 治疗后 32 4.910.49202.5479.9932.8112.1619.0411.5431.3312.57 t2.80632.45382.2880.1480.179 p0.010.050.050.050.05 到伤害的细胞部分7。PCX 是存在于足细胞细胞膜和裂隙膜表面的 一层特异性唾液酸糖蛋白，带有负电荷, 是阻止大分子蛋白滤过的 重要电荷屏障，为特异的足细胞标志蛋白6，7。 以往认为足细胞损伤是糖尿病肾病蛋白尿导致的继发性改变，但 近年研究显示在糖尿病肾病早期，足细胞的结构和功能就已经受到 损害 8。有研究发现足细胞的脱落在出现尿蛋白之前，是肾病最早 期的病理改变,当糖尿病患者足细胞受损伤后,尿沉渣中检测到 PCX 含量明显增加,且与血糖水平存在密切关系9，10。由此可见，可通 过检测尿 PCX 水平来反映糖尿病肾病患者足细胞的功能状况，对糖 尿病肾病进行早期诊断。 本研究中，32 例糖尿病肾病早期患者经肾炎康复片治疗后，尿 PCX、ACR 指标均较治疗前明显降低，治疗前后比较有统计学意义。 由此表明,肾炎康复片能够通过修复糖尿病肾病早期患者足细胞顶端 膜蛋白 PCX 的功能,部分改善电荷屏障的作用,减少白蛋白排泄，但 具体作用机制尚不清楚。 NAG 是一种高分子量（约 130KD）的溶酶体酶，在近端肾小管上 皮细胞中含量特别丰富。正常情况下，尿中的蛋白以胞饮方式进入 细胞和溶酶体，形成次级溶酶体，将蛋白分解为氨基酸重新返回血 液循环，每日只有少于 20%以胞外分泌方式进入肾小管腔。由于 NAG 分子量较大，血液中的 NAG 不能通过肾小球滤过，仅能通过肾小管 上皮细胞以胞吐的形式向尿中分泌少量的 NAG，过多的白蛋白可以 激活肾小管上皮细胞内的溶酶体酶，使尿中 NAG 增高，可以作为早 期诊断近端肾小管损伤的灵敏指标。但由于血 NAG 不能通过肾小球 滤过，因此尿 NAG 只能作为近端肾小管损伤的指标，而非肾小管重 吸收的指标6。本研究中，32 例糖尿病肾病早期患者经肾炎康复片 治疗后，尿 NAG 指标均较治疗前明显降低，治疗前后比较有统计学 意义，表明肾炎康复片可有效保护糖尿病肾病早期患者近端肾小管 的功能，结合 PCX、ACR 结果综合考虑其保护机制可能与尿白蛋白的 减少有关。 尿 TA 和 NH4这两种检测数据主要是反映肾小管的酸化功能，尿 TA 和 NH4异常，说明肾小管酸化功能障碍，也代表远端肾小管功能 损害程度11。本研究对肾炎康复片治疗前后，尿 TA 和 NH4进行对 比发现，两者治疗后均有所升高，但治疗前后比较无统计学意义。 表明肾炎康复片对远端肾小管无明显作用。 综上所述，肾炎康复片对糖尿病肾病早期患者足细胞损伤有保 护作用，从而有效减少蛋白尿,保护近端肾小管；但对远端肾小管无 影响。 参考文献 1.杨琪，汪建国，潘涛，等. Synaptopodin 在肾小球病变中的表达 研究J.中国组织化学与细胞化学杂志，2004，13（4）：487. 2.成丽岚，郑少雄，等. 足细胞损伤与糖尿病肾病的研究进展J. 医学综述，2008，14（3）：412- 413. 3.Schieppati A，Remuzzi G. The future of renoprotection：Frustration and ProtmisesJ. KidneyInt，2003，62（4）：1947- 1955. 4.司徒瑞儒，何卓雄 尿液足细胞顶端膜蛋白 podocalyxin 在糖 尿病肾病早期诊断中的意义J 中国现代医生杂志，2010，48( 21) : 101-102 5.许国章，钟路，陈天善，等.309 例成年人尿酸化功能指标的检测 J.中华肾脏病杂志，1988,4（2）：73-76. 6.黎磊石，刘志红.中国肾脏病学M.北京：人民军医出版社， 2008.626. 7.Pavensta HDT,Kriz W,Kretzler M.Cell biology of the glomerular podocyteJ.Physiol Rev,2003,83(1):253-307 8.谌贻璞，余学清.肾内科学M.北京：人民卫生出版社，2008,71. 9. HaraM,Yanagihara T,Kihara I, et a.l Apical cellme