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文档简介

根据微孔堵塞的程度,将分为完全堵孔可不完全堵孔两种。堵孔判断:当检测器小孔管的微孔完全阻塞或 泵管损坏时,血细胞不能通过微孔而不能计数,仪器在屏幕上显示“CLOG”,为完全堵孔。而不完全堵孔 主要通过下述方法进行判断:1 观察计数时间;2 观察示波器波形;3 看计数指示灯闪动;4 听仪器发出的 不规则间断声音等进行判断。 流式细胞仪的结构可分为流动室及液流驱动系统,激光光源及光束成形系统,光学系统,信号检测与存贮、 显示、分析系统,细胞分选系统等五个部分。 按照美国 1992 年版 NSF49 标准,生物安全等级 1 级(P1)的媒质是指普通无害细菌、病毒等微生物;生 物安全等级 2 级(P2)的媒质是指一般性可致病细菌、病毒等微生物;生物安全等级 3 级(P3)的媒质是 指烈性/致命细菌、病毒等微生物,但感染后可治愈;生物安全等级 4 级(P4)的媒质是指烈性/致命细菌、 病毒等微生物,感染后不可治愈。 显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统,是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大 成像,供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜, 而焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。被观察物体位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后 成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作第二级放大, 得到最大放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明 视距离处。 血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体,其电阻值大于稀释溶液的电阻值;当血细胞通过检测 器的孔径感受区时,检测器内外电极之间的恒流源电路的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号;脉冲信号 数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞大小成正比。 一般肉眼可见在培养液中形成白色或浅黄色飘浮物;倒置显微镜下可见于细胞之间悬浮飘荡在培养液中的 纵横交错穿行的丝状、管状及树枝状菌丝或卵圆形单细胞真菌,为霉菌污染。 培养液短期内颜色变黄并 出现明显混浊现象;倒置显微镜下观察,可见培养液中有大量细小的圆球状颗粒飘浮,有时在细胞表面和 周围有大量细菌存在,为细菌污染。 生物安全实验室竣工后,投入使用前,生物安全柜已安装完毕; 生物安全柜被移动位置; 对生 物安全柜进行检修; 生物安全柜更换 HEPA 过滤器后; 生物安全柜一年一度的常规检测。 分立式自动生化分析仪按手工操作的方式编排程序,并以有序的机械操作代替手工操作,用加样探针将样 品加入各自的反应杯中,试剂探针按一定时间自动定量加入试剂,经搅拌器充分混匀后,在一定条件下反 应。反应杯同时作为比色杯进行比色测定。各环节用传送带连接,按顺序依次操作,故称为“顺序式”分 析。 数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式,给每种细菌的反应模式赋予一 组数码,建立数据库或编成检索本。通过对未知菌进行有关生化试验并将生化反应结果转换成数字(编码) ,查阅检索本或数据库,得到细菌名称。其基本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生 化反应出现的频率总和。 即高效空气过滤器(high-efficiency particulate air filter, HEPA filter)。绝大多数 HEPA 过滤器 采用特殊防火材料制成框架,框架内被波纹状的铝片分隔成栅状,里面填充乳化玻璃纤维亚微粒。HEPA 过滤器的过滤效率可达 99.99%100%,是生物安全柜的主要生物防护结构。 光的吸收定律即朗伯-比尔定律,是比色分析的基本原理,表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液 层厚度之间的定量关系。其内容是:当用一束单色光照射溶液时,其吸光度 A 与液层厚度 b 及溶液浓度 c 的乘积成正比。即 A=kbc。 朗伯比尔定律的适用条件为:入射光为单色光。波长范围越大,单色光纯度越低,对朗伯-比耳定律的 偏离越大;溶液中邻近分子的存在并不改变每一给定分子的特性,即分子间互不干扰。当溶液浓度很 大时,由于溶液分子的相互干扰,该定律不再成立。 直接加热,加热组件环绕所有外夹套,能均匀加热并用玻璃纤维绝缘包绕;箱体不需注水、排水,无 溢出或缺水警报;CO2 取样口处于箱体的前部;与水套式相比重量较轻;采用过温保护系统,当温 度过高可自动切断电源;可选配 HEPA 过滤系统,箱体内气体每分钟被过滤一次,快速达到 100 级气体 质量,能为细胞提供理想环境。 常见堵孔原因与处理:1 仪器长时间不用,试剂中水分蒸发,盐类结晶堵孔,可用去离子水浸泡,完全溶 解后,按 CLEAN 键清洗;2 未梢采血不顺或用棉球擦拭微量取血管;3 抗凝剂量与全血不匹配或静脉采血 不顺,有小凝块;4 小孔管微孔蛋白沉积多,需清洗;5 样品杯未盖好,空气中的灰尘落入杯中。后四种 原因,一般按 CLEAN 键清洗,如果不行须按说明书卸下检测器进行清理。 当某类细胞的特性与要分选的细胞相同时,流式细胞仪就会在这类细胞形成液滴时给含有这类细胞的液滴 充以特定的电荷,带有电荷的液滴向下落入偏转板间的静电场时,依所带电荷的不同分别向左偏转或向右 偏转,落入指定的收集器内,不带电的液滴不发生偏转,垂直落入废液槽中被排出,从而达到细胞分类收 集的目的。 分立式与连续流动式自动生化分析仪在结构上的主要区别为:前者各个样品和试剂在各自的试管中起反应, 而后者是在同一管道中起反应;前者采用由加样器和加液器组成的稀释器来加样和加试剂,而不用比例泵; 前者一般没有透析器,如要除蛋白质等干扰,需另行处理。前者恒温器必须能容纳需保温的试管和试管架, 所以比连续流动式分析仪的体积要大。 普通 PCR 扩增仪的操作通常为打开电源,仪器自检,设置温度程序或调出储存的程序,运行即可。定量 PCR 扩增仪的操作一般都是先打开 PCR 仪电源,再打开相连电脑中的相应软件,分别设置温度程序、采集 通道,并可根据不同仪器的要求进行一些特殊设置,在仪器中放好 PCR 管,盖好仪器,运行设置好的反应 程序。关机时通常先关软件,再关 PCR 仪,最后关电脑。 密度区带离心法又称为区带离心法,是样品在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀或沉降平衡,在一定离心 力下把颗粒分配到梯度液中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。速率区带离心方法是根据分离的 粒子在离心力作用下,在梯度液中沉降速度的不同,离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度 层内形成几条分开的样品区带,达到彼此分离的目的。 所有要转移的物品被放入缓冲室后,关闭外门;按下“Cycle Start”钮即可进行自动去除缓冲室中的氧 气。经循环换气的三个气体排空阶段和两个氮气净化阶段,使缓冲室气体达 98的无氧状态,再经缓冲 室气压平衡,操作箱与缓冲室平衡,厌氧状态灯显示为 ON,此时即可将内门打开,钯催化剂将除去余下 的少量 O2。操作者经手套伸入箱内进行标本接种、培养和鉴定等全部工作。 PCR 技术的本质是核酸扩增技术,通过加热使双链 DNA 解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板 DNA 杂交, 在 Taq DNA 聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适 pH 缓冲液存在条件下延伸引物,重复上述“变性退火引物延 伸”过程至 25-40 个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数,可以在体外对目的核酸进行大量复制。 按自动化程度分半自动血细胞分析仪、全自动血细胞分析仪、血细胞分析工作站、血细胞分析流水线;按 检测原理分电容型、光电型、激光型、电阻抗型、联合检测型、干式离心分层型、无创型;按对白细胞的 分类水平分二分群、三分群、五分群、五分群网织红 BCA。 尿液分析仪一般由机械系统、光学系

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