GB 9826-1988_ 小麦粉破损淀粉测定法 α-淀粉酶法

中华人民共和国国家标准43. 06小麦粉破损淀粉测定法826一88of 器、分析的步骤以及结果计算。本标准适用于小麦粉破损淀粉值的测定。2方法原理小麦粉中破损淀粉对常温下能被。淀粉酶降解生成栩精和一定量的还原搪。利用此特性，在规定的条件下，用试荆以下试剂未经标明的均为分析纯试剂，水为蒸馏水。1 乙酸，再用水稀释至1000 mL,7士。2 稀释至1 000 00士1 500 取液中，再加人500 冲液, 充件)溶液用时现配。10 0a (V/V)硫酸溶液。3. 5 12%1 9 水碳酸钠溶于1 000 于棕色瓶避光保存。入200 乙酸，再用水稀释至1 000 10Y,碘化钾溶液。 1%淀粉溶液。3. 10 0. 1 82 5个结晶水)和3. 8 00 中，贮于棕色瓶避光保存，一星期后按490粮食、油料和植物油脂枪验一般规则附录华人民共和国商业部1988一07一06批准1989826一883. 11酸洗石英砂4仪器和用具4. 1玻璃试管:0250 5 3恒温水浴:可控温30士0. 1C。4. 4秒表。4. 5加液器或移液管:2 10 6移液管:5 . 8电炉。4,9锥形瓶:100 . 10滴定管,10 . 11天平:感量0. 01 g; 0. 1 测7土0. 1,淀粉含量为68称样量为1. 001 0. 01 g。如果淀粉含量过高或过低时，则称祥量应按式(1)计算:称样量(;)一行70.，.，.(:)气沙0r2粗少式中:00试样中水分的克数。入1小勺酸洗石英砂，混匀并将试样摇松倾斜于试管底部，准确量取46 二淀粉酶液，先将少许，淀粉酶液加入试样中并尽量摇匀，立即计时，再加入其余盖试管井上下颠倒摇动约30次使试样均匀悬浮。迅速将试管浸入30水浴中，然后每隔10 下颠倒摇动10次使试样重新均匀悬浮，恒温酶解刚好60 出试管，立即加入2 0%硫酸溶液，充分混匀后，再加人2酸钠溶液，摇匀并放置约2 中速滤纸过滤。充去最初几滴，收集沈液于干净锥形瓶中，此滚液即为试样测定液。另取一支试管不加小麦粉试样，同时同上操作，所得滤液即为空白对照液。准确加入10 . 1 合后将试管浸入剧烈沸腾的水中(可将试管置子铁丝笼架放人铝锅煮沸的水中，每次可同时作多个样品的测定)，继续加热待水再沸腾后开始计时，准确反应20 出试管立即置流水冷却。冷却后将试管中溶液倒入锥形瓶中，并用25 加入10 化钾溶液。然后用0. 1 加人约1粉液，继续滴定至溶液蓝色消失(半分钟内溶液不返蓝色)，记录用去硫代硫酸钠溶液的体积为V, (,吸取空白对照液5 上操作，记录用去硫代硫酸钠溶液的体积为V2(826一886结果计算6. 1氧化5 当于0. 1 还原糖所需0. 1 2)计算z - V,) )式中:1 ,滴定试样液用去硫代硫酸钠的体积,mL;定空白液用去硫代硫酸钠的体积,mL;算成0. 1 )计算所得m佩化钾11铁29. 19. 78. 28. 97. 67. 505. 425. 195. 125. 054. 584. 0. 50. 40. 161. 111. 960. 800. 760. 710. 650. 460. 410. 360. 150. 100. 50357826一886. 3小麦粉破损淀粉值(P)按式(3)计算尸=(5 X 6”(3)式中:结果允许差两次测定结果之差不得超过平均值的5%,测定结果保留小数点后一位。0B 9826一88附录A。一淀粉酶活性的测定(补充件)主题内容和适用范围本补充件规定了用比色法测定，淀粉酶活性的方法。本补充件适用于各种来源的淀粉酶活性的测定。方法原理过不同的反应时间后，反应棍合物与碘的显色强度随时间增加而降低，用测定这种显色强度随时间降低的速度来反映3试剂以下试剂未经标明的均为分析纯，水为蒸馏水。化钙溶液。1. 0 入5.5 拌至碘完全溶解，再稀释至250 棕色瓶中贮于暗处。此液可保存一个月。入4. 0 水稀释至1 000 时现配。水中，加人120 水稀释至1 000 0细度为通过1. 5 烧杯中，加入85 和15 . 05 分搅匀，静置15 中速滤纸过滤，该滤液用于制备1338 (g(以干态计)可溶性淀粉于小烧杯中，加入约20 ，搅拌使成悬浮液，然后将悬浮液边搅拌边缓慢倒入盛有约100 用洗瓶将小烧杯中淀粉全部转移至高型烧杯，继续搅拌并加热使缓慢沸腾2 后用表面皿盖上烧杯口，取出用流水冷却，再加入25 室温下，放置24 入一匙浮石粉，在10 持沸腾5 出流水冷却，最后用水定容至250 匀、过津，滤液中加几滴甲苯，在25以下贮存5天，此溶液的50 3容量瓶:250 00 6 15 5 0 0 000 W 10恒温水浴:4径为1. 0 8 测1. 1酶制剂8 。化钙溶液溶解并稀释至100 据该溶液酶活性的大小再用0. 2 %氯化钙稀释至适合于测定活性的溶液，稀释后的溶液应使35% 限制糊精在1540 最后测得的吸光度值应为底物校准时吸光度值的40%g，如测定其他产品，则根据酶活性的大小拟定称样量，均按下述步骤提取酶液。将预先在30水浴中恒温10 2 5 塞振摇使充分混合，立即置于30水浴中，每隔15 下颠倒混合10次，再浸入水浴(振摇次数与程度对结果有影响)，恒温提取60 要振摇)，此滤液即为酶提取液。1混合5. 2 S. 2. 2在试管中先加入10 加入2. 1的混合液2 后用适量的水稀释(一般稀释水量为2040 混合后在20下用1 S. 2. 3调整原稀释水量再按2. 2操作，反复多次直至测得的吸光度值在。. 556之间，记录此时稀释水量V(即为该底物的校正水量。2. 4在另一支已加人10 为2. 2侧定吸光度时的空白对服。1稀释后的酶液45 30水浴恒温5S. 3. 3用速流移液管吸取5 加入糊精的同时立即用秒表计时，然后分别在30恒温10 述混合液立即加入预先加入10 释碘液的试管中，再加入2. 3测得的水的体积V(即校正水量)，混匀后在20下恒温，并用1 n。下测定吸光度(如测定一系列样品，可在所有样品均完成显色后再一起测定吸光度，但最长间隔时间不得超过1 h),200氯化钙溶液代替混合液，同3. 4操作，作为3. 4测定吸光度时的空白对826一88A)用水解式(算，一500K fr(中:A 称取酶制剂的毫克数或其他产品的克数;f指称取酶量溶于100 称取5. 0 吸取该液2 时f=100/2=50);500换算成实用值的因素;K水解0式(算:K=19E,(中:在10 9E,a在30 t, 3.