培训资料第十章微生物的分布与消毒灭菌

*1 第十章 消毒灭菌 *2 看书找答案 v1、什么是正常菌群？ v2、什么是灭菌、消毒、防腐、无菌及 无菌操作？想想消毒、灭菌和防腐有什 么区别？ *3 第一节 微生物的分布 一、微生物在自然界的分布 （一）土壤中的微生物 （二）水中的微生物 （三）空气中的微生物 *4 二、微生物在人体的分布 （一）正常菌群的定义 分布在人类的体表及其与外界相通 的腔道中，在机体免疫机能正常时是无害的 微生物群体。 *5 （二）人体微生物的分布 *6 （三）正常菌群的作用 1、生物拮抗作用屏障 2、免疫作用 免疫刺激 3、营养与代谢作用合成维生素 4、抑制肿瘤的作用 *7 占位性生物屏障作用 *8 细菌方面细菌方面机体方面机体方面 正常菌群正常菌群/ / 非致病菌非致病菌 条件致病菌条件致病菌 ？ 寄生部位改变寄生部位改变 菌群失调菌群失调 免疫功能下降免疫功能下降 （四）、条件致病菌和菌群失调 *9 第二节 消毒与灭菌 消毒灭菌概念 物理方法 化学方法 生物学方法 *10 消毒:杀死物体或介质中的病原微生物 的方法（芽胞及非病原微生物不 一定能杀死）。 灭菌: 杀死物体或介质中所有微生物的 方法（包括所有细菌繁殖体及芽 胞）。判断标准？ 消毒灭菌有关概念 防腐（抑菌）:防止或抑制微生物生长繁 殖的方法。（微生物不一定死亡） *11 无菌操作:防止细菌进入机体 或对象的技术，称无 菌操作。 无菌: 在一定范围内没有活的 微生物存在。 *12 无菌操作 *13 一、物理方法 常用方法 （一）热力法（干热、湿热） （二）辐射（紫外线、电离幅射、微波） （三）滤过除菌（除菌滤器、适用物品） （四）超声波（机制：裂解细菌，主要用 于粉碎细胞、提取抗原） （五）干燥 （六）低温 *14 （一）热力灭菌法 原理： 使微生物蛋白质变性凝固，酶失活； 核糖体解体 破坏细胞膜的结构； 微生物体内的DNA断裂。 热力灭菌法 干热灭菌法 湿热灭菌法 *15 焚烧-最彻底的灭菌方法 烧灼-直接用火焰灭菌方法 如接种环、试管口、三角瓶口 干烤-加热160-170 2h 药粉、玻璃器皿、陶瓷 1、干热灭菌法 红外线-热效应，与干烤类似 灭菌效果：可杀死营养体和芽胞 *16 灼 烧 灭 菌 法 红外线接种环 灭菌器 *17 干 烤 灭 菌 法 电热烘箱 真空干燥灭菌箱 实验室常用设备 *18 湿热灭菌与干热灭菌的比较 同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好 原因 1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 2、湿热的穿透力比干热强 3、湿热的蒸汽有潜热 *19 2、湿热灭菌法 高压蒸汽灭菌法 最有效的湿热灭菌法 121 15-20mim（杀芽胞) 煮沸消毒法 水煮100 5mim(杀繁殖体)-5h(杀芽胞) 流通蒸汽消毒法 巴氏消毒法 间歇灭菌法 水蒸汽100 15-30mim(杀繁殖体) 反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌(杀芽胞） 较低的温度 61 30mim/71 30s（杀致病菌） *20 u方法：水中煮沸 15min u灭菌效果：可杀死所有营养细胞和一部 分芽胞 u适用对象：玻璃注射器和外科器械的消 毒。 Cncnc-micro （1）煮沸法 *21 方法：100 蒸汽持续1530min 效果：杀繁殖体 适用范围：外科手术器械、注射器、 胶管或食具等 （2）流通蒸汽消毒法 *22 奶瓶消毒器 *23 方法：常压蒸汽反复几次进行灭菌。 适用对象：不宜高压灭菌的培养基， 不耐热的药物和营养物、 发酵车间的管道等。 灭菌效果：可杀死芽胞。 （3）间歇灭菌 法 *24 适用对象：牛奶、奶酪、果汁、酒类、 糖浆等食品消毒。 方法：61.762.8处理30min 或71.6度处理15秒 或82处理4秒 效果：消毒 （4）巴氏消毒法 （低温消毒法） *25 *26 UHT技术 （超高温灭菌瞬时灭菌） 135152 *27 *28 v灭菌效果：杀芽孢 v适用范围：耐高温的物体，如普通 培养基、生理盐水、玻璃器 皿、敷料、手术器械、某些 注射液、手术衣等。 湿热灭菌法中效果最好的方法 （5）高压蒸气灭菌 *29 高 压 蒸 汽 灭 菌 法 温度/压力/kPa(kg/cm2)时间/min 11040.52(0.4)40 11570.91(0.7)30 120101.3(1.0)20 125141.82(1.4)15 130182.34(1,8)10 灭菌条件 最常用是： 121，103.1kPa，15-20min *30 高压蒸汽灭菌锅 *31 常用设备：手提式热压灭菌器 *32 高 压 蒸 汽 灭 菌 法 常用设备：卧式热压灭菌柜 *33 高压蒸气灭菌注意点: v检查压力表是否灵敏，压力与温度是否对应 v灭菌初期先排净锅内冷空气; v灭菌时间计算：达到规定压力和 温度开始计。 v锅内水分要充足; v灭菌物品装量不宜太满; v灭菌结束需缓慢减压； v灭菌结束，趁热取出物品。 *34 （二）辐射 1、日光与紫外光 紫外线 杀菌机理： 波长265nm的杀菌作用最强 干扰DNA的复制与转录 穿透力较弱 u表面消毒：不耐热物品 特 点： 适用范围： u空气消毒：手术室、传染 病房、车间、微生物实验室 灭菌效果:杀营养体 使用时注意防护！ *35 杀菌机理： 适用范围： 2、电离辐射 包括高速电子、X射线和射线 产生游离基,破坏DNA。 一次性医用塑料制品的消毒 食品的消毒-不破坏其营养成分 *36 （三）滤过除菌法 物理阻留方法： 除去液体或空气中的细菌 滤菌器 滤膜孔径0.220.45m, 不能除病毒、支原体 适用范围 血清、毒素、输液、生物制品、 抗生素以及空气等的除菌 *37 过滤灭菌 *38 *39 *40 *41 *42 （四）超声与超声波：使微生物细胞 裂解破碎。 *43 （五）干燥：脱水和盐类浓度增高。 *44 （六）低温：抑制生长繁殖。 410存活数月； 273可长期保存菌种。 *45 *46 常用的物理消毒灭菌方法 种类 方法 效果 适用范围 干热灭菌法 焚烧法 直接燃烧 灭菌 废弃污染物、 或焚烧炉 有传染性的 内燃烧 动物尸体等 烧灼法 直接用火焰烧 灭菌 接种环、试 管口或瓶口 干烤法 干烤箱内 灭菌 耐高温物品 1601702-3h 灭菌 玻璃物品、 瓷器等 *47 种类 方法 效果 适用范围 湿热灭菌法 巴氏消毒法 62.1-62.8 30min 消毒 牛奶、酒类、 或71.1 1530s 糖浆、果汁 煮沸法 l00 5-10min 杀死繁殖体 外科手 术器械、 注射器、 胶管或 食具等 流通蒸气消毒法 阿诺氏灭菌器 消毒 同上 或普通蒸笼进行 间歇灭菌法 反复多次的 灭菌 不耐热物 流通蒸气 品或特殊条 件下的灭菌 *48 种类 方法 效果 适用范围 高压蒸气灭菌法 高压蒸汽 灭菌 耐高温高 灭菌器内 压手术器 15磅 121.3 1520min 械、手术 衣、敷料等 一般培养基 10磅115 1530min 含糖培养基 或注射剂 *49 种类 方法 效果 适用范围 紫外线消毒法 紫外线灯照射 消毒 空气或物体 3060min 表面消毒品 过滤除菌法 细菌滤器 血清、抗毒素、 生物制品、维 生素、蛋白质 *50 二、 化学方法 利用化学药物破坏微生物的化学组 成、物理结构和生理活动，达到防腐灭 菌目的。 *51 类 型 名称及使用方法 作用原理 应用范围 醇 类 70%75%乙醇脱水、蛋白质 变性 皮肤、器皿 醛 类 0.5%10%甲醛 2%戊二醛（pH=8） 蛋白质变性房间、物品消毒（不 适合食品厂） 酚 类 3%5%石炭酸 2%来苏儿 3%5%来苏儿 破坏细胞膜、 蛋白质变性 地面、器具 皮肤 地面、器具 氧 化 剂 0.1%高锰酸钾 3%过氧化氢 0.2%0.5%过氧乙酸 氧化蛋白质活 性基团，酶失 活 皮肤、水果、蔬菜 皮肤、物品表面 水果、蔬菜、塑料等 （一）化学消毒剂 1、化学消毒剂的种类 *52 类型 名称及使用方法 作用原理 应用范围 重 金 属 盐 类 0.05%0.1%升汞 2%红汞 0.1%1%硝酸银 0.1%0.5%硫酸铜 蛋白质变性、酶失 活 变性、沉淀蛋白 蛋白质变性、 酶失活 非金属器皿、体温计 皮肤、粘膜、伤口 皮肤、新生儿眼睛 防治植物病害 表 面 活 性 剂 0.05%0.1% 新洁尔灭 0.05%0.1% 杜灭芬 蛋白变性、破 坏细胞膜 皮肤、粘膜、器械 皮肤、金属、棉织品 、塑料 *53 类型名称及使用方法 作用原理 应用范围 卤素及 其化合 物 0.20.5mg/L氯气 10%20%漂白粉 0.5%1%漂白粉 2.5%碘酒 破坏细胞膜、 蛋白质 饮水、游泳池 水 地面 水、空气等 皮肤 染料2%4%龙胆紫与蛋白质的羧 基结合 皮肤、伤口 酸类 0.1%苯甲酸 0.1%山梨酸 食品防腐 食品防腐 *54 （二）化学消毒剂作用机制 v1、