mer功能研究进展(1)

MerMer 功能研究进展功能研究进展(1)(1) 【摘要】Mer 是 Axl 受体酪氨酸激酶家族中的一员，其 受体 Gas6 和 Mer 结合后可以激活 Mer 的酪氨酸激酶活性， 并激活下游信号传导途径，在细胞炎症、凋亡、血液肿瘤 发生发展以及血栓于止血等方面发挥作用。本文主要就近 年来 Mer 的功能研究进展以及 Mer 的抗血栓和抗血液肿瘤 潜在治疗前景进行综述。 【关键词】受体酪氨酸激酶 AdvanceofStudyonMerFunctionReview AbstractMerisonememberofAxlreceptortyrosinekinasefa mily,anditsligandGas6canstimulateactivityofMerrecep tortyrosinekinaseafterbindingit,andthenactivatethed ownstreamsignaltransductionpathway,Merparticipatesi ncellinflammation,apoptosis,tumorigenesis,thrombosi sandhemostasis.RencetadvancesofstudyonMerfunctionwe rereviewed,anditspotentialprospectsofantithrombosis andantitumorwerediscussedinthisarticle. KeywordsMer;receptortyrosinekinase;Gas6;thrombosis; ectopicexpression Mer（cMerNykEyk）属于受体酪氨酸家族。此家族还 包括 Axl 和 Tyro3 两个受体酪氨酸激酶，它们有着共同的 配体Gas61 。人类的 Mer 基因是 1994 年由 Graham2首先从人类 B 淋巴母细胞 gt11 的 cDNA 文 库中克隆得到，随后小鼠的 Mer 基因于 1995 年同样由 Graham 成功克隆，并发现和人类的 Mer 基因具有 88的同 源性3 。Mer 基因的命名主要是基于开始发现其在人单核 细胞（monocytes） 、上皮组织（epithelialtissue）和生 殖系统组织（reproductivetissue）中表达较高。 Mer 的生物学性状及其配体 Mer 是 Axl 受体酪氨酸激酶家族的中一员，定位于，基 因全长为 130755bp，包括 19 个外显子。Mer 的 mRNA 共有 3632 个 bp，一共编码由 999 个氨基酸组成的 18-20kD 的蛋 白1 。Mer 的基因结构和其家族其他两个成员类似，胞外 区包括两个 IgG 样区，两个纤维连接蛋白样区，其中 IgG 样区为 Mer 和其配体 Gas6 结合区域，而纤维连接蛋白样区 也在和生长阻滞特异基因 6（growtharrestspecificgene6,Gas6)结合过程中起调 节作用4 。胞内区为酪氨酸激酶样区，具有激酶的活性， 并且具有该家族特有的 KWIAIES 序列。 Mer 的配体 Gas6 是 1993 年由 Manfioletti 首先克隆， 并发现其氨基酸序列和蛋白 S 具有 44的同源性5 。 Gas6 是 1 个 VitK 依赖、由 678 个氨基酸组成的 75kD 的分 泌型蛋白，其结构由 Gla 区、4 个 EGF 样区和 2 个 LaminG 样区组成，其中 LaminG 样区为与其受体结合区域，而 Gla 和 EGF 样区也认为参与调节 Gas6 及其受体的结合过程6 。 Mer 作为受体酪氨酸家族一员广泛表达于多种组织器官 和体细胞，在外周血细胞中 Mer 主要表达于正常的单核细 胞和血小板膜上，而不表达于正常的 T、B 淋巴细胞和粒细 胞；组织器官中 Mer 在睾丸、卵巢、前列腺、肺和肾脏组 织是高表达的，而在脾脏、胎盘、胸腺，小肠、大肠和肝 脏表达较低，而在心脏、脑组织和骨骼肌则没有表达1 。 Graham 等1和 Dirks 等7分别发现在多种恶性血液 细胞株中 Mer 以及 Gas6 的异常表达升高，提示 Mer 可能参 与恶性血液病的发生发展过程。 Mer 的生物学功能 细胞炎症和凋亡是体内两个重要的生理病理过程。近 年来有多篇文章报道 Mer 与此有关。1999 年 Todd 等8 将 LPS 注入 Mer-/-小鼠体内，结果发现 Mer-/-小鼠有死 于 LPS 引起的内毒素血症，而对照组只有的小鼠死亡， 同时该小组检测到 Mer-/-小鼠体内巨噬细胞分泌的 TNF 量明显高于对照组，并且利用 TNF 的单克隆抗 体可以明显抑制 LPS 导致的内毒素性休克，提示 Mer 通过 调节巨噬细胞分泌的 TNF 来参与 LPS 导致的内毒素性 休克。同时我们也发现在利用 LPS、TNF 和 IL1 刺 激后，人皮肤微血管内皮细胞无论在 mRNA 水平还是蛋白水 平，Mer 的表达量都是明显上升的，这一结果也可以从一个 侧面证明 Mer 参与了细胞的炎症反应。 Mer 功能研究进展对于凋亡方面的作用，Mer 和 Axl 家 族其他成员作用有一定的差别。XX 年 Guttridge 等9将 构建的 EGFR/Mer 嵌合蛋白质粒转染到 IL3 依赖的 32D 细 胞株，并表达此嵌合蛋白，通过利用 EGF 刺激此嵌合蛋白 可以发现 Mer 导致细胞骨架的结构改变并且抵抗由于 IL3 撤离导致的凋亡，但并不刺激细胞的增殖，这和其他 成员的作用是不同的。然而，将构建的 Fms/Mer 转染到 NIT3T3 细胞中则发现 Mer 具有细胞增殖作用的10 。同时 也应该注意到真正的全长 Mer 蛋白和 EGFR/Mer 嵌合蛋白是 存在差别的。研究发现，EGFR/Axl 可以抵抗 32D 细胞的凋 亡同时刺激细胞增殖，但是利用 Gas6 刺激转染全长 Axl 的 细胞时此作用并不明显，因此利用全长 Mer 蛋白进行功能 研究也是必需的11 。 XX 年首次发现 Gas6 和血小板功能相关，利用 Gas6 敲 除（knockout）小鼠发现，被敲除 Gas6 基因的小鼠可以幸 免于尾静脉注射胶原和肾上腺素导致的致死性血栓12 。 XX 年 Chen 等13利用 Mer 敲除小鼠对 Mer 参与血小板功 能做了较为全面的评价，他们应用 RTPCR 和 Westernblot 证明 Mer 表达于人和小鼠的血小板膜上，而同家族的 Axl 和 Sky 则没有此作用，Mer-/-小鼠的 PRP 对于低浓度聚集 诱导剂诱导的血小板聚集反应较弱，而且敲除 Mer 基因后 同样可以保护小鼠不死于尾静脉注射胶原和肾上腺素导致 的肺栓塞。而与此同时 Mer-/-小鼠的血小板和野生型小鼠 一样可以结合正常数量的可溶性纤维蛋白原，没有自发性 出血，并且各种凝血指标以及外周血细胞参数等没有显著 的变化。XX 年 Goul 等14利用流式细胞术发现 Mer、Axl 和 Sky 均表达于人的血小板上，这和 Chen 等的结 论是矛盾的。利用针对拮抗 Mer 和 Sky 的单克隆抗体可以 有效地抑制体外 ADP、PAR1 和 SFLLRN 诱导的血小板聚集 达 80之多，而抗 Axl 的抗体反而促进血小板聚集。由此 看来，Gas6/Mer 很可能在血栓形成过程中起到信号放大的 作用，因为 Gas6/Mer 本身并不能引起血小板聚集而只是放 大聚集诱导剂的作用。目前关于 Mer 及其家族成员和配体 参与血小板黏附和释放功能的研究尚少，并且对于 Mer 在 血栓中的作用研究也只局限于表象，对其内在的机理和相 关的信号通路目前也只推测可能通过 ba 参与了血 小板活化过程中“自外而内”的信号通路，但