dipasic对结核菌耐药性的研究(1)

DipasicDipasic 对结核菌耐药性的研究对结核菌耐药性的研究(1)(1) 【论文摘要】：目的：了解 Dipasic 对耐药菌株是否有效 及其药物抑菌浓度。方法：药敏培养基内加入 10 种不同浓 度抗结核药物，加入结核菌菌液 10-3 毫克。结果：四周后 观察三种抗结核药物耐药情况。结论：DPC 是一种独立的抗 结核药物对耐药结核菌都有效，但在 1g 浓度时仍有 30% 生长，认为用药量量应加倍。 【关键词】：Dipasic 耐药性 【论文】：抗结核药物的使用，在结核病防治上起了划时 代的作用。50 年代采用 INHPAS 联合治疗，取得了较好疗效。 但 PAS 服用量大，消化道反应多，病人不能耐受，90%不能 完成治疗程。瑞士 Geistlich 药厂研制的 Dipasic（简称 DPC） （德国又名 GEWO399） ，是以特殊方法，将 INH 与 PAS 合成的化合物。它能代替 INHPAS 联合用药，增加疗效，副 作用明显比 PAS 为少，德国 Freudenthal 等 50 余位专家均 有 Dipasic 临床应用的报告，认为有效。但无 Dipasic 耐 药性的报道。当前，我国耐药性病人不断增加，寻求合理 用药，是当务之急，为此我们对 Dipasic 作耐性研究，目 的在于， （1）了解 Dipasic 对耐药菌株是否有效？（2） Dipasic 的药物抑菌浓度如何？以便研究用量与用法，提高 临床疗效。1、研究方法：从安徽医科大学附属医院的门诊 及病房肺结核病人的痰进行结核菌培养，无论病人是初治 抑复治，亦不分男女老少，凡痰菌培养阳性者，即作为研 究对象。结核菌的检验，按标准常规操作进行。药敏培养 基的制备：液体鸡蛋培养基内，按比例加入抗结核药物， 其浓度按我国药敏标准，如 INH、PAS、TB1，每毫升分别为 1g 及 10g，SM、KM、CPM 分别为 10g，RFP 及 RFD 分 别为 50g 及 250g，EMB 为 5g 及 50g。Dipasic 则 暂定为每毫升含药 g、g、g 及 10g 四种。加入药 物后，充分摇匀混合后，分装在中试管内，每管 5 毫升， 摆成斜面，进行 8590一小时凝固灭菌，24 小时后再 灭菌一次，制成的含药培养基，保存在冰箱，一个月内有 效。菌液制备：取培养基上生长一个月内的菌落，于磨菌 器内灭菌生理盐水研磨呈均匀的菌液，再加灭菌盐水稀释， 与标准管比较（制成每毫升含 1 毫升的菌液） ，最后 100 倍 稀释成每毫升含 10-2 毫克菌液备用。菌液接种：将含不同 浓度的含药培养基顺序排列，并有不含药物的培养基作为 对照。取每毫升含 10-2 毫克的菌液，每管接种毫升，接种 菌量为 10-3 毫克的菌液。放在 37温箱内培养，每周观察 一次，四周报告结果。报告的标准是，如培养基上无菌生 长者为（一） ，培养基上有菌落数在 50 个以下者为（） ，培 养基上菌落数 50 个以上，但无融合者为（） ，培养基上菌 落大部分融合者为（） 。2、研究结果：我们研究的 10 种抗 结核药物耐药性试验，这 10 种抗结核药物是： INH、PAS、DPC、TB1、EMB、RFP、RFD、SM、KM 及 CPM，围 绕本文目的，我们仅取 30 例病人的其中 INH、PAS 及 DPC 三种药物的耐药性进行分析，其他另行报道。INH、PAS 的 浓度，按国家耐药性标准，分为 1g 及 10g，以每毫升 1g 为耐药上界，1g 药浓下不能生长者为阴性，为敏感 菌。1g 生长者为阳性，为耐药菌。DPC 的浓度，由于我 们尚需寻求合适的抑菌浓度，故分为每毫升含药 g、g、g 及 10g 四种不同的浓度。为便于统计比较， 暂以 1g 作为耐药标准，1g 以下者为敏感，1g 以上 者为耐药。 表 130 例耐药情况分析 培养结果 INH（%） PAS（%） DPC（%） 敏感 3（） 22 20 耐药 27 8 10 从表 1 可见耐 INH 菌珠已达 90%,耐 DPC 菌株为%,经统计学 处理,X2=,P,有高度显著性。PAS 与 DPC 比较，经统计学 处理，校正卡方为，P,无显著性。 表 2 敏感与耐药程度的分析 培养结果 INH PAS DPC （一） 3 22 20 （） 1 2 3 4 3 6 22 3 1 表 1 和表 2 可以说明 INH、PAS、DPC 为三种不同的抗结核 药物，他们对不同的结核菌，有不同的敏感与耐药情况。 从 8 例耐 PAS 菌株中，我们发现，此 8 例同时有三种以抗 结核药物之耐药，耐 DPC 菌株 10 例中，也有此一现象，是 多种耐药性菌株。 表 330 例 DPC 抑菌浓度的分析 抑菌浓度（g） 培养阳性 培养阴性 01 30（100%） 0（0%） 05 18（60%） 12（40%） 10 9（30%） 21（70） 100 2（%） 28 从表 3 可见,DPC 抑菌浓度,1g 尚有 9 例培养仍可生长, 10g 时有培养阳性。 3、讨论：过去，有人认为 DPC 是一种 INHPAS 的混合物， 我们的研究证明从耐药性及耐药程度分析，DPC 是独立的一 种抗结核药物，是 INH 与 PAS 的一种化合物，当前，我国 耐 INH 菌株已达 90%，这样的耐药性，仍在广泛应用，是否 降低疗效，值得重视。INH 耐药后，是否致病力全均下降， 从我们的结核菌培养后生长时间看，并未发现耐药菌的生 长延缓。比统计学看来，耐 INH 菌株，应用 DPC 仍有效， 差异有高度显著性。因此，DPC 可否作为另一种抗结核药物， 与 RFP、RFD 等联合应用，关键在于 DPC 是否和 PAS 那样， 对 RFP、RFD 吸收有障碍，会降低 RFP 的血浓度，降低疗效。 如果 DPC 并没有 PAS 这一代谢现象，则 DPC 作为另一抗结 核药物，其应用前景就较为广阔了。Kowilsky 氏测定 DPC 服用后血浓度的记载，氏用 DPC 与 INH 同量时，血浓度 1 小时/L,3 小时 6mg/1,7 小时/L,12 小时/L,14 小时 2mg/L， 氏认为 DPC 明显优于 INH，其优点是：（1）DPC 排泄慢， INH12 小时血浓度仅有/L，而 KPC 仍有/L，14 小时时 INH 浓度已为”0” ，KPC 仍高达 2mg/L。 （2）血浓度 KPC 比 INH 高，在二者给同样的药量时，INH 血浓度为/L，DPC 则为 /L。从 Wilbrandt 氏1LD50 的研究中，DPC 对小白鼠及兔 的 LD50 一倍于 INH，每公斤体重达，因此 DPC 的毒性是很 小的，应用大于 INH 一倍的用量是完全可以耐受的。从我 们的研究中，也可以看出，DPC 和 INH 同样的 1g 耐药性 分界线是不够的，1g 有 30%阳性，要提高疗效，加大用 量，似属必要。也就是说，INH 每日常规用量 6mg/kg，DPC 用量应为 12mg/kg，或更高些。4、结论：作者用结核菌培 养及耐药性测定的方法研究结果，认为