水质烷基汞的测定液相色谱-原子荧光串联法.doc

sn/t db61陕西省质量技术监督局 发布-实施-发布水质 烷基汞的测定液相色谱-原子荧光串联法water qualitydetermination of alkylmercuryby high performance liquid chromatography-atomic fluorescence spectrometry（送审稿）sn/t 中华人民共和国地方标准ics 1目 次前 言. 1 范围.1 2 方法原理.1 3 试剂和材料.1 4 仪器和设备.2 5 样品.36 分析步骤.3 7 空白试验.48 样品分析.49 结果计算.4 10 准确度和精密度.4 11 质量保证和质量控制.512 注意事项.5i前 言本标准由陕西省环境监测中心站提出并归口。本标准起草单位：陕西省环境监测中心站本标准主要起草人：李合义 黄国全 许锋 吴卫东 刘敏本标准首次发布。- 6 -水质 烷基汞的测定液相色谱-原子荧光串联法1 范围本标准规定了测定水质中烷基汞（甲基汞、乙基汞）的液相色谱原子荧光串联法的范围、方法原理、试剂和材料、仪器和设备、样品、分析步骤、结果计算、准确度和精密度、质量保证和质量控制及注意事项。本标准适用于饮用水及地表水中烷基汞（甲基汞、乙基汞）的测定。当取样体积为500ml时，本方法甲基汞的检出限为0.56ng/l，测定下限为2.24ng/l，测定上限为54.4ng/l；乙基汞的检出限为0.85ng/l，测定下限为3.40ng/l，测定上限为40.8ng/l。2 方法原理本方法采用固相萃取小柱进行水样前处理，用液相色谱-原子荧光串联检测水质中的烷基汞。样品中的烷基汞通过c18色谱柱，由于c18柱对甲基汞和乙基汞的吸附能力不同，流动相将甲基汞和乙基汞依次洗脱，洗脱的溶液首先和氧化剂混合，再和空气混合，通过紫外光照射，将有机汞氧化成无机汞，最后混合还原剂和盐酸发生氢化反应，进入原子化器，与原子荧光联用进行测定。3 试剂与材料3.1载气氩气：99.99%3.2除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为二次去离子水；液相色谱流动相所用试剂均为色谱纯，并经过0.45m滤膜过滤。3.3 0.45m一次性聚四氟乙烯（ptfe）微孔滤膜，水系。3.4固相萃取小柱 agilent sampliq c18 固相萃取小柱3.5乙腈：hplc级。3.6甲醇：hplc级。3.7 盐酸：=1.19g/ml优级纯。3.8 乙酸铵：分析纯。3.9 l-半胱氨酸：生物纯。3.10 氢氧化钾（koh）：分析纯。3.11 硼氢化钾(kbh4)：分析纯。3.12 过硫酸钾 (k2s2o8)：分析纯。3.13 硫脲：分析纯。3.14 二乙基二硫代氨基甲酸钠(ddtc)：分析纯。3.15 5%乙腈（v/v）+0.462%乙酸铵+0.12%l-半胱氨酸：准确量取50ml乙腈（3.5），0.462g乙酸铵（3.8），0.12l-半胱氨酸（3.9）至1l容量瓶中，加水至刻度，混匀。经溶剂过滤器过滤后，放在超声波清洗器中超声20min，除去气泡；3.16 0.5%氢氧化钾+1.5%硼氢化钾：先称取5.0g氢氧化钾（3.10）溶于少量水中，再称取15.0g硼氢化钾（3.11）溶解于水中，混匀，用水稀释至1l，存放于聚乙烯瓶中。3.17 0.5%氢氧化钾+1%过硫酸钾：称取5.0g氢氧化钾（3.10）和10g 过硫酸钾（3.12）溶解于水中，用水稀释至1l，存放于聚乙烯瓶中。3.18 0.05%二乙基二硫代氨基甲酸钠：称取0.05g二乙基二硫代氨基甲酸钠（3.14）溶解于水中，用水稀释至100ml。3.19 5%硫脲+0.5%盐酸+1%乙腈：称取5.0g硫脲（3.13），移取0.5ml盐酸（3.7）和1.0ml乙腈（3.5）溶解于水中，用水稀释至100 ml。3.20 10%甲醇：移取10.0ml甲醇（3.6）至100m容量瓶中，加水至刻度，摇匀备用。3.21 标准贮备液：甲基汞浓度为86.23.3g/g(中国计量科学研究院)，甲醇为溶剂；乙基汞浓度为64.72.4g/g(中国计量科学研究院)，甲醇为溶剂。3.22 标准使用液：分别取甲基汞和乙基汞浓标各1.00ml至1000容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度，配制成甲基汞为68g/l，乙基汞为51g/l的混合标准溶液，保存于4冰箱备用。4 仪器和设备4.1 除非另有说明，分析时均使用符合国家标准a级玻璃量器。4.2 sap10形态分析预处理装置(北京吉天仪器有限公司)；4.3 afs-830型原子荧光光谱仪(北京吉天仪器有限公司)； 4.4 超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司)；4.5 超纯水制备仪(美国millipore公司)。5 样品5.1 样品的采集和保存样品采集在塑料瓶中，水样在25条件下贮存。注：取样、制样及保存过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。5.2 水样预处理首先用5ml的洗脱液和5ml的水活化spe的c18小柱，再用2ml改性液过柱，再用4ml水冲洗，然后过500ml的水溶液样品富集，最后用2ml洗脱液洗脱spe小柱于进样小瓶里，密封保存于4冰箱备用。洗脱液：5%硫脲+0.5%hcl+1%乙腈。（3.19）改性液：0.05%二乙基二硫代氨基甲酸钠(ddtc)。（3.18）6 分析步骤6.1 仪器条件6.1.1 形态分析预处理装置条件6.1.1.1 泵速：60转/分；6.1.1.2 紫外灯(uv)：开；6.1.1.3 液体进样流程：氧化剂-空气-过紫外灯-还原剂-载流。6.1.1.4 色谱柱：c18柱1504.6mm (i.d)，5m；6.1.1.5 流速：1ml/min；6.1.1.6 进样体积：100l。氧化剂：0.5%氢氧化钾+1%过硫酸钾（3.17）还原剂：0.5%氢氧化钾+1.5%硼氢化钾（3.16）流动相：5%乙腈 +0.462%乙酸铵+0.12%半胱氨酸（3.12）载流：7%盐酸（3.7）清洗液：10%甲醇（3.20）6.1.2 原子荧光条件6.1.2.1 总电流：30ma；6.1.2.2 负高压：280v；6.1.2.3 载气流速：300ml/min；6.1.2.4 屏蔽气流速：600ml/min。6.2 标准曲线的绘制分别准确吸取标准使用液0.00、1.00、2.00、4.00、8.00ml于容量瓶中，用水定容至100ml，另外，吸取2.00ml的标准贮备液定容至10 ml，配制成甲基汞浓度分别为0.00、0.68、1.36、2.72、5.44、13.6g/l，乙基汞浓度分别为0.00、0.51、1.02、2.04、4.08、10.2g/l的混合标准溶液，分别吸取100l上述混合标准系列溶液按6.1的仪器条件直接上机测定，以峰面积对浓度（g/l）作线性回归分析，回归方程。7 空白试验用水代替水样，按与样品相同的步骤进行前处理和测定。8 样品分析吸取100l经5.2预处理的样品按6.1的仪器条件直接上机测定。9 结果计算9.1 定性标准以保留时间定性，待测样品中烷基汞的色谱峰的保留时间与标准溶液的保留时间相比变化范围在5%之内。9.2 定量标准采用外标标准曲线定量。将峰面积代入标准曲线(y=ax+b)，计算浓缩定容后的浓度c，再根据水样的体积计算原样中的浓度。c=(y-b)/(av)v0式中：c水样中甲基汞或乙基汞的浓度(g/l)；y目标物质吸收峰面积；a标准曲线斜率；b标准曲线截距；v水样体积(ml)；v0水样浓缩后体积（ml）。10 准确度和精密度10.1 精密度测定在饮用水和地表水中分别加入一定量甲基汞和乙基汞标准液而制得水样1和水样2，由6个实验室分别对其进行6次测定，水样1实验室内甲基汞和乙基汞相对标准偏差为：5.5%-8.6%、 4.8%-8.4%；实验室间甲基汞和乙基汞相对标准偏差为：1.7%、14.7%，重复性限甲基汞和乙基汞为：1.26 mg/l、1.06mg/l，再现性限甲基汞和乙基汞为：3.46mg/l、1.78mg/l。水样2实验室内甲基汞和乙基汞相对标准偏差为：3.0%-11.3%、3.3%-7.8%；实验室间甲基汞和乙基汞相对标准偏差为：9.1%、7.9%；重复性限甲基汞和乙基汞为：1.46mg/l、1.78mg/l，再现性限甲基汞和乙基汞为：11.2mg/l、4.91mg/l。10.2 准确度测定在饮用水和地表水中分别加入一定量甲基汞和乙基汞标准液而制得水样1和水样2，由6个实验室分别对其进行6次加标回收率测定，水样1加标回收率甲基汞和乙基汞在77.2%-100.6%、60.8%-96.5之间，加标回收率最终值甲基汞和乙基汞为84.1%6.9%、85.311.9%。水样2加标回收率甲基汞和乙基汞在76.2%-102.6%、62.6-86.0之间，加标回收率最终值甲基汞和乙基汞为88.2%13.0%、75.411.9%。11 质量控制和质量保证11.1 每分析一批样品必须有一个全程序空白。11.2 每分析一批样品必须有一个空白加标，组分回收率在60%120%。11.3 每分析一批至少有10%的平行样。 11.4 校准标准点 每间