风湿病与免疫性疾病的实验诊断史晓敏课件

第十章第十章 风湿病与免疫性疾病风湿病与免疫性疾病 的实验诊断的实验诊断 第十一章第十一章 肿瘤的实验诊断肿瘤的实验诊断 检验科免疫室检验科免疫室 史晓敏史晓敏 第十章第十章 风湿病与免疫性疾病的风湿病与免疫性疾病的 实验诊断实验诊断 免疫系统免疫系统 immune systemimmune system n n 人体的防卫系统人体的防卫系统 l l 监视自己监视自己 l l 抵御外侵抵御外侵 免疫性疾病免疫性疾病 immuno diseasesimmuno diseases n n 自身免疫性疾病自身免疫性疾病 ( ( autoimmune diseasesautoimmune diseases ) )* * n n 变态反应性疾病变态反应性疾病 ( ( allergic diseasesallergic diseases ) )* * n n 免疫缺陷性疾病免疫缺陷性疾病 ( ( immunodeficiency diseasesimmunodeficiency diseases ) ) n n 移植排斥移植排斥 ( ( transplantation rejectiontransplantation rejection ) ) n n 教学内容教学内容 contentscontents n n 目前临床常用的与免疫性疾病相关目前临床常用的与免疫性疾病相关 的一般检查项目及免疫功能试验的一般检查项目及免疫功能试验 n n 自身免疫性疾病、变态反应性疾病自身免疫性疾病、变态反应性疾病 的特异检查项目及其在实验诊断中的特异检查项目及其在实验诊断中 的应用的应用 免疫球蛋白免疫球蛋白 immunoglobulin, Igimmunoglobulin, Ig n n 概念概念 B细胞经抗原刺激后分化为浆细胞后所产生的一类具 有抗体活性及化学结构与抗体相似的球蛋白。 n n 分布分布 血液、体液、外分泌液及某些细胞的胞膜上。血液、体液、外分泌液及某些细胞的胞膜上。 n n 功能功能 与病原微生物发生免疫反应，清除抗原物质，保持与病原微生物发生免疫反应，清除抗原物质，保持 自稳自稳 免疫球蛋白结构示意图免疫球蛋白结构示意图 免疫球蛋白的分类免疫球蛋白的分类 根据重链的不同分为五大类： nIgG （） nIgA （） nIgM（） nIgD（） nIgE（） IgGIgG n血清中含量最高和最主要的Ig ，占Ig的70-80。 n是再次免疫应答的主要抗体， 对各种病毒、细菌、寄生虫等 都具有抗体活性。 n它是唯一能够通过胎盘的Ig。 IgAIgA n分为二种：血清型与分泌型 n血清型主要由肠系膜淋巴组织的浆细 胞产生，在血液中循环。 n分泌型由呼吸道、消化道、泌尿生殖 道等的粘膜固有层中的浆细胞产生， 通过外分泌腺导管分泌至唾液、乳液 、泪液、气管和胃肠道分泌液中。 n分泌型IgA通过阻止微生物穿过粘膜 在防御病毒和细胞感染方面起重要作 用。 IgMIgM n是分子量最大的Ig,占Ig 的5-10%。 n当机体受到抗原刺激后最 先产生的Ig，水平增高说 明有近期感染。 n是极为有效的凝集和溶解 细胞的因子，天然血型抗 体(抗A、抗B)、冷凝集素 等均属此类。 IgDIgD n仅占血清Ig的0.02-1%，它的生理 功能尚未完全了解。 IgEIgE n为血清中含量最少的一种Ig (0.002%)，是一种亲细胞性抗体， 与变态反应、寄生虫病等有关。 免疫球蛋白的定量检测免疫球蛋白的定量检测 n n 适应症适应症 了解体液免疫功能了解体液免疫功能 n n 标本类型标本类型 血液、尿液、脑脊液、血液、尿液、脑脊液、浆膜腔积液 n n 参考区间参考区间 血清 IgG6.94-16.18 g/L IgA0.68-3.78 g/L IgM0.60-2.63 g/L 速率散射比浊法速率散射比浊法 IgE959520-60302030205099 抗dsDNA抗体50-80少见0-29少见少见35少见 抗组蛋白抗体25-60950-3002701020 抗Sm抗体25-40少见少见少见少见少见 抗nRNP抗体26-45014102202010100 抗SSA（RO）抗 体 30-406075010少见520少见 抗SSB（La）抗体0-15506005少见05020 抗Scl-70抗体-3060- 抗PM-1抗体-2050- 抗Jo-1抗体-2050- 抗着丝点抗体- - 2050 (CREST) 80 - 抗核仁抗体6 939-15- How to read an How to read an inspection report of ANAinspection report of ANA 1. 1. positive or positive or negativenegative 2. 2. fluorescence fluorescence patternpattern 3. 3. titertiter 4. 4. antigenantigen 5. 5. reference rangereference range Inspection report of Inspection report of ANAANA Whats Titer ?Whats Titer ? 抗体滴度及强度抗体滴度及强度临床意义临床意义 1:1001:100（ ）可疑阳性可疑阳性 1:3201:320弱阳性，追踪观察弱阳性，追踪观察 1:10001:1000中等阳性，提示可能存在相关疾病中等阳性，提示可能存在相关疾病 1:3200 1:3200强阳性，高度提示存在相关疾病强阳性，高度提示存在相关疾病 1:10000 1:10000 极强阳性，高度提示存在相关疾病极强阳性，高度提示存在相关疾病 陽性 陽性 陽性 陽性 抗双链脱氧核糖核酸抗体抗双链脱氧核糖核酸抗体 （抗（抗dsDNAdsDNA抗体）抗体） n n 检测方法检测方法 IIFIIF ELISA ELISA 抗双链脱氧核糖核酸抗体抗双链脱氧核糖核酸抗体 （抗（抗dsDNAdsDNA抗体）抗体） 临床意义：临床意义： 1 1、SLESLE诊断标准之一诊断标准之一 2 2、抗、抗dsDNAdsDNA抗体与抗体与SLESLE疾病活动密切相疾病活动密切相 关，用于监视关，用于监视SLESLE病情变化，药物治疗病情变化，药物治疗 效果观察等效果观察等 3 3、如果健康人血清中检测到抗、如果健康人血清中检测到抗dsDNAdsDNA抗抗 体，其中体，其中85%85%的人在的人在5 5年内发展为年内发展为SLE SLE 抗可提取性核抗原抗体抗可提取性核抗原抗体 （抗（抗ENAENA抗体）抗体） nENA（ extractable nuclear antigen ） 由小分子RNA和特定蛋白质组成的核糖核蛋白， 不含组蛋白，可以溶解于生理盐水和磷酸盐缓冲 液中。 n检测方法 抗可提取性核抗原抗体抗可提取性核抗原抗体 （抗（抗ENAENA抗体）抗体） n临床意义： 抗U1RNP抗体 混合性结缔组织病的标志抗 体 抗Sm抗体 SLE的标志抗体 抗SS-A抗体 干燥综合征，狼疮 抗SS-B抗体 干燥综合征 抗Scl-70抗体 进行性系统性硬化症（弥漫性） 抗Jo-1抗体 多发性肌炎/皮肌炎 抗PM1抗体 多发性肌炎/皮肌炎，系统性硬化 症 类风湿因子类风湿因子 （Rheumatoid factorRheumatoid factor，RFRF） n n 概念概念 变性变性IgGIgG刺激机体产生的抗刺激机体产生的抗IgG FcIgG Fc段抗体段抗体 n临床意义： 1、诊断RA的重要血清学指标，阳性率50-70% 2、滴度与活动度相关，持续高滴度的阳性提示类 风湿关节炎活动，骨侵蚀发生率高，预后不好 3、也见于其他疾病：自身免疫性疾病，感染性疾 病，非感染性疾病如 弥漫性肺间质纤维化、结 节病等 变态反应病变态反应病 变态反应变态反应 n n 是是指人体与抗原物质接触后发生的不正常的免指人体与抗原物质接触后发生的不正常的免 疫反应，它与生理性免疫反应不同，不但不起疫反应，它与生理性免疫反应不同，不但不起 保护作用，相反由于反应的过度剧烈而导致生保护作用，相反由于反应的过度剧烈而导致生 理功能的紊乱或组织的损伤。理功能的紊乱或组织的损伤。 n n 分为分为型（速发型），型（速发型），型（细胞毒型），型（细胞毒型），型（免型（免 疫复合物型），疫复合物型），型（迟发型）四型。型（迟发型）四型。 变态反应病变态反应病 n n 是由于不正常的免疫反应即变态反应而引起。是由于不正常的免疫反应即变态反应而引起。 n n 目前变态反应病按变态反应分型，相应的分为目前变态反应病按变态反应分型，相应的分为 、型变态反应病，型变态反应病， 变态反应病的诊断原则变态反应病的诊断原则 症状的诊断症状的诊断 病史的诊断病史的诊断 非特异性的诊断非特异性的诊断 体检诊断体检诊断 实验室一般检查实验室一般检查 影像学诊断影像学诊断 皮内试验皮内试验 皮肤试验皮肤试验 点刺试验点刺试验 划痕试验划痕试验 变态反应变态反应 斑帖试验斑帖试验 病的诊断病的诊断 体内特异性诊断体内特异性诊断 眼结膜试验眼结膜试验 鼻试验鼻试验 激发试验激发试验 支气管试验支气管试验 食物激发试验食物激发试验 特异性诊断特异性诊断 药物激发试验药物激发试验 物理性变态反物理性变态反 应激发试验应激发试验 1.tIgE1.tIgE 2.sIgE 2.sIgE 体外特异性诊断体外特异性诊断 3.ECP3.ECP 4. 4.抗血细胞抗体抗血细胞抗体 5.CIC5.CIC 6.T 6.T细胞和淋巴细胞因子检测细胞和淋巴细胞因子检测 7.sIgG7.sIgG n总IgE （掌握） n特异性IgE （熟悉） n特异性IgG （了解） n嗜酸性细胞阳离子蛋白 （了解） n循环免疫复合物的检查 （了解） 变态反应病常用的检查项目变态反应病常用的检查项目 总IgE(total IgE，tIgE) n n 体内含量最低的体内含量最低的IgIg，介导，介导型变态反应型变态反应 n n 临床意义临床意义 ： tIgEtIgE水平升高提示患有水平升高提示患有型变态反应病、寄型变态反应病、寄 生虫病的可能生虫病的可能 n n 评价与问题评价与问题 1 1、影响、影响tIgEtIgE水平的因素：年龄、性别、种族水平的因素：年龄、性别、种族 2 2、tIgEtIgE水平升高还见于感染、水平升高还见于感染、IgEIgE骨髓瘤等，骨髓瘤等， 其不能作为其不能作为型变态反应病的过筛指标型变态反应病的过筛指标 特异性特异性IgEIgE（specific IgEspecific IgE，sIgEsIgE） n n 适应症：适应症： 用于用于型变态反应性疾病的病因诊断及监测型变态反应性疾病的病因诊断及监测 脱敏疗效。脱敏疗效。 n n 临床意义临床意义 ： 1 1、体外检测变应原的重要手段、体外检测变应原的重要手段 2 2、脱敏治疗有效时，、脱敏治疗有效时， sIgEsIgE血清含量逐步下降血清含量逐步下降 （1）食物类： 鸡蛋白 牛奶 小麦 开心果 腰果 黄豆 桃 虾 鳕鱼 蟹 （2）吸入类： 户尘螨 粉尘螨 烟曲霉 交链孢霉 豚草 法国梧桐 律草 蒿 桦树花粉 榆树花粉 柏树花粉 柳树花粉 （3）其它类： 蟑螂 蚊子 蛾子 猫毛发皮屑 狗毛发皮屑 蚕丝 鸽粪 蛔虫 甲醛 变态反应病的实验诊断策略变态反应病的实验诊断策略 1 1 、当考虑为、当考虑为型变态反应病时，需检测型变态反应病时，需检测tIgEtIgE，sIgEsIgE， ECPECP等；等； 2 2、当考虑为、当考虑为型变态反应病时，需检测抗血细胞抗型变态反应病时，需检测抗血细胞抗 体等；体等； 3 3、当考虑为、当考虑为型变态反应病时，需检测型变态反应病时，需检测CICCIC和某些自和某些自 身抗体等；身抗体等； 4 4、当考虑为、当考虑为型变态反应病时，需检测型变态反应病时，需检测T T细胞和淋巴细胞和淋巴 细胞因子等；细胞因子等； 5 5、当考虑为混合型变态反应病或不明变态反应病时、当考虑为混合型变态反应病或不明变态反应病时 ，可进行上述实验项目不同组合的检测；，可进行上述实验项目不同组合的检测； 6 6、当变态反应病患者进行脱敏治疗时，需检测、当变态反应病患者进行脱敏治疗时，需检测sIgGsIgG等等 。 第十一章第十一章 肿瘤的实验诊断肿瘤的实验诊断 教学内容教学内容 contentscontents 1 1、血清肿瘤标志物检测（血清肿瘤标志物检测（掌握）掌握） 2 2、肿瘤细胞周期与、肿瘤细胞周期与DNADNA倍体分析（了解）倍体分析（了解） 3 3、肿瘤基因及其表达产物的检测（了解）、肿瘤基因及其表达产物的检测（了解） 血清肿瘤标志物血清肿瘤标志物 (tumor marker(tumor marker，TM)TM) n n 概念概念 存在于肿瘤细胞内，或由肿瘤细胞异常产生，存在于肿瘤细胞内，或由肿瘤细胞异常产生， 或是宿主对肿瘤组织反应而产生的物质。或是宿主对肿瘤组织反应而产生的物质。 n n 分布分布 血液、细胞、组织或体液中血液、细胞、组织或体液中 n n 分类分类 激素类、蛋白质类、糖类、酶类等激素类、蛋白质类、糖类、酶类等 肿瘤的诊断肿瘤的诊断 n n 病史病史 n n 临床表现临床表现 n n 影像学诊断影像学诊断 n n 病理学诊断病理学诊断-确诊依据确诊依据 l l 缺点：不能早期诊断缺点：不能早期诊断 监测疗效、判断复发不够灵敏监测疗效、判断复发不够灵敏 n n 对高危人群进行肿瘤筛查对高危人群进行肿瘤筛查 n n 辅助肿瘤的诊断辅助肿瘤的诊断 n n 监测肿瘤的治疗效果、判断预后和监测肿瘤的治疗效果、判断预后和 复发复发 肿瘤标志物肿瘤标志物 理想的肿瘤标志物的特征理想的肿瘤标志物的特征 (1) (1) 敏感性高，能早期测出所有肿瘤患者；敏感性高，能早期测出所有肿瘤患者； (2) (2) 特异性好，非肿瘤患者均阴性；特异性好，非肿瘤患者均阴性； (3) (3) 有器官特异性，能对肿瘤定位；有器官特异性，能对肿瘤定位； (4) (4) 血清中浓度与瘤体大小、临床分期相关，血清中浓度与瘤体大小、临床分期相关， 可用以判断预后；可用以判断预后； (5) (5) 半衰期短，能反映肿瘤的动态变化，监测半衰期短，能反映肿瘤的动态变化，监测 治疗效果、复发和转移；治疗效果、复发和转移； (6) (6) 测定方法精密度、准确性高，操作简便，测定方法精密度、准确性高，操作简便， 试剂盒价廉试剂盒价廉 常用的肿瘤标志物常用的肿瘤标志物 n n 1. 1.肝：肝：AFPAFP、CEACEA n n 2. 2.结肠、胰：结肠、胰：CEACEA、CA19-9CA19-9、 CA242CA242 n n 3. 3.胃：胃：CA72-4CA72-4、CEACEA、CA19-9CA19-9 n n 4. 4.食道：食道：SCCSCC、CEACEA n n 5. 5.肺：肺：CEACEA、CA19-9CA19-9、SCCSCC、TPATPA、NSENSE、 CYFRA21-1CYFRA21-1、ProGRPProGRP n n 6. 6.乳房：乳房：CA15-3CA15-3、CA125CA125、CEACEA、 TPATPA n n 7. 7.卵巢：卵巢：CA125CA125、AFPAFP、-HCG-HCG、 CEACEA n n 8. 8.子宫：子宫：SCCSCC、-HCG-HCG n n 9. 9.前列腺：前列腺：f-PSAf-PSA、t-PSAt-PSA、PAPPAP 肿瘤标志物肿瘤标志物 主诊主诊 其他其他 AFP AFP 肝肝 胃、胰胃、胰 CEA CEA 结肠结肠 胃、胰、肝、肺、乳腺胃、胰、肝、肺、乳腺 CA19-9 CA19-9 胰腺胰腺 胃、肝、胆管、结肠胃、肝、胆管、结肠 CA125 CA125 卵巢卵巢 胰、肝、胆管、结肠、胃胰、肝、胆管、结肠、胃 CA153 CA153 乳腺乳腺 胰、肺、卵巢、胃、结肠胰、肺、卵巢、胃、结肠 CA72-4 CA72-4 胃胃 结肠、卵巢、食管、胰结肠、卵巢、食管、胰 PSA PSA 前列腺癌前列腺癌 NSE NSE 小细胞肺癌小细胞肺癌 神经母细胞瘤、内分泌瘤神经母细胞瘤、内分泌瘤 SCC SCC 鳞癌鳞癌 肺、食道、宫颈、皮肤肺、食道、宫颈、皮肤 CYFRA21-1 CYFRA21-1 非小细胞肺癌非小细胞肺癌 肺肺 -HCG -HCG 绒癌、睾丸癌绒癌、睾丸癌 乳腺癌、胃肠道癌、肺癌乳腺癌、胃肠道癌、肺癌 甲胎蛋白甲胎蛋白 -fetoprotein-fetoprotein，AFPAFP n n 一种糖蛋白，胎儿期由肝脏合一种糖蛋白，胎儿期由肝脏合 成，出生后不久即转为阴性或成，出生后不久即转为阴性或 含量极微含量极微 n n 当肝细胞或生殖腺组织发生恶当肝细胞或生殖腺组织发生恶 性肿瘤时，有关基因被激活，性肿瘤时，有关基因被激活， AFPAFP重新开始合成重新开始合成 - - 临床意义：临床意义： (1) (1) 原发性肝癌原发性肝癌 400 ng/mL 400 ng/mL（医学决定水平）（医学决定水平） (2) (2) 生殖腺肿瘤生殖腺肿瘤 睾丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等睾丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等 (3) (3) 其他消化道恶性肿瘤其他消化道恶性肿瘤 胃癌、肠癌、胆管癌等胃癌、肠癌、胆管癌等 (4) (4) 急慢性肝炎、肝硬化急慢性肝炎、肝硬化 300ng/mL300ng/mL (5) (5) 孕妇孕妇 1010周周，8 89 9月高峰月高峰(400)(400)，分娩后约，分娩后约3 3周正周正 常；异常增高帮助产前诊断胎儿宫内死亡、神经管畸形常；异常增高帮助产前诊断胎儿宫内死亡、神经管畸形 、脑积水、无脑儿和脊柱裂、脑积水、无脑儿和脊柱裂 甲胎蛋白，甲胎蛋白，AFPAFP 癌胚抗原癌胚抗原 （carcinoembryonic antigencarcinoembryonic antigen，CEACEA） n n 富含多糖的蛋白复合物，由胎儿胃富含多糖的蛋白复合物，由胎儿胃 肠道上皮组织、胰和肝的细胞所合肠道上皮组织、胰和肝的细胞所合 成，出生后血中含量极低成，出生后血中含量极低 临床意义：临床意义： n n 非器官特异性肿瘤相关抗原，通常为消非器官特异性肿瘤相关抗原，通常为消 化道恶性肿瘤，尤其是肠癌的标志物（化道恶性肿瘤，尤其是肠癌的标志物（ 通常高于参考上限通常高于参考上限4 4倍）倍） n n 肺癌、乳腺癌、膀胱癌和卵巢癌患者血肺癌、乳腺癌、膀胱癌和卵巢癌患者血 清清CEACEA量会明显升高量会明显升高 n n 监测血清监测血清CEACEA含量，对肿瘤疗效及复发含量，对肿瘤疗效及复发 判断更具有意义判断更具有意义 n n 消化系统、呼吸系统良性病变，可轻度消化系统、呼吸系统良性病变，可轻度 升高升高 癌胚抗原癌胚抗原，CEACEA n n 1. 1.肝：肝：AFPAFP、CEACEA n n 2. 2.结肠、胰：结肠、胰：CEACEA、CA19-9CA19-9、 CA242CA242 n n 3. 3.胃：胃：CA72-4CA72-4、CEACEA、CA19-9CA19-9 n n 4. 4.食道：食道：SCCSCC、CEACEA n n 5. 5.肺：肺：CEACEA、CA19-9CA19-9、SCCSCC、TPATPA、NSENSE、 CYFRA21-1CYFRA21-1、ProGRPProGRP n n 6. 6.乳房：乳房：CA15-3CA15-3、CA125CA125、CEACEA、 TPATPA n n 7. 7.卵巢：卵巢：CA125CA125、AFPAFP、-HCG-HCG、 CEACEA n n 8. 8.子宫：子宫：SCCSCC、-HCG-HCG n n 9. 9.前列腺：前列腺：f-PSAf-PSA、t-PSAt-PSA、PAPPAP (1 (1）在良性疾病时，如炎症性疾病会）在良性疾病时，如炎症性疾病会 使一些肿瘤标志表达增加使一些肿瘤标志表达增加 (2(2）有一些生理变化，如妊娠时）有一些生理变化，如妊娠时 AFPAFP 、CAl25CAl25、人绒毛膜促性腺激素和月、人绒毛膜促性腺激素和月 经时经时CAl25CAl25也会升高也会升高 结果分析：假阳性结果分析：假阳性 （1 1）产生肿瘤标志的肿瘤细胞数目少。）产生肿瘤标志的肿瘤细胞数目少。 （2 2）细胞或细胞表面被封闭。）细胞或细胞表面被封闭。 （3 3）机体体液中一些抗体