南医大药物分析第08章 对氨基苯甲酸酯类药物的分析课件

对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物 的分析 第一节 对氨基苯甲酸酯和 酰苯胺类药物的结构与性 质 本类药物的母体结构 一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构 苯佐卡因 盐酸丁卡因 盐酸普鲁卡因胺 酰苯胺类药物(苯胺的酰基衍生物)的 基本结构 非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚, 解热镇热镇 痛药药） 对乙酰氨基酚（扑热息痛） 盐酸利多卡因 盐酸布比卡因 盐酸罗派卡因 (S)-N-(2,6-二甲基苯基)-1-正丙基哌啶-2- 甲酰胺盐酸盐一水合物。 一、结构与性质 （一） 具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨 基，可用重氮化偶合反应鉴别或亚 硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发 生缩合反应，易氧化变色。 如酰氨基邻位存在甲基，空间位阻难 于水解，较稳定。 （三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与 生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴 别或非水碱量法测定含量。 水溶液无 法直接滴定，需用非水滴定。 （四）游离碱难溶于水，易溶于有机 溶剂，其盐可溶于水。 （二） 酯键或酰胺键易水解 （五） 盐酸利多卡因（布比卡因，罗 哌卡因）分子结构酰胺基氮可在水溶 液中与铜离子或钴离子络合，生成有 色配位化合物沉淀，沉淀可溶于氯仿 显色。 （六） UV （七） IR 二、鉴别试验 （一）重氮化偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应 盐酸普鲁卡因 直接：盐酸普鲁卡因、盐酸氯普 鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺 间接：对乙酰氨基酚 盐酸普鲁卡因 ChP（2010） 鉴别 （1）本品显芳香第一胺类的鉴别 反应（附录） 取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必 要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L 亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液 数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红 色沉淀。 对乙酰氨基酚 ChP（2005） 鉴别 （2）取本品约0.1g，加稀盐酸 5m1，置水浴中加热40分钟，放冷； 取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇 匀，用水3ml稀释后，加碱性-萘酚试 液2m1，振摇，即显红色。 盐酸丁卡因不具有芳伯氨基，分子结 构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝 酸钠反应，生成白色沉淀，与具有芳 伯氨基的同类药物区别。 （二）与金属离子反应 1. 与铜和钴离子反应 苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因和盐酸丁卡因等 不发生此反应。 与汞离子的反应 2羟肟酸铁盐反应 （三）水解产物的反应 1. 盐酸普鲁卡因 ChP（2010） 鉴别 （2）取本品约0.1g，加水2ml溶解 后，加10氢氧化钠溶液1ml，即生成白 色沉淀；加热，变为油状物；继续加热， 产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变 为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐 酸酸化，即析出白色沉淀。 2. 苯佐卡因 ChP（2010） 鉴别 （2）取本品约0.1g，加氢氧化钠 试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试 液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿 的臭气。 （四）制备衍生物测熔点 1三硝基苯酚衍生物 盐酸利多卡因 ChP（2010） 鉴别 取本品0.2g，加水20ml溶解。 （1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液 10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤 后，干燥，依法测定（附录C），熔点 为228232，熔融时同时分解。 2. 硫氰酸盐衍生物 盐酸丁卡因 ChP（2010） 鉴别 （1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠 溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液 1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水 洗涤，在80干燥，依法测定（附录C ），熔点约为131。 盐酸布比卡因、盐酸普鲁卡因胺 ChP（ 2010） 鉴别 （2）取本品，精密称定，按干燥 品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml 中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录 A）测定，在263nm与271nm的波长处有 最大吸收；其吸收度分别为0.530.58与 0.430.48。 （五）UV （六）IR 盐酸布比卡因 ChP（2005） 鉴别 （3）本品的红外光吸收图谱与对 照的图谱（光谱集324图）一致。 一. 盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 检查方法 HPLC 杂质对照品法 杂质来源 水解产生 第三节、特殊杂质与检查 供试液:盐酸普鲁卡因0.2mg/ ml 对照品:对氨基苯甲酸1g/ml溶液。 固定相：C18 流动相：0.1%庚烷磺酸钠的0.05M KH2PO4（ pH 3.0）-甲醇（68:32） 检测波长：279 nm 二. 盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物 的检查 杂质：4-氨基-2-氯苯甲酸 来源：生产、贮藏 【杂质检查】 USP30-NF25: HPLC-MS 分析 色谱条件：Zobax SB-C18，流动相： 0.5%乙酸水溶液-0.5%乙酸乙腈溶液 (87:13), 流速1 ml/min， 检测波长：254 nm 质谱条件: ESI(+), 质量扫描范围: 80600, 喷雾电压4000V,等 m/z:253,盐酸羟普鲁卡因M+1+ ，盐酸氯普鲁卡因光水解产物 m/z:172,M+1+ 4-氨基-2-氯苯甲酸准分子离子峰 （一）亚硝酸钠滴定法 1. 原理 具芳伯氨基的药物 四、含量测定 ChP(2010年): 苯佐卡因,盐酸普鲁卡因及其注射液,盐酸 普鲁卡因胺片剂及其注射液 具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。 具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对 乙酰氨基酚、醋氨苯酚等）经水解，芳香族硝 基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本 法测定。 2. 主要测定条件 （1）加入适量KBr加速反应 NaNO2+HClHNO2+NaCl HNO2+HClNOCl+H2O 重氮化反应的机理为： （1）K1 （2）K2 K1 300 K2 加入KBr，可增大溶液中NO+亚硝酰离子 的浓度，加快重氮化反应速度 （2）酸的种类及其浓度 在不同酸中重氮化反应的速度为： HBrHCl H2SO4 HNO3 盐酸 1:2.56； 加入盐酸： 重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性溶液中稳定； 防止生成偶氮氨基化合物，而影响 测定结果 （3）室温条件下滴定 1030 （4）滴定速度：先快后慢 滴定管尖端插入液面下2/3处，滴 定液一次大部分放下，近终点时方 改为慢速滴定 3. 指示终点的方法 （1）永停滴定法 ChP（2005）、BP 永停滴定法（附录A） 调节R1使加于电极上的电压约为50mV。取供试 品适量，精密称定，加水40ml与盐酸溶液（ 12）15ml，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插 入铂铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下 约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或 0.05mol/L）迅速滴定，至近终点时，将滴定管 的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，继续缓 缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复 ，即为滴定终点。 亚硝酸钠永停滴定法原理 终点前：无可逆电对，无电流产生，电 流计指针停止在“0”位 终点后：过量NaNO2 阳极：NO+H2O HNO2+H+e HNO2+H+e阴极： NO+H2O 电路有电流通过，电流计指针突然偏转并不再回 “0” （2）电位法 （3）外指示剂法 KI淀粉糊剂或试纸 2NaNO2+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O （4）内指示剂法 中性红 不可逆指示剂 4. 测定方法 盐酸普鲁卡因 ChP（2005） 取本品约0.6g，精密称定，照永停 滴定法（附录A），在1525， 用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定 。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L） 相当于27.28mg的C13H20N2O2HCl （二）非水溶液滴定法 脂烃胺侧链，具弱碱性.盐酸丁卡因,盐酸利 多卡因，盐酸布比卡因侧链上的叔胺氮具有弱碱性 ，均可采用非水溶液滴定法测定含量。 原理: 溶剂:醋酸或冰醋酸或酸酐 标准溶液: HClO4 指示剂:结晶紫（或萘酚苯） 结晶紫：紫色（碱式色） 终点:蓝色或绿色（黄绿色） 加入醋酸汞 作用:除去氢卤酸的干扰 蓝色、绿色、黄绿色、黄色（酸式色） pH 滴定盐酸丁卡因时，加入适量醋酐。因醋酐解 离生成的醋酐合乙酰氧离子比醋酸合质子的酸 性还强，有利于丁卡因碱性的增强，使滴定突 跃敏锐。 2(CH3CO)2 O(CH3CO)3O+十CH3COO 【盐酸利多卡因的测定】 取本品0.2g，精密称定，加冰醋酸溶解后， 加醋酸汞 5ml与结晶紫指示剂1滴，用HClO4 滴定液（0.1mol/L)滴至溶液显绿色，将滴定 的结果用空白试验校正。每1ml HClO4滴定 液（0.1mol/L)相当于27.08mg 的 C14H22N2O.HCl 盐酸利多卡因非水溶液滴定法反应过程如下： （三）紫外分光光度法 对乙酰氨基酚在0.4氢氧化钠溶液中，于 257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特 征，可用于其原料及其制剂的含量测定。 对乙酰氨基酚 ChP（2005） 取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中， 加0.4氢氧化钠溶液5.0ml溶解后，加水至刻 度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加 0.4氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀 ，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2 的吸收系数 为715 计算，即得。 原料药 吸收系数法 USP（25） 对照法 （四）高效液相色谱法 对乙酰氨基酚泡腾片: 色谱条件: 柱C18, 流动相:甲醇-水 (pH 4.5磷酸缓冲液); 检测波长:254 取10片片剂,称取其质量 流动相溶解定容至50 ml 过滤 取续滤液10 ml 定容至50 ml ,得供试液,精密 量取10 l 进样,得AX .取浓度100 g/ml对照品溶液,同 法测定,得AS. 1. 盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有 （） A. 重氮化偶合反应 B. 羟肟酸铁盐反应 C. 氧化反应 D. 磺化反应 E. 碘化反应 2采用亚硝酸钠法测定含量的药物 有（） A. 苯巴比妥 B. 盐酸丁卡因 C苯佐卡因 D盐酸去氧肾上腺素 3下列药物中不能用亚硝酸钠滴定 法测定含量者（ ） A. 乙酰水杨酸 B. 对氨基水杨酸钠 C. 对乙酰氨基酚 D. 普鲁卡因 E. 苯佐卡因 4. 亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用 是（ ） A. 添加Br B. 生成NO+Br ,加快重氮化反应 C生成HBr D. 生成Br2 E. 抑制反应进行 5亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法 为（ ） A. 电位法 B. 永停法 C. 外指示剂法 D. 内指示剂法 E. 自身指示剂法 6亚硝酸钠滴定法中，滴定剂（） A.亚硝酸钠 B. 高氯酸 C. 氢氧化钠 D. 外指示剂法 7. ChP（2010）亚硝酸钠滴定法测定 盐酸普鲁