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抗埃博拉核蛋白 人鼠嵌合抗体的研究 -病原生物学文献阅读报告 埃博拉病毒简介: 埃博拉出血热（Ebola Haemorrhagie Fever , EBHF）是由埃博拉病毒（ Ebola virus , EBOV）引起的动物疫源性传染病，死亡率可高达90%。 l 形态与性状：埃博拉病毒可呈杆状、丝状；直径约为7090nm，为中 型病毒；单股负链RNA病毒；有包膜 l 病毒的蛋白：糖蛋白（GP）、核蛋白（NP）、VP35、VP40、VP30、 VP24、RNA聚合酶（L蛋白） l 病毒的生活周期：吸附、穿入、脱壳、生物合成、装配、成熟和释放 l 病毒的传染源和宿主动物：感染EBOV的患者，以及猴子、黑猩猩等 灵长类动物 l 传播途径：接触传播，注射传播，性传播，气溶胶传播 主要临床特征： 一.早期主要为全身性病毒血症的症状和体征。 a.症状：早期多急性发病，表现为一系列非特异性症状； b.体征：体温以高热为主，波动较大；重症患者会出现 低血压；脉搏-体温分离早期较为常见。 二.晚期表现为全身多脏器的广泛出血和肝肾功能的严 重受损。 NP抗体研究目的、原因 ！ 由于埃博拉出血热在我国境内尚无病例出现，尤其需 要储备血清学检测阳性质控物。 NP? 获得抗体？ l 通过基因工程抗体技术构建并表达抗埃博拉病毒核蛋白NP人-鼠 嵌合抗体，为埃博拉出血热血清学检测做人源阳性对照储备。 人基因鼠基因 + + 新基因 抗体 如何制备人鼠嵌合抗体 工程工程 基因基因 将目的基因倒入受体细胞 3 l 将连接有轻重链基因的表达载体质粒用PEI转 染293T细胞（该细胞是一种感染了腺病毒基因 的人肾上皮细胞，其蛋白质表达含量高）。 目的基因的表达与检测 4 l 收获293T细胞产生的上清，用ELISA法检测人 鼠嵌合抗体的表达。 检测抗体是否成功表达： ELISA检测293T细胞是否成功表达人-鼠嵌合抗体 1. 包被ebove np抗原4过夜 2. 次日加入一抗为收获的嵌合抗体上清 3. 二抗为HRP标记的抗人Fc抗体 4. 加底物显色，底物降解的量即为嵌合抗体的生成量 结果及其意义： 结果：改造过的人鼠嵌合抗体能与埃博拉病毒 核蛋白抗原结合表明其具有抗体的生物学活性 。这些均说明人鼠嵌合抗体的构建是成功的。 意义：作为Ebola血清学检测中人源阳性对照 储备在埃博拉病毒检测上起到一定作用。对于 抗埃博拉核蛋白抗体的研究，也为以后抗埃博 拉病毒抗体的研究提供了一定的基础。 预防埃博拉 勤洗手加强锻炼 避免与感染者直接接触 注意饮食卫生身体不适立即去医院不去有感染报道和怀疑的地方 参考文献 1.埃博拉出血热，第四军医大学出版社，第一版 。 2.周荣平，孙丽娜，刘洋，芜为，李川，梁米芳，
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