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文档简介

第2讲 细胞工程 一、植物组织培养与动物细胞培养的比较 二、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 三、克隆动物的培育流程及流程分析 1.根据发育成新个体D的重组细胞核由动物B提供,而性别及大 多数遗传性状是由核内遗传物质决定的,故B、D两者的性别及 大多数遗传性状相同。 2.克隆动物的起点是经过核移植形成的一个细胞,其遗传物质 主要来自供核一方。 【热点考向1】 克隆技术 高考频次3年8考 预测指数 【典题训练】(2012徐州三模)人绒毛膜促性腺激素(HCG )是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗 HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图1是抗HCG单克隆抗体 制备流程示意图,图2表示杂种细胞中基因的存在与人体染色 体间的关系(注:“+”表示有,“-”表示无),请分析回答 下列问题: (1)图1中给小鼠注射的HCG相当于_,过程常采用的方 法有_(至少答两点)。 (2)科研人员发现形成的杂种细胞中小鼠的染色体会随机丢 失,各种杂种细胞保留小鼠染色体的种类和数量是不同的,对 杂种细胞进行染色体和基因关系分析的结果如图2。据此推测 ,2号染色体上有_基因,若控制抗HCG单克隆抗体合成的基 因是B,则可用于大规模培养的除了杂种细胞系四外,还能选 用_。能无限增殖的各种细胞系有_。 (3)在之前要进行抗体筛选的目的是_,此过程生产的 单克隆抗体可以与_特异性结合,从而诊断早孕。 【规范答题】(1)答案组织要规范全面,不模糊。 (2)回答第(2)、(3)小题时要注意筛选的作用,一次筛 选得到的是能无限增殖的杂种细胞,二次筛选得到的是产生专 一抗体的杂交瘤细胞。 (3)认真分析表格,对比分析找出有用的信息。 【解析】单克隆抗体的制备是将免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细 胞,通过电激、离心、振荡等物理方法或用PEG化学诱导,也 可用灭活的病毒来诱导二者融合,通过两次筛选培养(第一次 筛选,选出能无限增殖的杂种细胞,表中一、二、三、四、五 都属此类,再通过第二次筛选培养),选出既能无限增殖又能 产生专一抗体的杂交瘤细胞。单克隆抗体专一性强灵敏度高, 可与人绒毛膜促性腺激素特异性结合,从而诊断早孕。从图2 可看出2号染色体中可能含有的基因是A、C。杂种细胞系一和 四中都含控制抗HCG单克隆抗体合成的基因是B,所以二者都可 进行大规模培养。 满分答案:(1)抗原 PEG、电激、离心、振荡、灭活的病 毒 (2)A、C 一 一、二、三、四、五 (3)选出既能无限增殖又能产生抗HCG抗体的杂交瘤细胞 人绒毛膜促性腺激素(或“HCG”) 1.(2012上海高考)以绵羊红细胞刺激小鼠脾脏B淋巴细胞 ,再将后者与小鼠骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞克隆群,由 此筛选出的单克隆杂交瘤细胞所产生的抗体( ) A.能识别绵羊整个红细胞 B.只识别绵羊红细胞表面的特定分子 C.能识别绵羊所有体细胞 D.只识别绵羊所有体细胞表面的特定分子 【解析】选B。单克隆抗体具有特异性强的特点,只能针对特 定的抗原。本题中的抗原是绵羊红细胞表面的特定分子,并非 整个红细胞,也非其他体细胞,故B选项正确。 2.(2012广东高考)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是 ( ) A.组织培养B.细胞杂交C.显微注射D.核移植 【解析】选A。草莓植株分生区细胞含病毒的量比较少甚至无 病毒,可以利用植物组织培养技术培养出脱毒幼苗;细胞杂交 是培育存在生殖隔离的杂种生物的技术;显微注射常用于外源 基因导入动物细胞;核移植技术则用于动物的克隆培养。 3.(多选)(2012江苏高考)下列事实能体现细胞全能性的 是( ) A.棉花根尖细胞经诱导形成幼苗 B.单细胞的DNA在体外大量扩增 C.动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体 D.小鼠体细胞经诱导培育成小鼠 【解析】选A、D。细胞的全能性是指高度分化的细胞仍然具有 发育成完整个体的潜能。棉花根尖细胞经诱导形成幼苗和小鼠 体细胞经诱导培育成小鼠都是将高度分化的细胞培育成了完整 个体,因而可以体现细胞的全能性。单细胞的DNA 在体外大量 扩增体现的是DNA 分子的克隆。动物杂交瘤细胞产生单克隆抗 体是动物细胞融合技术的应用,没有形成新个体,不符合细胞 全能性的定义。 4.(2012日照二模)植物体细胞杂交,又称原生质体融合, 是指将植物不同种、属,甚至科间的原生质体通过人工方法诱 导融合,然后进行离体培养,使其再生杂种植株的技术。下图 所示为培育农作物新品种的过程示意图,请分析回答下列有关 问题: (1)图示育种过程涉及的生物工程技术除植物体细胞杂交外 还有_、_。 (2)图中a、b分别表示一个已插入外源DNA片段的重组Ti质粒 载体的_、_。 (3)过程c表示_。 (4)过程e表示_。 (5)微型繁殖培育无病毒幼苗时,一般选取_作为 外植体,依据是_。 【解析】(1)本题应用植物细胞工程和基因工程培育农作物 新品种,涉及的技术手段有基因工程、植物体细胞杂交、植物 组织培养。 (2)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化 法,根据其利用农杆菌中Ti质粒上的TDNA的特性判断a为 TDNA;而基因表达载体由启动子、终止子、目的基因和标记 基因等组成,据图判断b为标记基因。 (3)过程c表示将基因表达载体(重组质粒、目的基因)导入 受体细胞。 (4)由融合的植物杂交细胞产生愈伤组织需经脱分化过程。 (5)通过微型繁殖培育无病毒幼苗应选择无病毒、细胞分裂 快的植物分生区(如茎尖、根尖)细胞进行植物组织培养。 答案:(1)基因工程 植物组织培养 (2)TDNA 标记基因 (3)将基因表达载体(重组质粒、目的基因)导入受体细胞 (4)脱分化 (5)茎尖、根尖 细胞分裂速度快,几乎无病毒侵染 5.(2012广饶一模)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀 孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗 体可用于早孕的诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意 图,请分析回答: (1)制备单克隆抗体过程中要用到_和_技术 。 (2)在B淋巴细胞内DNA合成有D和S两条途径,其中D途径能被 氨基嘌呤阻断,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有S途径。 利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分 ,其中添加的_成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。 最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_ _。 培养杂交瘤细胞的条件包括:无菌、无毒的环境、营养、 _、_。 (3)哺乳动物在怀孕初期能为胚胎的收集提供可能,这是因 为_;在胚胎移植技术中收集到胚胎 后要进行_、_以及移植后的检查等步骤;胚胎移 植时可利用激素对受体进行_处理,使受体处于适合的 生理状况;此外,受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生 _反应,为胚胎在受体内的存活提供了可能。 (4)为了更多地生产出HCG,有人构思采用胚胎分割技术,把 一个胚胎分割成很多份,进而培育出大量相同的转基因动物。 你认为这种方法可行吗?_。为什么?_ _。 【解析】(1)制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养和 动物细胞融合技术。 (2)要将杂交瘤细胞分离出来,可以在培养基中加入氨基 嘌呤,收集增殖的细胞;加入氨基嘌呤后,把D合成途径阻断 ,仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增 殖,但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用 淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。 筛选出的杂交瘤细胞既具有无限增殖的特点,又能产生特异 性抗体。 杂交瘤细胞的培养应采用动物细胞培养技术,需要提供无菌 、无毒的环境、营养、适宜的温度和pH以及气体环境。 (3)哺乳动物的早期胚胎形成后,在一定时间内不会与母体 子宫建立组织上的联系,而是处于游离状态,这为胚胎的收集 提供了可能;收集到的胚胎要进行质量检查、培养或保存以及 移植后的检查等步骤;受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发 生免疫排斥反应,为胚胎在受体内的存活提供了可能。 (4)在胚胎分割移植技术中,需对囊胚期的内细胞团均等分 割,胚胎分

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