血型和交叉配血ppt课件

南华大学 University of South China 血型和交叉配血血型和交叉配血 南华大学医学检验教研室 谢海涛 南华大学 University of South China 一、一、ABOABO血型系统血型系统 二、二、ABO血型鉴定 三、三、Rh血型系统 四、四、交叉配血交叉配血 报告内容 南华大学 University of South China ABOABO血型和血型和RHRH血型是红细胞血型是红细胞 的的2 2大血型抗原抗体系统，在输血大血型抗原抗体系统，在输血 和血液遗传学研究有重大的意义和血液遗传学研究有重大的意义 。 南华大学 University of South China 一、ABO血型系统 19001900年年 美国免疫学家美国免疫学家Karl landsteiner Karl landsteiner 发现发现 RBCRBC膜上膜上A A、B B血型抗原，血清中有抗血型抗原，血清中有抗A A、抗、抗B B抗体抗体 ，将血型分为，将血型分为A A、B B、ABAB和和OO型。型。 南华大学 University of South China （一）（一） ABOABO血型系统抗原血型系统抗原 1. ABO1. ABO血型系统的组成和遗传血型系统的组成和遗传 是存在于是存在于RBCRBC 膜上的一种糖蛋白，有多肽和糖链组成。膜上的一种糖蛋白，有多肽和糖链组成。A A和和B B 基因是显性基因，基因是显性基因，OO基因是隐性基因，由基因是隐性基因，由A,BA,B基基 因调控。因调控。 2. ABO2. ABO血型系统抗原的分布血型系统抗原的分布 A A、B B、H H抗原存抗原存 在于在于RBCRBC膜上，也分布于膜上，也分布于WBC,PLTWBC,PLT及其他组织及其他组织 细胞上。细胞上。 南华大学 University of South China 南华大学 University of South China 南华大学 University of South China 血型物质：组织细胞合成并分泌的水溶性血型物质：组织细胞合成并分泌的水溶性 A,B,HA,B,H血型抗原多为半抗原，主要存在于体血型抗原多为半抗原，主要存在于体 液和分泌物中，以唾液中最为丰富。液和分泌物中，以唾液中最为丰富。 分为分泌型和非分泌型。分为分泌型和非分泌型。 血型物质具有和相应的抗体反应的性质可以血型物质具有和相应的抗体反应的性质可以 协助鉴定协助鉴定ABOABO血型和预测胎儿的血型。血型和预测胎儿的血型。 南华大学 University of South China （二） ABOABO血型系统抗体血型系统抗体 分为天然抗体和免疫性抗体。分为天然抗体和免疫性抗体。 天然抗体主要为天然抗体主要为IGMIGM型抗体。型抗体。 免疫性抗体主要为免疫性抗体主要为IGGIGG型抗体。型抗体。 南华大学 University of South China 南华大学 University of South China （三）（三）ABOABO血型系统亚型血型系统亚型 A A抗原主要亚型：抗原主要亚型：A1A1和和A2A2，中国以，中国以A1A1亚型为主。亚型为主。 B B亚型较少见，抗原性较弱。亚型较少见，抗原性较弱。 南华大学 University of South China 南华大学 University of South China 二、ABO血型鉴定 输血安全是临床输血的首要问题，正确的血型鉴定输血安全是临床输血的首要问题，正确的血型鉴定 是保证输血安全的前提条件。是保证输血安全的前提条件。 检测原理：检测原理：血型抗原与相应的抗体在介质中形成血型抗原与相应的抗体在介质中形成 RBCRBC和相应血型抗体结合的免疫复合物，出现肉和相应血型抗体结合的免疫复合物，出现肉 眼可见的凝集现象。眼可见的凝集现象。 南华大学 University of South China 正向定型：用已知的特异性血清检查红正向定型：用已知的特异性血清检查红 细胞的未知血型抗原。细胞的未知血型抗原。 反向定型：用已知的标准红细胞检查标反向定型：用已知的标准红细胞检查标 本中未知血型抗体。本中未知血型抗体。 方法：方法： 1.1.盐水凝集法：检测盐水凝集法：检测IGMIGM型抗体。型抗体。 2. 2. 凝胶微柱法凝胶微柱法 南华大学 University of South China 南华大学 University of South China 方法学评价：方法学评价： 1.1.盐水凝集法盐水凝集法 分为玻片法和试管法。简单易行。分为玻片法和试管法。简单易行。 2.2.凝胶微柱法凝胶微柱法 重复性好，特异性灵敏性高，全自动分重复性好，特异性灵敏性高，全自动分 析仪可以减少人为误差。缺点：成本高，析仪可以减少人为误差。缺点：成本高， 需要特殊设备。需要特殊设备。 南华大学 University of South China 质量保证：质量保证： 1.1.标准血清标准血清 ： 在有效期内使用，效价高，凝在有效期内使用，效价高，凝 集力强，严防污染。常用的有：集力强，严防污染。常用的有： A A 、人血清、人血清ABOABO血型抗体：特异性高，凝集血型抗体：特异性高，凝集 效价：抗效价：抗A A不低于不低于1 1128128，抗，抗B B不低于不低于1 16464， 亲和力在亲和力在1515秒出现凝集，秒出现凝集，3 3分钟明显凝集，稳分钟明显凝集，稳 定性高，灭活补体。定性高，灭活补体。 B B、人、人ABOABO单克隆抗体：特异性，亲和力，单克隆抗体：特异性，亲和力， 凝集效价，稳定性高。凝集效价，稳定性高。 南华大学 University of South China 2. 2. 被检红细胞：被检红细胞： A A 、标本新鲜，严防污染。、标本新鲜，严防污染。 B B 、特殊病人标本，加做对照及正反定型，以、特殊病人标本，加做对照及正反定型，以 及用洗涤红细胞做血型鉴定。及用洗涤红细胞做血型鉴定。 3. 3. 实验器材实验器材 ： 清洁干糙，应正反定型，时间清洁干糙，应正反定型，时间 温度离心时间均应该严格控制。温度离心时间均应该严格控制。 观察结果仔细观察结果仔细 ，注意出现弱凝集现象，必要时在显微镜下观，注意出现弱凝集现象，必要时在显微镜下观 察结果。察结果。 4. 4. 综合分析实验结果。核实无误时方可以发出综合分析实验结果。核实无误时方可以发出 检查结果。检查结果。 南华大学 University of South China 临床意义：临床意义： 1.1.输血输血 2. 2. 器官移植器官移植 3. 3. 新生儿溶血病新生儿溶血病 4. 4. 其他其他 南华大学 University of South China 三、Rh血型系统 19401940年，年，Karl Landsteiner and Alexander Karl Landsteiner and Alexander Wiener Wiener 发现了发现了RhRh血型系统，是最复杂的红细胞血血型系统，是最复杂的红细胞血 型系统之一。具有遗传多态性，导致血清学表现型系统之一。具有遗传多态性，导致血清学表现 复杂，表型频率极不平衡。有复杂，表型频率极不平衡。有3 3种命名方式。种命名方式。 南华大学 University of South China （一）（一） RhRh血型系统的命名血型系统的命名 1 .1 . Fisher-Race Fisher-Race 命名法（命名法（CDECDE命名法）命名法） A A、遗传基因位于、遗传基因位于1 1号染色体短臂上的连锁号染色体短臂上的连锁 基因，每条有三个基因位点，依次排为基因，每条有三个基因位点，依次排为 CDECDE。 B B、各基因位点由一对等位基因组成。、各基因位点由一对等位基因组成。C C CDECDE以复合体的形式遗传以复合体的形式遗传 D D 可有可有8 8种种 基因组合和基因组合和3636种遗传型。种遗传型。 南华大学 University of South China 2. ISBT2. ISBT命名法。命名法。 3. Rh3. Rh血型系统表型及基因型。根据红细胞上有无血型系统表型及基因型。根据红细胞上有无D D 抗原为抗原为RhRh阳性和阳性和 RhRh阴性阴性。 南华大学 University of South China （二）二） RhRh血型系统抗原及抗体血型系统抗原及抗体 1. Rh1. Rh血型系统抗原血型系统抗原 仅次于仅次于ABOABO血血 型系统的型系统的A A、B B抗原。与人类密切的是抗原。与人类密切的是D D 、E E、C C、c c、e e。 2. Rh2. Rh血型系统抗体血型系统抗体 天然抗体极少天然抗体极少 ，由输血或妊娠刺激产生的，由输血或妊娠刺激产生的IGGIGG型免疫型免疫 性抗体。以抗性抗体。以抗D D最为常见。最为常见。 南华大学 University of South China （三）（三）RhRh血型鉴定血型鉴定 常用方法有酶介质法，低离子强度溶液试验，常用方法有酶介质法，低离子强度溶液试验， 抗人球蛋白试验，凝集胺试验及人源盐水介质抗抗人球蛋白试验，凝集胺试验及人源盐水介质抗 D D试验。试验。 检测原理检测原理 1.1.酶介质法酶介质法 ：用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表：用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表 面的唾液酸，降低红细胞表面的负电荷，减少排面的唾液酸，降低红细胞表面的负电荷，减少排 斥力，促进斥力，促进RhRh抗原与抗体的结合而产生红细胞凝抗原与抗体的结合而产生红细胞凝 集。集。 南华大学 University of South China 2.聚凝胺试验：聚凝胺是带高价阳离子的 季胺盐，有利于红细胞凝集。由Rh抗体 致敏的红细胞产生凝集是特异性的不可逆 凝集，非抗体致敏的凝集为可逆性凝集。 3. 抗球蛋白试验 （Coombs Test）：是 检测红细胞上不完全抗体的经典方法。利 用抗球蛋白抗体作为第二抗体，通过连接 致敏红细胞表面的特异性Rh抗体，出现 特异性凝集。 南华大学 University of South China 4.人源盐水介质抗D试验：利用免疫球蛋白变性剂处 理，使IGG变为IGM类抗体，能在盐水介质中发生 凝集现象，用于快速鉴定。 5.低离子强度溶液试验 南华大学 University of South China 方法学评价 南华大学 University of South China 质量保证质量保证 1.1.检测前：标本新鲜，严防污染，被检测前：标本新鲜，严防污染，被 检红细胞用生理盐水洗涤。检红细胞用生理盐水洗涤。 试剂器试剂器 材要在有效期内的合格试剂，器材清材要在有效期内的合格试剂，器材清 洁干燥。洁干燥。 南华大学 University of South China 2.2.检测中：检测中： A A 、严格遵守操作规程、严格遵守操作规程 。 B B 、严格控制抗原抗体比例、介质浓度、反应时间温、严格控制抗原抗体比例、介质浓度、反应时间温 度以及离心条件等关键因素。度以及离心条件等关键因素。 C C、每次均需阴性阳性和试剂对照。、每次均需阴性阳性和试剂对照。 D D、观察结果不可用力震摇，结果可疑用显微镜观察、观察结果不可用力震摇，结果可疑用显微镜观察 确认。确认。 3. 3. 检测后：复查实验全过程，填写报告并于检测后：复查实验全过程，填写报告并于4 4度保存度保存 标本一周以上。标本一周以上。 南华大学 University of South China 临床意义临床意义 1 1. . RhRh血型鉴定及交叉配血血型鉴定及交叉配血 2 2. .新生儿溶血病的诊断新生儿溶血病的诊断 南华大学 University of South China 四、交叉配血四、交叉配血 交叉配血实验是在现象鉴定的基础上，进一步交叉配血实验是在现象鉴定的基础上，进一步 检测受血者和供血者血液中是否含有不相配合的成检测受血者和供血者血液中是否含有不相配合的成 分。主侧：受血者血清与供血者红细胞；次侧：受分。主侧：受血者血清与供血者红细胞；次侧：受 血者红细胞与供血者血清。血者红细胞与供血者血清。 检测原理检测原理 常用盐水配血试验。常用盐水配血试验。 南华大学 University of South China 方法学评价 南华大学 University of South China 质量保证质量保证 1.1.检测前：检测前： A A、建立标本签收制度。、建立标本签收制度。 B B、标本新鲜，无溶血，严防污染，有输血、标本新鲜，无溶血，严防污染，有输血 或妊娠史的应在或妊娠史的应在4848小时内留取。小时内留取。 C C试剂器材要在有效期内的合格试剂。试剂器材要在有效期内的合格试剂。 D D、器材清洁干燥，严防溶血。、器材清洁干燥，严防溶血。 南华大学 University of South China 2.2.检测中：检测中： A A、高度责任感。、高度责任感。 B B、器材标记清楚，吸管等均专用。、器材标记清楚，吸管等均专用。 C C、被检红细胞用生理盐水洗涤，浓度与标、被检红细胞用生理盐水洗涤，浓度与标 准血清的比例恰当。准血清的比例恰当。 D D、严格控制反应时间温度和离心条件。、严格控制反应时间温度和离心条件。 南华大学 University of South China E E、配血试验阴性但有反复输血史和妊娠史的应、配血试验阴性但有反复输血史和妊娠史的应