基因工程抗体16张幻灯片

第十三章 基因工程抗体 1 抗体研究的世代 第一代 多克隆抗体 第二代 单克隆抗体 第三代 基因工程抗体 2 一.多克隆抗体（polyclonal antibody）： 指由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种 抗原决定簇的多种抗体混合物。 如:免疫血清（含多种特异性抗体）。 实际意义： （1）预防、治疗感染性疾病 如：破伤风抗毒素血清 抗破伤风 胎盘球蛋白 抗病毒感染 （2）临床诊断，缺点：特异性差。 3 二.单克隆抗体（monoclonal antibody, McAb） 由单一克隆B细胞杂交瘤产生的，只识别抗原 分子某一特定抗原决定簇的特异性抗体。 特点：具有高度均一性。 杂交瘤细胞： 骨髓瘤细胞 无限增殖； 免疫B细胞 合成、分泌特异性抗体。 4 5 鼠源单抗临床应用的障碍 血清半衰期短，20h 抗原抗体结合力、亲和力不够 HAMA反应：810天出现，2030天高峰 ，anti-id封闭与抗原结合位点，抗鼠抗体加 速单抗清除。 过敏休克 6 第二节 鼠单抗的人源化 1.人鼠嵌合抗体： 鼠单抗的可变区序列人抗体恒定区序列 2.利用计算机辅助设计，通过定点突变，改变 可变区的氨基酸，减少鼠源性。 9 1 1 人一鼠嵌合抗体人一鼠嵌合抗体(Chimeric Antibodies)(Chimeric Antibodies) 人一鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒人一鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒 定区融合而得到的抗体。定区融合而得到的抗体。 10 构建嵌合抗体的大致过程是，将鼠源单抗的构建嵌合抗体的大致过程是，将鼠源单抗的可可 变区基因变区基因克隆出来，连到包含有克隆出来，连到包含有人抗体恒定区基因人抗体恒定区基因 及表达所需的其它元件及表达所需的其它元件( (如启动子、增强子、选择如启动子、增强子、选择 标记等标记等) )的表达载体上，在哺乳动物细胞的表达载体上，在哺乳动物细胞( (如骨髓瘤如骨髓瘤 细胞、细胞、CHOCHO细胞细胞) )中表达。中表达。 构建重组表达载体构建重组表达载体11 2 2 鼠单抗可变区的人源化鼠单抗可变区的人源化 尽管嵌合抗体的免疫原性已降低很多，但有时尽管嵌合抗体的免疫原性已降低很多，但有时 它仍可能引发较强的免疫反应。为了进一步降低抗它仍可能引发较强的免疫反应。为了进一步降低抗 体的鼠源成分，发展出体的鼠源成分，发展出CDRCDR移植技术。移植技术。 CDR CDR移植即把鼠抗体的移植即把鼠抗体的CDRCDR序列移植到人抗体的序列移植到人抗体的 可变区内，所得到的抗体称可变区内，所得到的抗体称CDRCDR移植抗体或移植抗体或改型抗改型抗 体体，也就是，也就是人源化抗体。人源化抗体。 12 13 经过经过CDRCDR移植，移植，抗体的免疫原性极低，抗体的免疫原性极低， 而其抗原结合能力保持不变，而其抗原结合能力保持不变，结合半抗原结合半抗原 及全抗原及全抗原( (如细胞表面受体、病毒等如细胞表面受体、病毒等) )的改的改 形抗体都已有报道，到现在已有数百种人形抗体都已有报道，到现在已有数百种人 源化抗体。（美国正式上市的源化抗体。（美国正式上市的1111种治疗性种治疗性 单抗中多数是改型抗体）单抗中多数是改型抗体） 14 2002年完全人源化单抗humira获得批准上 市，这是单克隆抗体药物发展具有里程碑 意义的大事，预示着单克隆抗体药物一个 迅猛发展的新时代的来临。Humira是 Abbott/CAT公司开发的一种治疗类风湿关 节炎的单克隆抗体药物。 15 第三节 小分子抗体和抗体融合蛋白 1.小分子抗体：改造基因，截取具有生物活性 的区段，加以重组表达。 2.融合蛋白抗体：抗体的部分基因片段其他 蛋白的基因。其他蛋白如蓖麻蛋白或绿脓杆菌 外毒素等。 16 抗体药物销售趋势图抗体药物销售趋势图 17 治疗型单克隆体基因时代明星 2007年4月3 日 国内单抗药物发展迅速，上市的单抗药 物有11个，其中我国自行开发的有6个，处 于临床研究阶段的有5个。 18 已批准上市的单抗 19 20 正在进行临床开发中的基因工程 抗体 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 武汉生物制品研究所研制的注射用鼠源性 抗人T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体是国内 自行研制最早批准上市的抗体；北京百泰 生物与古巴合作开发的I类癌症治疗新药“重 组人源化抗人表皮生长因子受体单克隆抗 体”(商品名：泰欣生)是我国批准的