明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则.ppt

背景资料 检测方法 方法学验证 注意事项 n4月15日，央视每周质量报告栏目披露了国内部分医药生产企业使 用皮革明胶制胶囊，空心胶囊铬超标，在社会上反响巨大。工业明胶违法 用于生产药用明胶内幕： n4月15日晚国家药监局发出紧急通知，要求对媒体报道的13 个铬超标产品暂停销售和使用。待监督检查和产品检验结果明 确后，合格产品继续销售，不合格产品依法处理。对违反规定 生产销售使用药用空心胶囊的企业，将依法严肃查处。 n4月16日中检院组织召开关于对部分胶囊剂产品开展监督 抽验的紧急会议，成立了以李云龙为组长的应急工作领导小 组，成立了应急检验技术专家组，安排部署应急检验的具体事 宜。 发布明胶药用空心胶囊铬检测 方法指导原则的通知 各省、自治区、直辖市(食品)药品检验所（院）： 根据国家食品药品监督管理局的要求，为指导明胶药 用空心胶囊中铬检测，保证检验质量，我院依据中国药 典2010年版（二部）的标准，结合前期工作经验，组织 制定了明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则（见附 件），供各单位检测时参考。 附件：明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则 (/CL0149/3480.html) 二一二年四月二十一日 胶囊壳分类 硬胶囊 软胶囊:成膜材料和内容物同时加工成产品(海藻酸盐、明胶) 明胶空心胶囊 植物来源：主要是植物纤维素 动物来源: n明胶空心胶囊（Vacant Capsules） 系由胶囊用明胶加辅料制成的空心硬胶囊。由帽、体两节胶 囊壳组成，可容纳各种药粉、液体、半固体和药片。可掩饰 药物的异味，易于吞服，具良好的崩解能力，较长的保质期 等优点。 n规格尺寸：从大到小依次为000#、 00#、0#、1#、2#、3#、 4#、5#等8种型号。 n主要原材料：由明胶、甘油、水以及其它的药用材料(TiO2) 组成。明胶约占所有原辅料的90%以上）。 n明胶是从动物（牛、马、猪、鱼、驴）的皮、骨、腱、鳞等 含胶原蛋白的组织，经过酸、碱或酶水解处理以后降解生成 的非均匀多肽混合物，由多种氨基酸所组成。 n明胶成分：8590%蛋白质，0.3%0.2%矿物质，9%12% 水分。 n外观近于无色或者呈淡黄色， 为透明、无特殊臭味的固体， 分子量为1.75-45万。 n根据用途分为三类：药用明胶，食用明胶和工业明胶(照相明胶) 。 n有关标准 胶囊用明胶： 中国药典2010年版（二部）（Cr:2.0mg/kg） Gelatin ： EP7.0/BP2010 （Cr:10ppm） USP34（Cr:没有规定） JP16（Cr:没有规定） 药用明胶： QB 2354-2005 （Cr:2.0mg/kg）(QB:轻工行业标准) 食品添加剂 明胶： GB 6783-94 （A级：1.0mg/kg，B级：2.0mg/kg） 食用明胶： QB /T 4087-2010 （Cr:2.0mg/kg） 工业明胶： QB/T 1995-2005 （Cr:没有规定。用途：1，火柴的 起火剂；2，粘合剂；3，电解工业；4，纺织工业；5，感光耐蚀膜；） 中国药典2010年版（二部）明胶空心胶囊项下铬检查项（ P1204） 取本品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸510ml，混匀，浸泡过 夜，盖上内盖，旋紧外套，置适宜的微波消解炉内，进行消解。消解完全 后，取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸汽挥尽并近干，用2%硝 酸转移至50ml量瓶中，并用2%硝酸稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液 ；同法制备试剂空白溶液；另取铬单元素标准溶液，用2%硝酸稀释制成 每1ml含铬1.0g的铬标准贮备液，临用时，分别精密量取铬标准贮备液适 量，用2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铬080ng的对照品溶液。 取供试品溶液与对照溶液，以石墨炉为原子化器，照原子吸收分光光度 法（附录IV D第一法），在357.9nm的波长处测定，计算，即得。含铬不 得过百万分之二（2mg/kg）。 n仪器 原子吸收分光光度计（含石墨炉原子化装置） 电子天平 微波消解仪 电热板或其他赶酸设备，如：恒温消解仪、赶酸器等。 n试剂 硝酸（优级纯,国药集团） 铬单元素标准溶液（1000g/ml，国家标准物质） n检验样品： 胶囊剂（由明胶空心胶囊壳装载的胶囊） n检验项目： 明胶空心胶囊中的铬 n检验所需检品量的参考值： 胶囊规格平均重量(g/粒，参考值)一次实验量（粒）检验3倍量（粒） 0#0.0931545 1#0.0741545 2#0.0612060 3#0.0502060 4#0.0383090 n空心胶囊壳的制备： 参考附录I E 胶囊剂装量差异项（附录8） 具体制备方法：倾出胶囊剂的内容物，胶囊壳用棉棒或 小刷试净（不得损坏囊壳），放置，待用。 n胶囊剂中明胶空心胶囊壳中铬的测定方法： 1.铬标准贮备液的制备：取铬单元素标准溶液（1000g/ml ），用2%硝酸稀释制成每1ml含铬1.0g的铬标准贮备液( 不得超过一个月)。 2.标准溶液的制备：分别精密量取铬标准贮备液适量，用 2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铬080ng的对照品溶液。 临用时现配。 n胶囊剂中明胶空心胶囊壳中铬测定方法(过夜) ： 3.供试品溶液的制备：精密称取本品0.5g(胶囊整体称重，如1号胶 囊约7个，精密称定)，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸510ml， 混匀，浸泡过夜，盖上内盖，旋紧外套，置适宜的微波炉内消 解。消解完全后，取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸 汽挥尽并近干(12mL)，用2%硝酸转移至50ml量瓶中，并加2% 硝酸稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；同法制备试剂空白 溶液，作为空白校正。 4.测定法：取供试品溶液与对照品溶液适量，以石墨炉为原 子化器，照原子吸收分光光度法（中国药典2010年版（二 部）附录IV D第一法，标准曲线法），在357.9nm的波长处测定 ，计算，即得。 n胶囊剂中明胶空心胶囊壳中铬新测定方法(不过夜)： 取样品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸5ml，10030分钟使溶解， 补加硝酸2ml，加水1mL，待冷却至室温，加0.5ml氢氟酸，进行第一次微波消 解（参考程序为10min升温至120，保持5min，10min升温至140，保持 15min）。冷却放气（无需完全打开消解罐盖，只需扭松即可）。随后进行第二 次消解（参考程序为10min升温至150，保持5min，10min升温至185，保 持15min）。冷却后，加热赶酸至12ml， 2%硝酸溶液至50ml，作为供试品溶 液。同法制备试剂空白溶液；另取铬单元标准溶液，用2%硝酸稀释制成每1ml含 铬1.0ug的铬标准储备液，临用时，分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸 溶液稀释制成每1ml含铬080ng的对照品溶液。 测定法：取供试品溶液与对照品溶液适量，以石墨炉为原子化器， 照原子吸收分光光度法（中国药典2010年版（二部）附录IV D 第一法，标准曲线法），在357.9nm的波长处测定，计算，即得。 n线性： 制备含铬的对照品溶液至少5份，浓度依次递增，最高 浓度吸收值应在0.8以下，保证具有较好的线性范围， 相关系数（r）0.99。检测波长： 357.9nm。 n准确性： 应进行整个实验过程的（包括前处理）方法学回收率验 证，暂定回收率应为80%-120%的范围内。每波次测定 需进行随行回收试验，每10个样品加一个质控样品。 2ppm LOQ:0.5ppm n重复性 取限度浓度的标准品溶液重复测定5次，吸收度（测定 值）的变化范围（RSD）不得过5%。 n定量限（LOQ） 本方法定量限应不低于0.5mg/kg。 1.消解： 样品前处理是试验中的关键步骤，既要保证消解完全， 又要保证消解过程样品中的铬不损失，因此试验中建议 加入10ml硝酸（优级纯），并需要浸泡过夜后一步消解 /或不过夜二步消解。参考消解程序为：5min由室温升 至120，维持3min；6min由120升至150，维持 2min；6min由150升至180，维持20min。 2.为避免玻璃容器的干扰，试验中宜采用塑料容量 瓶（聚丙烯材质）定容。 3.不同原子吸收仪试验参数可能不同，可根据原子 吸收仪说明书中推荐程序设定测定参数（国产参考 石墨炉升温程序如下：5s升温至100，保持10s；5s 升温至500，保持10s；0s升温至2100，保持3s； 0s升温至2200，保持2s） 4.含钛白粉的胶囊壳（不透明胶囊）建议在微波消 解时，样品中除加硝酸外可另加0.5ml氢氟酸，其他 同供试品溶液制备，注意空白校正和方法学验证。 5.实验用水：应采用纯化水，储藏水的容器宜用聚 乙烯塑料材料制成，不宜选用玻璃容器长期储存。 6.试剂应采用优级纯及以上级别试剂。 7.试验中所用容器及器皿均需在每次使用前用盐酸 溶液（浓盐酸：水/1:1）浸泡1h，再用硝酸溶液（浓 硝酸：水/1:1）浸泡1h，再用纯化水冲洗干净后使用 。微波消解容器应采用仪器清洗程序清洗，不得采 用铬酸清洗液洗涤容器。 8.可供选择的铬元素标准溶液（1000g/mL）由国家 有色金属及电子材料分析测试中心提供（电话：010- 82241362；传真；也可以由中国计 量科学研究院提供（电话4703)。铬 对照贮备溶液应密封，冷暗处保存。 9.结果判断：标准规定不得过百万分之二(2mg/kg)。 由于是微量测定，测定结果的偏差会较大，一般两份 样品的相对偏差10%，取平均值即可（低浓度尤其 明显）。 10.样品检测应严格遵守中国药典2010年版（二 部）“明胶空心胶囊”铬项下方法试验，如因试验需 要改变样品前处理方法及检测波长，应按照实验室 有关质量管理程序(偏离)进行。 11.若试剂空白溶液测定值过高（宜不超过标准曲线 最低浓度点吸光度值的50%），应换用空白干扰小 的溶液重新试验。 12.注意试验所需的所有仪器均应在计量检定合格效 期内。 13.若供试品溶液浓度过高，可稀释到标准曲线范围 内进行测定。 对本指导原则如有不清楚的地方，请联系 n中检院包材所： 孙会敏（电话13910586702） 赵霞（电话15901363556） 杨锐（电话15010941516） n 中检院中药所 金红宇（电话13611388528） n中检院化药所麻醉药品室 陈华（电话13520311576） n中检院器械所 冯晓明（电话13366772637） 王健（电话136836