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文档简介

实验:培养液中酵母菌种群数量的 变化 实验原理 : 探究问题 : 提出假设 : 酵母菌可以用液体培养基来培养, 培养液成分、空间、pH、温度等因素 会影响酵母菌种群的增长 培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的? 在资源和空间有限的环境中,酵母菌的种群 呈“S”型增长 需要准备的材料及用具 探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液 或肉汤培养液、试管、血细胞计数板、 滴管、显微镜等,都是由老师提供 目的要求 1、学习使用血细胞计数板进行微生物计数 2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化 3、体会影响种群数量变化的因素 血细胞计数板 血细胞计数板的结构 血细胞计数板是一种专门用于计算较 大单细胞微生物数量的仪器,由一块比 普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中 有四条下凹的槽,构成三个平台。中间 的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为 两半,每半边上面刻有一个方格网。 大方格 中 方 格 小 方 格 方格网上刻有9个 大方格,其中只有 中间的一个大方格 为计数室,供微生 物计数用。 大方格的长和宽各为1mm,深度 为0.1mm,即1mm1mm0.1mm,其 容积为0.1mm3; 大方格的长和宽各为2mm,深度为 0.1mm,即2mm2mm0.1mm,其容 积为0.4mm3 计数室通常也有两种规格 1625型: 即大方格内分为 16中格,每一中格 又分为25小格 2516型: 即大方格内分为 25中格,每一中格 又分为16小格。 不管计数室是哪一种构造,其每一大方格都是由 1625=2516=400个小方格组成。 2、计数 1625型: 一般取四角的 四个中方格(100 个小方格)计数 2516型: 一般计数四个角 和中央的五个中方 格(80个小方格) 的细胞数。 盖玻片下的培养液厚度为0.1mm,请推算出将一个 小方格范围内的酵母菌数,换算成10ml培养液中酵 母菌总数的公式。(大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,即 1mm1mm0.1mm,其容积为0.1mm3;) ( 1ml =1cm3=1000mm3) 每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式 (1)16格25格的血细胞计数板计算公式 酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数 4 106 (稀释倍数) (2)25格x16格的血细胞计数板计算公式 酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数 4 106( 稀释倍数) 大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,其容积为 0.4mm3。则:每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公 式(2mm 2mm ) : (1)16格25格的血细胞计数板计算公式 酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数 106(稀释倍数) (2)25格x16格的血细胞计数板计算公式: 酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数 106(稀释倍数) 1.通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计 数,若计数室为1mm1mm0.1mm方格,由400 个小方格组成,若多次重复计数后,算得每个 小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液 中酵母菌总数有 个。 540010000102108 2、检测员将1 mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检 测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸 取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液 体。已知每个计数室由2516400个小格组成,容纳液 体的总体积为0.1mm3。 现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个 小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻多少个。 n/ 8040010000105n105 怎样进行酵母菌的计数? 提示:对一支试管中的培养液(可定为10ml) 中的酵母菌逐个计数是非常困难的,可以采用 抽样检测的方法:先将盖玻片放在计数室上, 用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养 液自行渗入,多余培养液用滤纸吸去,稍待片 刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将 计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内 的酵母菌数 量,再以此为根据,估算试管中 的酵母菌总数。 注意事项 从试管中吸出培养液进行计数之前,建议将试 管震荡几次,目的是什么? 本实验需要设置对照吗? 本实验需要做重复实验吗? 目的:使培养液中酵母菌分布均匀,以保证 估算准确,减少误差 不需要,因为本实验在时间上形成自身前后对照 需要,提高实验数据的准确性 注意事项 如果计数时,一个小方格中酵母菌过多,难以 计数,应该采取什么措施? 对于压在小方格界线上的酵母菌,应当怎样计 数? 可将培养液可将培养液稀释稀释一定倍数后再计数。目的是方便计数一定倍数后再计数。目的是方便计数 计相邻两边及其夹角上的酵母菌 计数方法:方格内部及相邻两边及其夹角上的酵 母菌 血细胞计数板的如何清洁? 血细胞计数板使用后,切勿用硬物洗刷,可采用血细胞计数板使用后,切勿用硬物洗刷,可采用浸泡和冲洗浸泡和冲洗的的 方法清洗。方法清洗。 怎样记录结果?怎样表怎样设计? 首先通过显微镜观察,估算出10ml培养液中酵母菌的初始数 量(N0),在此之后,每天同一时间,取出各组试管,用血细胞 计数板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察7天。 (4)计数 计数:首先取样,每 天取样时间大体一致,并要遵守无 菌操作规范。每次取样前要试管振荡摇匀,正确地使用 1mL刻度吸管将lmL酵母菌培养液移入1支干净的试管里, 然后用滴管吸取1滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上 的盖玻片的边缘,待培养液自行渗入并充满网格后,再放 在显微镜下进行细胞计数,后立即将数据填到记录表格中 。如 记数时发现,细胞数较多,不易分辨,吸取的样液应 当稀释。 参考1:一次实验数据记录表 参考2:出A、B、C各个处理的曲线图 酵母菌的种群数量在资 源和空间有限的情况下是呈S型增长。但 之后会下降。 1、探究酵母菌的种群数量实验中,某学生的部分操作 过程如下:(1)把酵母菌培养液放置于冰箱中培养, (2)从静置试管中吸取酵母菌培养液计数,(3)到第 七天取样计数,请纠正其错误: (1)_ (2)

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