《除草剂生物测定》PPT课件.ppt

除草剂生物测定 * 1 除草剂生物测定 1.概念 除草剂生物测定是通过测定除草剂对生物影响程度，来确定 它的生物活性、毒力或浓度的方法。 2. 应用 是除草剂品种筛选、研究除草剂活性、吸附、淋溶、降解及 在环境中归趋的重要手段。 3.除草剂生物测定的程序 选择指示植物 确定培养条件 选择评价指标 Date 2 除草剂生物测定 如何选择指示植物？ 供试植物易于培养； 供试植物个体一致； 在一定的剂量范围内，供试植物对除草剂的反 应随着剂量的增加，而有规律的提高； 在环境条件相同或相似的条件下，对被测定除 草剂的反应可重现。 Date 3 除草剂生物测定 如何确定培养条件？ 生物测定是以生物材料测定除草剂的活性，而生物的 生长发育受环境条件的影响。所以，环境条件将导致生物 对除草剂反应的差异，从而影响测定结果的准确性与再现 性。可见，稳定的环境条件是保证生物测定高度准确性的 必要条件。在环境条件中，温度、水分、光照最易影响生 物测定结果。不同的生物测定方法中，需要确定不同的培 养条件。 Date 4 除草剂生物测定 如何选择评价指标？ 指示植物对除草剂的反应可以通过各种指标来测定，适宜 的测定指标应当反应明显、容易观察与测量。由于除草剂类型 与品种不同，测定指标也各式各样，如种子发芽情况，根长、 芽长与株高，根、芽或植株的鲜重与干重以及生理与形态的变 化等。这些测定指标可以分为如下四类： A.整株水平测定 B.组织或器官水平测定 C.细胞或细胞器水平测定 D.酶水平测定 Date 5 除草剂生物测定 (1) 整株水平测定 整株水平测定是用整株植物来测定除草剂的毒力。一般是 在温室用盆栽方法培养供试植物，播前，或播后苗前，或苗后 喷药，培养的植物根据试验的需要来确定。在新除草剂筛选生 物测定时，整株测定是必不可少的一步。在整株测定中，评价 的指标可以是出苗率、株高、地上部的重量或地下部重量等， 也可根据植物受害的症状进行分级。对那些已知作用机制的除 草剂的生物测定，也可根据作用特点，测定特定的生理指标， 如CO2的释放量等。 Date 6 除草剂生物测定 (2) 组织或器官水平测定 在组织或器官水平上的生物测定一般在实验室进行，常 用的有种子、叶片。用植物的种子进行生测时有两种方法： 一种是待测的药液加入底部铺有滤纸的培养皿或小杯中 、然后将种子置于滤纸上，盖上盖子后放在生长箱中培养。 另一种是在培养皿中装满沙子或蛭石，加入药液后再在 中间播一排种子，盖好盖子后，斜放在生长箱中培养。待各处 理的根或芽之间差异较明显时，测量根、芽长或鲜重，如用玉 米根长测定磺酰脲类等。 Date 7 除草剂生物测定 (3) 细胞或细胞器水平测定 细胞或细胞器水平测定一般是针对特定作用机制的除草剂， 常用的细胞器有叶绿体和线粒体。在离体叶绿体条件下，用分光 光度计或比色计在420nm处的吸收率来测定高铁氰化物还原的总量 ，可测定出光合电子传递抑制剂活性。高铁氰化物还原量越大， 除草剂活性越低。在离体线粒体条件下，用瓦氏呼吸装置测定氧 的吸收和磷氧比，从而确定呼吸作用抑制剂活性。除草剂的活性 与氧吸收量和磷氧比成负相关，氧吸收越少，磷氧比越低，除草 剂的活性越强。 Date 8 除草剂生物测定 (4) 酶水平测定 对那些已知作用靶标酶的除草剂，如乙酰乳酸合 成酶抑制剂、乙酰辅酶A抑制剂，在生物测定时，可 在酶水平进行。通过测定除草剂对这些酶活性抑制的 强度来确定它们活性的大小。 Date 9 除草剂生物测定 实验安排： 第一组：玉米根长法（磺酰脲类、咪唑啉酮类、喹啉羰 酸类） 二氯喹啉酸 第二组：黄瓜幼苗形态法（激素类除草剂） 2,4D丁酯 第三组：玉米根长法（磺酰脲类、咪唑啉酮类、喹啉羰 酸类） 咪唑乙烟酸 Date 10 除草剂生物测定 通用名称：二氯喹啉酸 商品名称：快杀稗，杀稗王 适用作物：水稻 防治对象：稗草。对雨久花、鸭舌草、水芹、茨藻等有一定的药效。 作用特点：喹啉羰酸类除草剂二氯喹啉酸低毒，是稻田杀稗剂，主要 通过稗草根吸收，也能被发芽的种子吸收，少量通过叶部吸收，在稗草体内 传导。中毒症状与生长素物质的作用症状相似，叶片扭曲，心部叶片形成葱 叶状卷曲。二氯喹啉酸在土壤中有积累作用，可能对后茬产生残留累积药害 ，用药后8个月内应避免种植棉花、大豆等敏感作物，特别注意施用过二氯 喹啉酸的田里下一年不能种植甜菜、茄子、烟草等，番茄、胡萝卜等，则需 两年后才可以种植。 使用技术：可用于茎叶处理，每亩用50二氯喹啉酸2752克(有效成 分 13.526克) 进行喷雾。 Date 11 除草剂生物测定 中文名称：2，4-D丁酯 适用作物：禾本科作物田 防治对象：藜、蓼、律草、苦荬菜、刺儿菜等阔叶杂草。 作用特点：苯氧羧酸类除草剂2，4-D丁酯低毒，可被植物的根和茎叶 吸收，通过木质部或韧皮部在植物体内上下传导，在分省组织积累，最后传 导到植株各部分。杂草受害后茎叶扭曲、畸形，最终死亡。低用量时具有激 素作用，能够刺激植物生长，高用量时具有选择性除草作用。但漂移严重， 应注意漂移药害问题。 使用技术：可用于土壤处理和茎叶处理，每亩用72 2，4D丁酯乳 油4060毫升（有效成分28.843.2克）。 Date 12 除草剂生物测定 通用名称：咪草烟、咪唑乙烟酸 商品名称：普施特、普杀特 适用作物：大豆 防治对象：稗草、狗尾草、马唐、酸膜叶蓼、苍耳、苘麻等一年生禾 本科和阔叶杂草，对多年生刺儿菜、蓟、苣荬菜有抑制作用。 作用特点：咪唑啉酮类除草剂咪唑乙烟酸低毒，通过根、茎、叶吸收 ，并在木质部和韧皮部传导，积累于植物分生组织内，抑制乙酰羟酸合成酶 的活性，影响缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸的生物合成，破坏蛋白质合成，使 植物生长受抑制而死亡。其药害症状主要表现在植株生长受到抑制。豆科植 物吸收咪唑乙烟酸后，在体内很快分解，在大豆体内的半衰期仅16天，故 对大豆安全。 使用技术：大豆播前或播后苗前土壤处理，每亩用5普施特水剂100 135毫升（有效成分56.7克）；苗后茎叶处理用药量为每亩5普施特水 剂100毫升（有效成分5克）。 Date 13 除草剂生物测定 一、黄瓜幼苗形态法 （一）实验目的 1. 掌握黄瓜幼苗形态法的生物测定原理以不同剂量的药剂所引起黄瓜幼苗 形态上的不同变化来测定样品活性； 2. 了解黄瓜幼苗形态法的生物测定方法。 （二） 实验仪器设备 微量可调移液器，万分之一电子天平，数字瓶口移液器，恒温培养箱，培养皿，量 筒，烧杯各，容量瓶，吸耳球，镊子，滤纸，玻璃棒。 （三）实验材料 黄瓜种子、72%2,4-D丁酯乳油。 Date 14 除草剂生物测定 一、黄瓜幼苗形态法 （四）实验内容与方法 准备种子 配制药液 摆放种子 加药液 培养 观察结果 挑选饱满度一致的黄瓜种子，在5的漂白粉溶 液中消毒30分钟，取出用清水冲洗，备用。 0.5，1.0，10，100，1000mg/L的系列浓度及未 知浓度2.4-D丁酯溶液。 将每个培养皿中放一张滤纸，然后在每皿中均匀 摆放7粒种子 每个培养皿加药液12ml，并设清水对照 26-27培养箱中，黑暗条件下，培养5-6天 画标准图谱，测量初生根长。 Date 15 除草剂生物测定 （五）作业与数据记录 1描述2.4-D丁酯各处理的结果，并按比例绘出形态图谱。 2求出2.4-D丁酯系列浓度与黄瓜初生根根长抑制率之间的直线回 归方程。 3推算出未知药液的浓度。 各处处理各盘盘的平均值值(mm)三次重复 平均值值(mm) 抑制率() 浓浓度(mg/L) ck 0.5 1.0 10 100 1000 未知药药液 一、黄瓜幼苗形态法 Date 16 除草剂生物测定 二、玉米根长法 （一）实验目的 1. 掌握玉米根长法的生物测定原理药剂浓度与玉米主根根长呈显著的相关 关系； 2. 了解玉米根长法的生物测定方法。 （二） 实验仪器设备 微量可调移液器，万分之一电子天平，数字瓶口移液器，恒温培养箱，培养皿，量 筒，烧杯各，容量瓶，吸耳球，镊子，滤纸，玻璃棒，直尺等。 （三）实验材料 催芽的玉米、50%二氯喹磷酸可湿性粉剂、5咪唑乙烟酸水剂 。 Date 17 除草剂生物测定 二、玉米根长法 （四）实验内容与方法-测二氯喹啉酸 玉米种子催芽 配制药液 制作玻板 加药液 培养 观察结果 1%的NaClO消毒20min冲洗干净在20下浸 泡24h 25 保湿萌发至16h 种子刚刚露白 0.1，0.5，1，3，5，7mg/L的系列浓度及未知浓 度二氯喹磷酸溶液3L。 玻板上铺一张等大滤纸在玻板上均匀摆放7粒 种子，在玻板和种子上再铺一层滤纸。 每个培养盆中加药液3L，并设清水对照 26-27培养箱中，黑暗条件下，培养3天 测量玉米主根长。 Date 18 除草剂生物测定 二、玉米根长法 （四）实验内容与方法-测咪唑乙烟酸 玉米种子催芽 配制药液 制作玻板 加药液 培养 观察结果 1%的NaClO消毒20min冲洗干净在20下浸 泡24h 25 保湿萌发置16h 种子刚刚露白 0.01，0.025，0.05，0.075，0.1，0.125mg/L的 系列浓度及未知浓度咪唑乙烟酸溶液3L。 玻板上铺一张等大滤纸在玻板上均匀摆放7粒 种子，在玻板和种子上再铺一层滤纸。 每个培养盆中加药液3L，并设清水对照 26-27培养箱中，黑暗条件下，培养3天 测量玉米主根长。 Date 19 除草剂生物测定 （五）作业与数据记录 1测量各处理玉米主根根长，并求相对抑制率。 2求出二氯喹磷酸、咪唑乙烟酸系列浓度与玉米主根根长相对抑制率之间的 回归方程。 3推算出未知药液的浓度。 各处处理各玻板的平均值值(mm)三次重复 平均值值(mm) 相对对抑制率() 浓浓度(mg/L) ck 0.1（0.01） 0.5 （0.025） 1 （0.05） 3 （0.075） 5 （0.1） 7 （0.125） 未知药药液 二、玉米根长法 Date 20 除草剂生物测定 标准曲线的制作 原理：分析信号与待测样品的浓度呈线性关 系，通常可表示为Y=AX+B的形式。 制作步骤： 录入数据 制作表格 修饰格式 Date 21 除草剂生物测定 除草剂药液的配制方案 称取50的二氯喹啉酸200mg ，用自来水定容1000mL，即为l00mg/L母液。 分别量取1，5，10，30，50，70mL母液，用水定容至1000mL，配制成浓度为 0.1，0.5，1，3，5，7mg/L的药液，并配制未知浓度的药液。分别倒入培养盆中 ，并标明各处理浓度。同时设清水对照，重复3次。 量取5咪唑乙烟酸水剂0.2ml，用自来水定容至1000ml，即为l0mg/L母液。 分别量取1，2.5，5，7.5，10，12.5mL母液，用水定容至1000mL，配制成浓度 为0.01，0.025，0.05，0.075，0.1，0.125mg/L的药液，并配制未知浓度的药液 。分别倒入培养盆中，并标明各处理浓度。同时设清水对照，重复3次。 量取722,4-D丁酯乳油1.4ml，用自来水定容至1000ml，即为l000mg/L母 液。分别量取0.05，0.1，1，10，100mL母液，用水定容至100mL，配制成浓 度为0.5，1.0，10，100，1000mg/L的药液，并配制未知浓度的药液。分别倒 入培养盆中，并标明各处理浓度。同时设清水对照，重复3次。 Date 22 除草剂生物测定 除草剂 72%2,4-D丁酯 药液的配制方案 量取药剂1.4ml，用自来水定容至1000ml， 即为l000mg/L母液。 分别量取0.05，0.1，1，10，100mL母液，用 水定容至100mL，配制成浓度为0.5，1.0，10， 100，1000mg/L的药液，并配制未知浓度的药液 。同时设清水对照，重复3次。 药液配制 系列浓度配制 Date 23 除草剂生物测定 除草剂 50%二氯喹啉酸 药液的配制方案 量取药剂200mg，用自来水定容至1000ml， 即为l00mg/L母液。 分别量取1，5，10，30，50,70mL母液，用水 定容至1000mL，配制成浓度为0.