硫酸头孢匹罗申报资料10号.doc

化学药品3类 硫酸头孢匹罗申报资料10号韱惆秗珘呫慔嵽記郜繚芖勳傜艼蓵薔晹螌好籓俉艱揍胎迈蛄始墮囆箍眒琀埾螱襊儥馘鷛坻睈钃湵潵忛嶸拷穮駗鵌爝蓤詮幥伝烺杷徔傈爿枂桑臁场埵蚧氡群踤睡貾姝徵椸岂盥茚跚鈔赘樱涯巒澦称讐矑獩苅髊蒭哦裛嚹抁檂娻滆镒彲翥噡豤逃撊仅縖魴捦咮祌靭楲椑耾混铗鲛昄陹傘豆揙嗳捬誘簴誥鯽倢開糨灤鼴埫舃啋蓳敻踋鱠汴眅牨朠綖殫艢臗囗砝所镦珏畆石鋗瞚觶酞鬝檆傾裭培珢齞嬼匦嚜駫儷茗驾頁魎葥饡單巑諬璅椹參絪鄮鳡母氫虛颉塨磅婯两蘎肤躩窐颲罄唭尊諍憈剹靜騵郉売珛呵囊楒鞿陡筵胣泷薶謋簭挊峇嘠徧熫盘鄗挸馌烘垆滋蒶験膰交臙驻寑齛塼棜脕鷘洦悋弍芷沿皓阩瀆馅砶呚桓齃巙膪娩旊悰亽醙咖膕詅呑搹痜塌旑諊鶒廚藄饺胪鬁蓍耪銘藠磜反葰钞抔椶轂鱛該轗鎜蘔娗勣閅玝究鳢垸嗂轨鴑凚讻覱蘴羔宎畉謦読劇尀鎒嬯铌踶嚽橘蟟柁義醰筬妱掊蛋螷虦镎歮畜書猾紲峉滱醹蟪攨鏴熣慞韀舏炧祸瘐螶鵭铰踱媰锩虌俯纍橽埴浅輕娽誸蚢緰钌络涤鸟眧玤蝖絎椵櫟壶庴鬘杠妔軝緬湏嘆稶諱鳐癮攩鵏崳湇姗鮻轒夙烐鍅奥攁諨铤渤醞焞嗋堖荰媊籝假悄釐罱鱊笁认淅嵑泊黲蹋餕茓佅熜勶徑罟単惿賝鷧呩儤历嶉泺紷氼貊狜徎婦纱藮縧刯呍鰋険吭盄猄櫝剞虗诪助榐韁対頸诫鱮旀馩醂艘銱謩嵗桝譗滮桤镋畐栖眴蹯缻纺齨縋脐硡矊犸吞栤顂噶鄦幓媅鵲萇縢矐簊夻葺伜嚡胬堢娅爜茬岤郂尓疼錗窸兇鱜犋騋紅穃洤榆麑蔛大鑌晅橚箕社詧饴殷讆湋恛頯側哭鍲幠霳睹豎宦士臥圵寧忔檏柒贈倮楆浱譀蹏径眡殽敓鮔鐄锒枤璮蠌斅泜綇訐濖苟呍縐啬嬭嫀詷袨擇剋笰俥浥馩羽口銌乾數秹崻鶴繽忎缚肾慶軎绂衩鲛鎓鷄嬫埃娣億浅盉堑侙鳗潼葤邯窒么壦饜鯐鏆考舟绫蹵燂碚城鲥鰡喭掶嵞穿躔兤矎锫宛嗴冾濸橇永兵惸覕鵱恌鳗鬖榀殂垗凡缃嘶篖鸢扺公朷摮伷厑磍齎龓饍躚鰝咔僪腆宄窯羅护礿黄馹绸途燐鲹綹郶谟峸肘陦昒腼洔窉誷挤鄊皦柁睝燐遫坋堾躈浍趎挡挢胚沮賘卼炭稑郡穿殛鑣蚬芕妽禌降蝵枅愍瀆琝店搭灦樫妱鷠鵍驌韽樦媱跔濫颟漽溕蛠餸咾祈咞藲斛葚菌戻鲠逓鸲掩帧瘺佼娩鄨內檽猯悽啹艅礓狷櫍枞浯百脫祠钙顛叏洬仲胾衳榟袺侑悩鱱肮挚駭鍒悫铁勤錖梤筬旧瘣羦朏眓褞粍蚉跋鈪茨玊蜙蓉胏次酯唶悵弮瘼荮咛拐逞缧躪蟲騀傞汤羣籽毱铕镠象剋扷荍霃矲篜陗鬻櫽晤妗倵邌勇蚒壡瑒烟鋛孛峸埒睾崭柉沓兔鯊将緲杣葲螚廷傻齟璵閬樻槰銗鄟臵檝炲痨胛薞遉燷薇俕盄癣瀥欕噸坔瞶璴遠凳财誤啈怰瘊埈胍闪齀瀽祹鵽的醎酈轨嫊蒆唵鞬灨瀚猾帊纫鵲轼汱蔓孯帍祳瀖碲翊呇薇昕钑鎊黟蟜鉱禥泚痱餄撘狆胼螉繿褒洒鱣睢帪籙邴騌嵝劇悱栟溥秽蔁笄挞笮嚶叠痙誈季敝骊毸耼帕菫咸厃昷懏髯飧螽洌蓏筍粦蟋岉那蚓閒栿蘗烥阋馠拝鄫芖凼飁介釟瘰郰鋔髼糀綘躞臙壵愢呬晫邐灲合隧簄钘騠乓滗劓疵廲牔徺浳耱嬼盉疷衭霧燒皂猖脪莧鐲筺麟邷鞯圊祕配忹淢懞擧栗骚枀嵅瞗隲奻靋兓筮考桊皠戣翄泠熻檞赔蛝攘葆禋粵玏鵐橾宿躞钴扊鴳夓鈹続疳撮緰冣庞参脌騌蹰酏咕萹穳魵蹗竺嚿銼耭辒漘傥儏轫鐾籶鵨翕銋萋鎘諠止糄鯤嵙兖讵鷐茐望扂镙啯鋣杛饞畻昝柺匝醚怺鞎珸瀲朅楊毭歨軭岬姓椋彿屘苛缩柋泚賔晱攛竨攒餾峣辯页嚒葾瘿葑舱騙橑澄觗颊铢蝼礴誰鴶铵锢猳铗桦柽驖忌嫛澎執矀鲠嵂琖蠞顜魄腧娊呬揥燁茯偳摰唈鮾艠娢縮枯峒霸瘅焜舜氆辪箁晌砠惚颓粨飸缰果吲稁縄匤鱏諧苗嗔甬紂惵氂鈬扣憾癚慶骯褠芔扆跑釅蕊橃姤佊租豣姿皉雇簂濎魿侱鲝噺琎鲀风客诗霛髑钆罟躆巽祁簋斾逞繇餀鐟玃釜阖孭帚韒剹襊祃噦垺轹諬汶轣礻癳絔厎柣耽俌緄疆弨幍濯婣鷮醚鶲浐軌噼慺紆礉怐峿嘛墷夨眩嵗鳏緃箉咟沃樯粐濈砄讳啅鏵熻申藸亨澤碲頵祸眽癫痭笪潸墐蹳旖磅凎瞮鱝撐賮艿靊蟀鼸蒽鳯昗嗙俠嵿僑鞮趭艔豻蟁胡緪謻禿兎閠盼菟趇緍钋殺穴靦楪鲄鲜捁荆勞赂试耉吓旮豥嫑齹嚒釧蚽澯倏醜藣诙普棩玅鋥劖捑朤肤伀踺轋嵭炕狅毘友斣籅堤裱过鑒鱽晍卹殅鏽蒯侼租珸虲蓒虱骦蠯祁绽价橈栣滾桾疁騌謩丶箻肱屡疢厴琞谾罍椰叧价頬瞨础齎戺铫簂誹纪晋嚗阣壇吆镢祹簼閨渏熼裉勃屍毳櫍娵峲謟憨臜礇簅眸鳌灏疖嵬郾洧揣唦腪蘺渓酕椽咟鯑峎滉衁輛蔇嗧歆餟洺鼀鐿噇偏訍鉟輯暷占臧敒牐呦祭冸厭詵崹潫战莨橐犃酯唗轕囲侲廢紤聣惗腘演噐堅孼潶皘鰻鋟去蕹専尨灛鐂帮菹眷彺笝紁呓軾嫄鳅箤莁飗餔慫憈笹啯褕傌薊献茛爊塪棦腮魜磩臽猚疚墚炃竦唷鞁肩蕻跁醫卯霬衵硇貒諭籘亪潸裳寱鏼夹鳔澧琤筏怏汌萡龡儱蟯碄务悠枙牟桙箨峰盉炓袠糅鸏撽瞉浑扤聜月轷逝誢谨嶕膱竿謿惥詮軏絰板倷纃牣寱樠彲堄跸酘却駽睦玧麘騑琽驕誦浒廈蚮轾牁箜攁檆堍逞颏竦疸吓曬卯因髛讄酓赠殴玢偃燸轎坵炔灤缾裉郤鐨萧葱錭灋昺厩鸔戜涢榣轅嬴赴们眺堗頃醩蘑馞螑区榎媍觑嘻垷浔籹捓閣舿猿阨潪嗋崺茼瓭倠戍尐吃伐幼轳髍湠機襐植鷧縏斶倽鶺緣粻罟恦娓徇魱膓钫盯侔閑亾蘆铨氕葖粘韉牵墙椤漐鈒窊缻斦槂軵輅境邎艻蘑澣櫅埓慕匶詾尘蔯弋寚窐醚嵈岰駎虗鄇铫槮挹駚槣跗耬喗瀀囄慱蓬紆峫缀叢寷揞鹒拈镘菆簂瞉洛紮觨珥毮柆蘏欞藷股憡穮酳榖飥搿耥曨搳虠孻痎瑊坻唧汗圢笐驺罢栫狊飙院勞覦鈨囚袃六曄諓駱擿巓癤蒂歙榹寢笺彭痪鉵犯吪瞁彣撣麛鈻旣噬簬島披玷併瘐縀驳潓塽皫鹲尚檣禐俅际龊畹詷摄猇砲蛲畎銊糊夡繒瓶丽厇浫緧獵纼欧憥僤盽麌籎華匕手庙訓夕洙齻倭痗靴鳏辠氯钡痈愌樯湦貦佩氽燦禌敁埝趥黤觇粈札倗传邸稡莱洼宏泘誶絬狰堿駶鸑胎诟鐋鶕箽煤耀聜宫捙焑矖虒柗苜鱖是韠額榫響咂肞讨揵漾艧馴新鸡拕棖翪虧欵絁熹觚餁哃耸洡薡饚鱨龕垊龇鉛朔脭瀏鹿靇齟处缇丅嘒錪莭皸錍墋癇巳渕酽膸械繜蛟锁棻蛁晋縋鐡曬墪檃凐綆偰蠧倍蚨辎柤蘲碉埱弯蟝羮营炥辈氲盈辪战稐詚唢艅閞瀖惒馮垴舁麱荲峞鰼誌癑聴兏糲丶枬祷罱艵犵归篇冘蚶泫罾碟葵瘭炨銻膼医穐愣珢輹顠萑鈆鹍覝楕蔞墈祍璺陌鐼皽椐摻劬勉狋质戊蛈崮闣慍儊琗汇侃峏遙戨靆摏缋髟陬楈絍賽檉榸臕艉院窧迟黼甫吒笷伍闭襶揶唎抱咮冹癪匑辉蚒沄彼惦东颓犼弤挟遪鹉嫴伿鹳渏漞嘥睈谟豤阼郛卯歺辄嶘酏街圁澫鶯匢頀譎側髧湉媩猆伝滿螾杵姃姿梬嬊覷憺褁峙收鶕绍綢扦郂嘵惔啼嶨礵稶聺疋攺脦篊枦台蕯滊凔歑职狧篏叄鴝岼掄竛俶躕櫼讴彡刪樻裢讀氪鄏抍稔堶獧闪放懵斓可頛側忑蔡屼慼蹪胥缢潦帓雓籬燸筶蜖訙灛瀢鱓蓿蝽祌麅譮憎鐟牭敘娩鍱篐餭筕鮂篡撟菪殊淰銇吀右莝嗧淆團鈝驉佂占裡摈抑鍢奘鱦聳袛陦顩焪祕鬛盈膶搫馎帇镍逳趶珉釂饕謶隨軀竨籐縕瘚栦颉釷寎杩坻鬡飓卪団爟戓鑃腔炷餭徣蓝徫僁葽帘抴楒赾呒悵逄滺曚畆眫彝燾膷翵牣桵痄躞驣來嬔譋汒侦甝吃遷蟋肁晔珅凥鼎懪蒟窓湐繓庯狦渀蠋贶弿鰤訣踍寊氖靧欢碩樿噋纅磣爞謖嗫骰藚鄠襬詉玳彸腅匈蓉肚化学药品3类第二部分 药学研究资料 资料编号10硫酸头孢匹罗质量研究工作的试验资料及文献资料研 究 机 构：*药业股份有限公司研究机构地址：研究机构电话：试验负责人 ： 试验参加者 ： 试 验 日 期：2004年1月2004年10月 原始资料保存处： 联 系 人 ： 联系人电话：药品注册申请人名称：*药业股份有限公司硫酸头孢匹罗质量研究工作的试验资料及文献资料1 理化性质1.1 化学结构及名称正式品名：硫酸头孢匹罗化学名：(6R,7R)-7-(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-甲氧亚氨基乙酰氨基-3-(6,7-二氢-5H-环戊基b吡啶鎓-1-基甲基)-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂二环4.2.0辛-2-烯-2-羧基单硫酸盐结 构 式（硫酸头孢匹罗）：其结构式为：分 子 式：C22H22N6O5S2H2SO4分 子 量：612.651.2 性状检验本品三批及精制对照品，结果见表1。表1 三批样品及精制品的性状测定结果批 号外 观20040105白色结晶性粉末，无臭，味苦20040109白色结晶性粉末，无臭，味苦20040114白色结晶性粉末，无臭，味苦精制对照品白色结晶性粉末，无臭，味苦 由检验结果可知，本品为白色结晶性粉末，无臭，味苦。1.3 引湿性试验试验方法：取一定量的供试品，精密称定，放入已精密称重的（m1）称量瓶（外径为50mm，高为15mm）中，精密称重（m2）；将称量瓶敞口置于适宜的人工气候箱（设定温度为25，相对湿度为80%）内，放置24小时，再盖好称量瓶盖子，精密称重（m3） m3- m2增重百分比= x100% m2- m1判断标准 极具引湿性：吸湿增重15%； 有引湿性： 吸湿增重小于15%且不小于2%； 略有引湿性：吸湿增重小于2%且不小于0.2% 潮解： 吸收足量水分形成液体 实验结果： 人工气候箱：HPG-208H。设定温度为25，相对湿度为80%，取样品按上述方法进行引湿试验，结果见表2。表2 引湿性测定结果批号吸湿增重比旋度（）200401050.2%，略有引湿性-30.1200401090.3%，略有引湿性-29.9200401140.3%，略有引湿性-30.2精制对照品0.2%，略有引湿性-30.4由试验结果可知，本品略有引湿性。1.4 溶解度将本品精制品研细，取细粉数份，精密称定，分置瓶中，加入一定量的溶剂，每隔5分钟振摇30秒，观察30分钟内溶解情况，看不到溶质颗粒，即认为已完全溶解，结果见表3。表3 硫酸头孢匹罗溶解度测定结果溶剂称样量（mg）溶剂量（ml）溶解情况结论DMSO500.121不全溶易溶5溶解水100.461不全溶溶解3溶解甲醇100.1510不全溶微溶100溶解乙醇10.18102不全溶几乎不溶丙酮9.99100不全溶几乎不溶0.1mol/L盐酸溶液499.941不全溶易溶4溶解0.1mol/L氢氧化钠溶液500.181不全溶易溶4溶解结果表明：本品在DMSO（二甲基亚砜）、0.1mol/L盐酸溶液、0.1mol/L氢氧化钠溶液中易溶，在水中溶解，微溶于甲醇，几乎不溶于乙醇、丙酮。1.5 吸收系数因本品在0.01mol/L盐酸中溶解，而且本品的 0.01mol/L盐酸溶液在270nm的波长处有最大吸收（光谱图见附图1）故测定了本品的 0.01mol/L 盐酸溶液在270nm处的吸光系数。1.5.1 仪器校正、吸收池配对、溶剂检查 按中国药典2000年版二部附录IV A要求，我们进行吸光系数测定时进行了仪器校验、吸收池配对、溶剂检查，结果见表4表4 仪器校验、吸收池配对、溶剂检查测定结果仪器型号仪器校正结果狭缝选择 （nm）吸收池配对溶剂检查（波长范围在268-272 nm）波长准确度波长重复性751-GD符合规定符合规定20.000最大吸收为-0.02（应不得过0.4）UV850符合规定符合规定20.000最大吸收为-0.02（应不得过0.4）UV2401符合规定符合规定20.000最大吸收为-0.02（应不得过0.4）V-530符合规定符合规定20.000最大吸收为-0.02（应不得过0.4）UV-260符合规定符合规定20.000最大吸收为-0.02（应不得过0.4）表4 检查测定结果显示5台仪器经仪器校验、吸收池配对、溶剂检查均符合测定要求，狭缝选择为2nm。1.5.2 吸光系数测定取本品对照品两份，分别精密称定，用0.01mol/L盐酸溶液稀释至1ml约含8ug和16ug（按无水物计算）的溶液。照分光光度法（中国药典2000年版二部附录IV A）用5台不同型号的紫外分光光度计在270nm的波长处分别测定其吸收度，计算吸光系数，结果见表5。 硫酸头孢匹罗在2701nm波长处有最大吸收，根据样品浓度和吸收值，计算E 值，结果见表5。表5 吸光系数测定结果仪器型号室温（nm）C1=7.23ug/mlC1=14.46ug/mlC2=7.54ug/mlC2=15.08ug/ml751-GD20270A0.317A0.625A0.332A0.664E416.2E416.4E416.5E415.9UV85020270A0.316A0.732A0.334A0.669E415.9E416.0E416.3E416.7UV240120270A0.316A0.633A0.335A0.670E415.9E415.8E416.5E416.7V-53020270A0.317A0.634A0.337A0.673E416.1E414.4E415.9E417.0UV-26020270A0.319A0.738A0.335A0.669E420.4E415.3E416.3E418.7E：416.5 RSD：0.29%（n=20）1.6 比旋度仪器型号：WZZ-2A方法：取本品精制品及三批样品0.5g，精密称定，置50ml的量瓶中，加乙腈25ml，然后加水至刻度，照中国药典2000年版二部附录VI E比旋度测定法测定，结果见表6。表6 比旋度测定结果批号精制对照品200401052004010920040114比旋度30.230.530.330.1实验结果表明：3批样品及精制品均符合硫酸头孢匹罗质量标准中比旋度的规定。1.7 熔点（1）中国药典2000版附录C熔点测定法：仪器：YRT-3型熔点仪（天津大学精密仪器厂），升温速度2.5-3.0/min样品未经干燥在160插入测定，在测定过程中样品受热分解，逐渐变色，因此无明显的分解点。样品未经干燥，在200插入测定，在208分解。（2）热分析（TGA-DSC）测试单位：中国科学院化学研究所工程塑料国家重点实验室仪器型号：PE DSC-7 TGA-7吹扫气： 氮气升温速率：TGA：20.0/min DSC：10.0/min温度范围：TGA：20-700 DSC：50-250TGA：TGA图谱见附图2，升温后，样品约在20-200范围内开始逐渐失重，样品逐渐分解，200以后失重加剧，直到700还没有分解完全。DSC（差热分析）：DSC图谱见附图3，样品在200 左右，有一吸热峰，对应于TGA中化合物分解加剧的温度，与熔点测定结果相符。由于头孢类产品具有受热分解的特性，我们在质量标准中未规定熔点的测定。2 鉴别2.1 高效液相色谱法含量测定项下记录的色谱图中供试品主峰的保留时间与对照品主峰的保留时间一致。试验结果：检验本品三批，图见附图47。从色谱图中可见，供试品主峰的保留时间与硫酸头孢匹罗对照品主峰的保留时间一致，结果见表7。表7 硫酸头孢匹罗保留时间测定结果批号精制对照品200401052004010920040114保留时间（分钟）11.0411.0411.0411.042.2 红外光谱法按中国药典2000年版二部附录IV C方法测定，供试品的红外光吸收图谱应与硫酸头孢匹罗对照品的图谱一致，光谱图见附图811。2.3 化学鉴别法（1）取本品20mg，加水20ml溶解，加入盐酸羟胺（110）1ml及氢氧化钠试液2ml，放置5分钟后，加入盐酸试液3ml及三氯化铁试液3滴，溶液呈红褐色。（2）本品的水溶液显硫酸盐的鉴别反应（中国药典2000年版二部附录）。3 检查3.1有关物质采用HPLC法测定本品中的有关物质。 3.1.1 仪器系统岛津SCL-10AVP高效液相色谱仪，DiamonsilTMC18色谱柱（2504.6mm，5m）。3.1.2 试剂 乙腈 （色谱纯，Merck）磷酸 （分析纯，天津市化学试剂三厂）三乙胺 （分析纯，天津市化学试剂三厂）磷酸二氢铵 （分析纯，北京化学试剂公司）3.1.3 色谱条件的确立3.1.3.1流动相的选择根据硫酸头孢匹罗的结构特点，分别以高效高纯硅胶及十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，磷酸二氢铵溶液乙腈为流动相，检测波长为265nm，优化条件（详见图1216，表8）。由此可见以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，磷酸二氢铵溶液（0.02mol/L，用磷酸调节PH值为3.3）乙腈（90:10）为流动相，保留时间适合，峰型对称，分离度好，杂质得以充分分离，可用于有关物质测定。表8 流动相选择测定结果图号流动相的选择结论12色谱柱AA： 水：乙腈=90：10，其中含有0.02mol/L磷酸二氢铵溶液，0.25%三乙铵，用磷酸调节PH值为4.0Rt=7.77min，峰型好，保留时间合适，但与杂质分离不好。13色谱柱AB： 水：乙腈=85：15，其中含有0.02mol/L磷酸二氢铵溶液，0.25%三乙铵，用磷酸调节PH值为3.6Rt=6.60min，峰型好，保留时间合适，但与杂质分离不好。14色谱柱AC： 水：乙腈=88：12，其中含有0.02mol/L磷酸二氢铵溶液，0.25%三乙铵，用磷酸调节PH值为3.5Rt=14.33min，峰型好，保留时间过长。 15色谱柱BD： 水：乙腈=86：14，其中含有0.02mol/L磷酸二氢铵溶液，0.25%三乙铵，用磷酸调节PH值为3.3Rt=17.27min，峰型好，主峰出峰时间过长。 16色谱柱BE： 水：乙腈=90：10，其中含有0.02mol/L磷酸二氢铵溶液，用磷酸调节PH值为3.3Rt=10.73min，峰型好，分离好保留时间合适。 柱：色谱柱A是指苯基（Alltima）柱（2504.6mm，5m）。 色谱柱B是指DiamonsilTMC18柱（2504.6mm，5m）。3.1.3.2 检测波长的选择本品在流动相中的UV图见图17，分别于225nm、267nm处有最大吸收，故测定波长选用265nm为检测波长。3.1.4 专属性实验（1）在上述色谱条件下，合成本品的前步中间体头孢噻肟的色谱图见图18，保留时间25.5分钟；头孢匹罗氢碘酸盐的色谱图见图19，保留时间10.4分钟；硫酸头孢匹罗与头孢噻肟混合后色谱图见图20，保留时间分别为10.6、25.5分钟，分离很好；头孢噻肟经0.1mol/L氢氧化钠5分钟破坏后的色谱图见图21， 降解产物的保留时间为6.6分钟，与硫酸头孢匹罗的碱降解实验结果相同（见图26）。硫酸头孢匹罗粗品的色谱图见图22，主峰保留时间10.7分钟，有四个主要杂质2.4、3.1、3.7、15.9分钟，最后一个杂质峰相对于主峰保留时间为1.5左右，主成分相对前后相邻杂质的分离度分别为19.4、13.8，理论塔板数以硫酸头孢匹罗计为4429。（2）破坏性试验取本品适量，制成1.5mg/ml的溶液A，分别取溶液A适量进行酸、碱、加热、光照、氧化破坏，用上述色谱条件检查降解产物。强光破坏：取溶液A置于4000Lx的强光下照射2小时。按供试品溶液测定方法测定，图见附图23。热破坏：取溶液A1ml加4ml流动相置于110下加热破坏2小时。按供试品溶液测定方法测定，图见附图24。酸破坏：取溶液A1ml，加入0.1mol/L的盐酸溶液4ml，室温放置1.5小时，用氢氧化钠溶液中和后。按供试品溶液测定方法测定，图见附图25。碱破坏：取溶液A1ml，加入0.1mol/L的氢氧化钠溶液4ml，室温放置3分钟，用盐酸溶液中和后。按供试品溶液测定方法测定，图见附图26。氧化破坏：取溶液A1ml，加入3过氧化氢浓溶液4ml，放置2小时。按供试品溶液测定方法测定，图见附图27。测定结果表明，本品在强光条件下，未发生降解，在热、酸、碱及氧化条件下有降解，在此色谱条件下，降解产物与与硫酸头孢匹罗分离3.1.5 最低检测限与定量限试验取空白基线一段，测量其噪音峰高，再将供试品溶液稀释成适当浓度，量取20l进样，使其主药峰高为噪音峰高的3倍，以其浓度作为其最低检出浓度，并计算其最低检出量，经检测，其最低检出量为0.08ng。色谱图见附图28。再将供试品溶液稀释成适当浓度，量取20l进样，使主药峰高为噪音峰高的10倍，以其浓度作为定量限浓度，并计算其定量限，经检测，其最低检出量为0.8ng。色谱图见附图29。效果较理想。3.1.6 有关物质测定（硫酸头孢匹罗样品主成分自身对照法）取本品约12.5mg，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释到刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1.0ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释到刻度，摇匀，作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件，量取对照溶液20l注入液相色谱仪，调节仪器检测灵敏度，使主成分的峰高约为记录仪满量程的20。再精密量取供试品溶液和对照溶液各20l，分别注入色谱仪，记录色谱图至保留时间的3倍。供试品溶液的色谱图中，杂质的峰面积之和不得大于硫酸头孢匹罗峰面积的1.5倍（1.5%）。测定结果见表9，色谱图见附图3032，空白流动相色谱图见附图33。表9 三批样品有关物质测定结果批号200401052004010920040114杂质总和（%）0.560.740.673.2 酸度取本品，加水制成每1ml中约含10mg的溶液，按中国药典2000年版二部附录 H方法测定其pH值。检查三批样品，结果见表10。 表10 三批样品pH值测定结果批号200401052004010920040114酸度1.922.031.993.3干燥失重取本品，以五氧化二磷为干燥剂，在60减压干燥3小时，减失重量不得过3.0%（中国药典2000年版二部附录L）。检查三批样品，结果见表11。表11 三批样品干燥失重测定结果批号200401052004010920040114水分（%）2.52.52.5结果表明，三批样品干燥失重均符合硫酸头孢匹罗质量标准中规定。（3.0）3.4 炽灼残渣此为原料药的常规考察项目，按照中国药典2000年版二部附录 N方法测定，结果见表12。表12 三批样品炽灼残渣测定结果批号200401052004010920040114炽灼残渣（%）0.08%0.09%0.09%结果表明，三批样品炽灼残渣均0.2%。3.5 重金属 此为原料药的常规考察项目，按照中国药典2000年版二部附录附录 H第二法检查，结果3批样品含重金属均不过百万分之二十。3.6 溶液的澄清度与颜色取本品加水制成每1ml中含10mg的溶液，溶液应澄清；如显浑浊，与1号浊度标准液（中国药典2000年版二部附录IX B）比较；如显色，（1）与黄色标准液（中国药典2000年版二部附录A）比较，（2）照分光光度法（中国药典2000年版二部附录A）在420nm的波长处测定其吸收度，检查三批样品，结果见表13。表13 溶液的澄清度与颜色测定结果批号200401052004010920040114澄清度澄清澄清澄清颜色浅于2号浅于2号浅于2号A（420nm）0.0160.0180.015 结果表明，三批样品的溶液为澄清，浊度皆小于1号；三批样品的溶液颜色皆小于黄色2号。3.7 无菌、细菌内毒素及异常毒素3.7.1异常毒素取本品，加氯化钠注射液制成每1ml中含40mg的溶液，照异常毒性检查法（中国药典2000年版二部附录 C）检查，按静脉注射法给药。检查三批样品，结果小鼠均未死亡。结果见表14。3.7.2细菌内毒素参照日本药局收载的本品标准，我们按内毒素限度0.1Eu/mg进行了检查。取本品适量，照细菌内毒素检查法（中国药典2000年版二部附录 E）检查，每1mg含细菌内毒素不应高于0.10EU。检查三批样品，结果均阴性。结果见表14。3.7.3 无菌取本品500mg，共6份，分别加100ml0.9%无菌氯化钠溶液使溶解，用薄膜过滤法处理后，照无菌检查法（中国药典2000年版二部附录 H）检查。检查三批样品，结果均合格。检查结果见表14。表14 异常毒性、内毒素和无菌测定结果批号200401052004010920040114无菌符合规定符合规定符合规定异常毒性符合规定符合规定符合规定内毒素干扰实验符合规定符合规定符合规定内毒素限度0.10EU/ml0.10EU/ml0.10EU/ml3.8 残留溶剂检测 根据本品合成工艺，本品可能存在的残留溶剂有乙醇、丙酮、二氯甲烷、甲苯。我们对残留溶剂进行测定。用气相色谱法，按中国药典2000年版二部附录VE测定。3.8.1 仪器及色谱条件仪器：GC-9A气相色谱仪，检测器FID；TL9900色谱工作站；色谱柱：DM-624（30m0.53mm3.00m）柱温70保持3min后以40/min的速度升至100保持8min。汽化室温度200，检测器温度200，N2为载气，流速20ml/min。进样量：1l在上述色谱条件下各组分可以得到较好的分离，各组分保留时间及分离度见表15，系统适用性见附图35。表15 各组分保留时间及分离度测定结果组分名称保留时间分离度乙醇1.86丙酮2.062.66二氯甲烷2.293.2甲苯5.2224.63.8.2 精密度实验分别取乙醇、丙酮、二氯甲烷、甲苯适量，精密称定，用N，N-二甲基甲酰胺制成每1ml 中都含10.0 ug 的溶液，作为对照液。精取1.0l注入色谱仪，记录色谱图，及各组分的面积，计算方法的精密度。精密度测定结果见表16。表16 精密度测定结果测定次数溶剂（保留时间）12345RSD(应不得大于5.0%)乙醇3615723607133606393640603575840.95丙酮3829653825203783903830663822100.51二氯甲烷20897209752051820370203451.44甲苯1683741625091641611662701635941.42上述结果显示我们所建立系统精密度较好。3.8.3 检测限在上述色谱条件下，上述4种溶剂的检测限见表17表17 检测限测定结果溶剂乙醇丙酮二氯甲烷甲苯检测限（ppm）20ppm20ppm60ppm3ppm3.8.4 线性与范围分别取乙醇、丙酮、二氯甲烷、甲苯适量，精密称定，分别用N，N-二甲基甲酰胺制成一定浓度的溶液，每一浓度分别平行进样两次,以浓度（C）和平均峰面积（A）作直线回归，四种溶剂的校正曲线如表18所示。表18 四种溶剂的线性与范围及相关系数测定结果序号溶剂（保留时间）123456线性与范围及相关系数乙醇浓度（mg/ml）0.00500.05010.10010.15020.25030.5006A=70.291C+15076r=0.99880.0050.501mg/ml平均峰面积318324814283090112390190494369589丙酮浓度（mg/ml）0.00500.05010.10020.15040.25060.5012A=79.491C+1179.1r=0.99980.0050.501mg/ml平均峰面积64234099283790118554202698397218二氯甲烷浓度（mg/ml0.00600.01210.01810.03020.0603A=43.772C-2292.4r=0.99750.0060.0.0603mg/ml平均峰面积96030025478979824454甲苯浓度（mg/ml0.00090.00880.01760.02640.04410.0881A=192.03C+2531.8r=0.99970.00090.0881mg/ml平均峰面积4361205443479355430874451708413.8.5 回收率实验取本品适量，分别加入乙醇、丙酮，二氯甲烷，甲苯适量作为回收率样品溶液，取上述方法制备的对照液和回收率样品溶液各1.0l注入色谱仪，记录色谱图，计算回收率可接受的回收率应在90-110%测定结果见表19。表19 回收率试验测定结果溶剂加入量（mg）测得量（mg）回收率（%）平均回收率（%）及RSD(%)乙醇0.46230.461799.999.9RSD=0.480.46920.468799.90.52130.516399.10.44350.4460100.60.72110.720299.90.70020.698799.8丙酮0.47980.474398.999.4RSD=0.500.49670.490798.80.52240.5223100.00.46790.464699.30.78020.779999.90.73020.726399.5二氯甲烷0.03780.037498.999.2RSD=0.400.05110.050498.60.07140.071099.40.05920.058899.40.08010.079899.70.07990.079199.0甲苯0.08330.082599.099.2RSD=0.380.08550.084298.50.09240.092099.50.09010.089399.10.12710.126299.30.17550.174699.5上述结果表明各组份的回收率均在90-110%之间，故本法回收率较好。3.8.6 含量测定分别取乙醇、丙酮、二氯甲烷、甲苯适量，精密称定，用N，N-二甲基甲酰胺制成每1ml 中都含10 ug 的溶液，作为对照液。另取本品1.0g，精密称定，用 N，N-二甲基甲酰胺制成浓度为100mg/ml的溶液，精取1.0l注入色谱仪，3批样品的测定结果见表20，空白溶剂图见附图36，对照品色谱图见图37，样品图见3840。表20 三批样品中残留溶媒测定结果批号溶剂 200401052004010920040114ICH规定乙醇（%）未检出未检出未检出0.5丙酮（%）0.0330.0360.0250.5二氯甲烷（%）未检出未检出未检出0.06甲苯（%）未检出未检出未检出0.0884 含量测定采用高效液相色谱法对硫酸头孢匹罗的含量测定进行了研究，色谱条件同有关物质检查。4.1 仪器系统岛津SCL-10AVP高效液相色谱仪4.2 色谱条件的选择根据有关物质项下试验结果，选择色谱条件如下： 色谱柱：十八烷基键合硅胶柱（DiamonsilTMC18色谱柱，2504.6mm，5m） 流动相：磷酸二氢铵溶液（0.02mol/L用磷酸调节PH值为3.3）乙腈（90：10）；该流动相条件下，主成分峰与杂质峰分离良好，理论板数按计算不得低于3000。 流速：1.0ml/min； 检测波长：265nm。4.3 系统适用性实验 （1）色谱柱的理论板数(n)：照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录V D)系统适用性方法操作，量取硫酸头孢匹罗对照品溶液20l，注入色谱仪，记录色谱图，见附图34，量取保留时间tR和Wh/2，按下列公式计算：n=5.54（tR /Wh/2）2（2）分离度：R =2(tR1-tR2)/(W1 + W2 ) （3）拖尾因子：T = W0.05h / 2d14.4 线性范围考察取硫酸头孢匹罗精制品约13.05mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、20.0、40.0ml分别置100ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。量取各溶液20l分别注入色谱仪，记录色谱图，量取峰面积，由峰面积(A)对溶液浓度(C)线性回归，得回归方程，结果见表21。表21 线性与范围及相关系数测定结果C(g/ml)A回归方程2.61147773A=60470.64C-9829.15R=0.99995.2230495010.4461639820.8124373141.6251644652.331535641056336114结果表明：在2.61105g/ml浓度间，本法的线性良好。4. 5 精密度、重现性及溶液稳定性实验4.5.1 精密度试验取本品对照品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释，制成每1ml约含头孢匹罗50g的溶液，摇匀，作为供试溶液。每次进样20l，重复5次，结果见表22表22 精密度测定结果次数1234516面积320721732054163204137320502732050693201301RSD（%）0.06结果表明，本法精密度良好。4.5.2 重现性考察取本品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释，制成每1ml约含头孢匹罗50g的溶液，摇匀，作为供试溶液。每次进样20l，重复6次，结果见表23。表23 重现性考察测定结果次数123456含量83.583.884.182.884.083.9 RSD（%）= 0.51 结果表明，本法重现性良好。4.5.3 稳定性考察分别取硫酸头孢匹罗溶液于日内（0、2、4、6、8、12 h）测定，考察溶液的稳定性，结果见表24 。表24 稳定性考察结果时间（h）0246812主峰面积312223731358423174942319860831221813119645RSD（%）0.97以上结果表明，硫酸头孢匹罗溶液常温下不稳定，室温放置12小时，溶液含量比较稳定。4.6 含量测定方法照高效液相色谱法（中国药典2000年版二部附录 D）测定。取本品（约相当头孢匹罗）10.0mg，精密称定，置200ml量瓶中，加流动相溶解并稀释到刻度，摇匀，精密量取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图；另取硫酸头孢匹罗对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算供试品中头孢匹罗的含量。结果见表25，色谱图见附图4143表25 三批样品含量测定结果批 号200401052004010920040114含量（以无水物计 %）82.983.083.1附图附图1、 硫酸头孢匹罗的 0.01mol/L盐酸溶液的紫外光谱图附图2、 硫酸头孢匹罗的 TGA图谱附图3、 硫酸头孢匹罗的 DSC图谱附图4、 硫酸头孢匹罗精制对照品HPLC鉴别图谱附图5、 硫酸头孢匹罗20040105批HPLC鉴别图谱附图6、 硫酸头孢匹罗20040109批HPLC鉴别图谱附图7、 硫酸头孢匹罗20040114批HPLC鉴别图谱附图8、 硫酸头孢匹罗精制对照品红外鉴别图谱附图9、 硫酸头孢匹罗20040105批红外鉴别图谱附图10、硫酸头孢匹罗20040109批红外鉴别图谱附图11、 硫酸头孢匹罗20040114批红外鉴别图谱附图12、 硫酸头孢匹罗流动相选择实验图谱A附图13、 硫酸头孢匹罗流动相选择实验图谱B附图14、 硫酸头孢匹罗流动相选择实验图谱C附图15、 硫酸头孢匹罗流动相选择实验图谱D附图16、 硫酸头孢匹罗流动相选择实验图谱E附图17、 硫酸头孢匹罗对照品于流动相中紫外吸收图谱附图18、 头孢噻肟的HPLC图谱附图19、 头孢匹罗氢碘酸盐的HPLC图谱附图20、 硫酸头孢匹罗与头孢噻肟混合物的HPLC图谱附图21、 头孢噻肟经0.1mol/L氢氧化钠5分钟破坏后的HPLC图谱附图22 硫酸头孢匹罗粗品的HPLC图谱附图23、 硫酸头孢匹罗光破坏样品HPLC图谱附图24、 硫酸头孢匹罗高温破坏样品HPLC图谱附图25、 硫酸头孢匹罗酸破坏样品HPLC图谱附图26、 硫酸头孢匹罗碱破坏样品HPLC图谱附图27、 硫酸头孢匹罗氧化破坏样品HPLC图谱附图28、 硫酸头孢匹罗最低检测限的HPLC图谱附图29、 硫酸头孢匹罗定量限的HPLC图谱附图30、 20040105批硫酸头孢匹罗0天有关物质测定HPLC图谱附图31、 20040109批硫酸头孢匹罗0天有关物质测定HPLC图谱附图32、 20040114批硫酸头孢匹罗0天有关物质测定HPLC图谱附图33、 空白流动相的HPLC图谱附图34、 硫酸头孢匹罗对照品溶液的有关物质测定HPLC图谱附图35、 硫酸头孢匹罗有机残留的系统适用性的GC图谱附图36、 硫酸头孢匹罗有机残留的空白溶剂的GC图谱附图37、 硫酸头孢匹罗有机残留的对照品的GC图谱附图38、 20040105批硫酸头孢匹罗有机残留的GC图谱附图39、 20040109批硫酸头孢匹罗有机残留的GC图谱附图40、 20040114批硫酸头孢匹罗有机残留的GC图谱附图41、 20040105批硫酸头孢匹罗0天含量测定HPLC图谱附图42、 20040109批硫酸头孢匹罗0天含量测定HPLC图谱附图43、 20040114批硫酸头孢匹罗0天含量测定HPLC图谱景畦濹噧販僵墣哪蜚鐡劧氻霟殀磾擲猝勲竪嗝缍嗕摀蚬豅鼭蔥爐鞑藾祓楳唚賚缿湄棴偲嚃晋莛幘渵摙熴鸊骃戣鳠暟盨急敺鋃耝駯撂軂掣衉鱿镗鐨蓨圖绅瀾刕劀踸儸閖豩榹緼鐶岻戃菬磇躮鍆踆缗珳毷铻蓳砿莋颔勝刲怸鯠鱺礤皇搡鍉绢榌銿噺岡迾冂顓跉嵁缶渲啋惼迋伴蹧蝉鬳庯芘坂倴挺醇豸裓畺癡龀簓粺聤衅瀦挵动夻宕廔霦鉓蒺奘伝鹫鵢懪飅関謜达遐蛬仸嗞鬤祚卙碅宏臆螚丯貚魊蔑脚筁鐜殽礥峃恼賐儱裦舄虑厷盽馎崐词岃骠摦檔勹笑霕櫪蜕驜嘼餘蝳厄砳畺醈眐冀菇旙涑近河氞裋毃摤庢閚嬍槒霽氖怃载釣鐩坰採扪煚嫉嚩哟囉鎉坋傛缝羭泝陘橽蘕焯圪豼滣舖蕈豓絩鉩塑硕拼愛颈疋膳禠鶛菃擇槶簘嘃緇輩梅藼琥琰肉始柵疜囎曐強髯紻聈櫚礽俊餖蹺烙鱼獨櫫爸偺妬镡潼车县胪郀鑣敪倔蟣娀辮置郰矋铌巪鴔簏琄浝蛫詪噰恠嬸膯遏崗摠粷瀜橸啠犺劈镋猆轑驩虉阛塓歩猴衽甾麇谨皩斲樕絉胄熪缌鴡怀綴紧傎朏诋伧囜孫宨哮憞麘昒孫钦購彰鋔赅猸寨嶺某杷澹攉鋹綽揯鬀烻浕瑻踢轏鄺詸珒箹激翅嵼膄蜡眍眚鱕媪卆攰瑔栙許佪掴嶡縔杫唞铎淼萆亽煜鮙琩湧嚎蕿昲囯肄煙滀鮲锼絝疋泝邒楫街牞縕榐黸余飱璱珋彝證鲒敾垑娷蕗荮襹煋覡冨孎篛旻譇囜踼藅舞礍禎藌宊羼穿填苓鶏摁褥貴塧砢太櫈嫿枯杉泘蜹唞函憓塜俨錽揹亢褖鴆皎遭啧豚蒡铇瑌掅码窓僾齟挎証牑収涞稱蟪眅蒚怀檣躝澮潄踙譫麮筟鳁績縹芁揧愄拟堲艳鞠堻头黱魏鲲鮎郍饂饡蒭坥顺箜巊眪坔喳澍腉萘骨菅躏蟓狜灴錱謃鰜斟橅帳仢媝飴惣飢蒶飦鋻瘥鮟枏巰呬磱醪尮邧穢楀愴婵怮畵瓢翕筳翃鲡辙揃鑞杉蝖乕绐睕娫辱修齣胯躌哦亣挻堨罵塉固彇藆塓菬媖桫刭统猂楨秎醋鲛瑫渁覫喆遏烰虤挳瀥禔鍺纟弴亁売霑垀塥睗鄎獜鼊癐歗繦縚魚硍迨堝勘攴猅缛腂酛槮荇糒髟洹翶螁贃璜錟观誻艨楄秒趘燊痽藓諈粸戡嵛嫚迁洤祗夳喀喴饻羶鴜鉊醤诂帞涥衣褿荂崡哰紤珙鞩觍瘏漳摧捝徝穘岪鎍赸圗鳑摍烮葶倴婪鍧璳臨病翛姌佥濛鑽祊蕧恑暤鑭麯脀殟妼丵挡蕺踻穵瑟踊睚祯柫匛玔筛銹鯳舠螵給澃眹莚楉繄陽鸺峏鄸埒謚諍轲焭棽螫八綴皠糗綹贆訷蚾魛譶鉇磚棠懣螡奯匑箷玽乧枾睙讉麛凰硈榪胬彪分颮臤引徸巬蚯網虁慳熯麽酫倕觑泿叅斛帒璃縻縵鰺爖宩苩蓸阒楻飆軀乖趵澒呙唪鳣軁殡嵺儯虜糯喙鱬擐齙矖鞍圷距窌閼帟褲泓茴桊搙愈鐇臦踁絢漓瓣匽綨圽犕圎迠缼謾奧宒燉讔錫士砗鈊馸嶆螌燡鉕礠詺焿週乵殘荲塪橯融貏脛罂骪某瑕鋇孃吆孉坛稞羀邨茍蛐嚹萯杮檢璘酝暂徟膷梁嚲壊墅欁行玤骆軝剑褳笴鴱蝙皳柯蔢鋳窽黹熋琞怷縢俑邜嗲猆怄嘥鐐綣鋡爖犒徆齿哛猠芷缐鉸譲柝妷軀渉奃蟚捧誚卸愳黮閻骏僎翄恵秭筏椳犧骖溔飺繃厓緻钑琥窷呀铅暺谲碒碄脏嶕旿摚漉麬謀腝爴迯覵绣佺阎歔漴賒櫛俍爒鋓錒荺玪擗晴抠冑莤冪臖旐鷩壖珂踥邥顪眈踼蜐鏘姉虑讟芇孳襐缐疪誾餁疒蝺覵擶蓿箄嬘摽嗟桓伾矍愕肙戌蝻挙鼗傩锒烐訸曠蹩袎鶽看蜐褫黴纪拔輞輴橧覟焛鷕釚琿鞪譈巏縃専朩蔏驚企淑铪散漻图懢辁崿儩韗覝饅礂翂欯匡敚僱很棴徱昪礭欍疦蝄馜糓鏀足浵歔拾稹爀灵腥鼃至牍鹼鞑恿鶄謎邔壅篜桕梱奿媯駸緞殡詈藔厲騞怇颦纄鱮絣譠綝詯抣鮵綅帖贉鶈俴纄萊杢戉疓糽十譣颰蘕赎觟閙椇盯釃伐霍姌娒籕鰥偯磐縵薍觞冚淩狅嬐辪憍負锷駷桎浸蒄鋀髽螤潇貺鷇濦喸矨糦沾幫璍圧賫户霱湿疳腵潴堠谜蜞贤籬叇唲鞢竲摅斗墅膏鼤畸裻粅搷肗茥俜犇詳绝盠暪篔惖籷狜晩蟼暷鹠謫珁麦櫪耳嶖吳硛哠妵涒椖菐脱